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腺苷到肌苷 (A-to-I) 编辑是一种保守的真核 RNA 修饰,有助于发育、免疫反应和整体细胞功能。RNA 编辑模式在不同细胞和组织类型之间可能存在显著差异,而过度活跃的 A-to-I 特征则表明存在多种疾病,包括癌症和自身免疫性疾病。由于这些差异具有生物学和临床重要性,因此迫切需要有效的方法来测量细胞 RNA 中的整体 A-to-I 编辑水平。当前的标准方法依赖于 RNA-seq 来间接检测编辑位点,这需要大量时间和材料投入以及大量的计算分析。在这里,我们利用核酸内切酶 V (EndoV)(它特异性地与 RNA 中的肌苷结合)来开发基于蛋白质的化学发光生物测定法,以直接分析 A-to-I RNA 编辑活性。我们之前展示了 EndoV 可以在 RNA 测序之前结合并丰富 A-to-I 编辑的转录本,现在我们利用这一活性构建 EndoV 连接免疫吸附测定 (EndoVLISA),作为一种快速的、基于板的化学发光方法,用于测量细胞 RNA 中的全局 A-to-I 编辑特征。我们首先使用化学合成的寡核苷酸优化和验证我们的测定方法,说明对 RNA 中的肌苷具有高度选择性和灵敏度的检测。然后,我们展示了对处理过的细胞系中肌苷含量的快速检测,证明了与当前标准 RNA 测序方法相当的性能。最后,我们部署了 EndoVLISA 来分析正常和患病人体组织中的差异 A-to-I RNA 编辑特征,说明了我们的平台作为诊断生物测定的实用性。总之,EndoVLISA 方法经济高效、简单易用,并且使用常见的实验室设备,为研究 A-to-I 编辑提供了一种高度可用的新方法。此外,多孔板格式使其成为第一个适用于直接高通量量化 A-to-I 编辑的检测方法,可用于疾病检测和药物开发。
引言公共可变免疫效率(CVID),最普遍的症状性原发免疫剂效应,其特征是低水平的血清IgG,IgA和/或IgM,并且缺乏特定抗体的产生(1-3)。与其他原发性免疫缺陷一样,CVID患者易于反复发生严重感染。 值得注意的是,至少有50%的CVID患者会产生额外的炎性互补(4,5)。 这些非感染性表现包括自身免疫性,间质性肺部疾病,肠道,肝脏结节再生增生,全身性肉芽肿性疾病,淋巴样增生和淋巴样恶性肿瘤(4-7)。 这些并发症是一个主要的临床挑战,因为标准IgG替代疗法并未大大改善它们。 整体上,炎症状况导致CVID患者的发病率和死亡率估计增加了11倍(5)。 最近的研究已经鉴定出遗传缺陷导致20%–25%的个体中B细胞发育丧失和免疫调节中的其他缺陷,但是在大多数情况下,CVID中炎性复杂性的发病机理仍然无法解释(8,9)。 我们先前证明了通过mRNA转录pro填充的这些个体中IFN相关途径的明显上调(10)。 这个IFN签名还区分了具有炎症条件的CVID的个体与其他具有CVID和健康对照的个人。 但是,这些免疫反应的刺激尚不清楚。 菌群特异性IgG已在小鼠中检测到,健康与其他原发性免疫缺陷一样,CVID患者易于反复发生严重感染。值得注意的是,至少有50%的CVID患者会产生额外的炎性互补(4,5)。这些非感染性表现包括自身免疫性,间质性肺部疾病,肠道,肝脏结节再生增生,全身性肉芽肿性疾病,淋巴样增生和淋巴样恶性肿瘤(4-7)。这些并发症是一个主要的临床挑战,因为标准IgG替代疗法并未大大改善它们。整体上,炎症状况导致CVID患者的发病率和死亡率估计增加了11倍(5)。最近的研究已经鉴定出遗传缺陷导致20%–25%的个体中B细胞发育丧失和免疫调节中的其他缺陷,但是在大多数情况下,CVID中炎性复杂性的发病机理仍然无法解释(8,9)。我们先前证明了通过mRNA转录pro填充的这些个体中IFN相关途径的明显上调(10)。这个IFN签名还区分了具有炎症条件的CVID的个体与其他具有CVID和健康对照的个人。但是,这些免疫反应的刺激尚不清楚。菌群特异性IgG已在小鼠中检测到,健康为了确定这种病理IFN签名的起源,我们使用了质量细胞仪,发现在外周血和胃肠道和胃肠道患者中,IFN-γ,IL-17A和IL-22呈阳性的先天淋巴样细胞(ILCS)呈阳性,患有CVID的患者呈伴有cVID的患者(11)。ilcs通常在宿主 - 常识稳态中起重要作用(12),它们的过度活性和/或增殖似乎有助于CVID中的系统性和器官特异性炎症。体液免疫有助于在实验动物模型中对共生生物的解剖遏制(13)。在小鼠中,已显示分泌的IgA和IgM限制了来自粘膜室的细菌易位(14-17)。
摘要:碳纳米植物是一类碳纳米 - 合金支出,已通过来自各种前体的不同途径和方法合成。所选的前体,合成方法和条件可以强烈改变所得材料及其预期应用的理化特性。在此,通过将热解和化学氧化方法结合使用D-葡萄糖从D-葡萄糖中合成碳纳米植物(CND)。在产物和量子产率上研究了热解温度,氧化剂的等效物和回流时间的影响。在最佳条件下(300°C的热解温度,4.41等于H 2 O 2,90分钟的回流)CNDS分别获得了40%和3.6%的产品和量子收率。获得的CND被负电荷(ζ - -potential = - 32 mV),非常分散在水中,平均直径为2.2 nm。此外,在CNDS合成过程中,引入了氢氧化铵(NH 4 OH)作为脱水和/或钝化剂,导致产物和量子产率的显着提高约为1.5和3.76倍。合成的CND显示出针对不同革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌菌株的广泛抗菌活性。两个合成的CND都会导致高度菌落形成单位还原(CFU),大多数测试细菌菌株的范围从98%至99.99%。然而,在没有NH 4 OH的情况下合成的CND,由于充满氧化基团的负电荷的表面,在区域抑制和最小抑制浓度方面表现更好。含有高氧纳米模型的抗菌活性升高与其ROS形成能力直接相关。关键字:D-葡萄糖,热解,氧化,细菌感染,最小抑制浓度,CFU降低■简介
迄今为止,欧洲最常见的短期本地灵活性来源是主动网络管理方案 (ANM)。这些方案利用电网灵活性来管理实时或预期拥塞,采用最合适的电网配置来减少电力限制。这些解决方案主要在法国、意大利、比利时开发,在西班牙开发程度较低。电网重新配置可以无成本地解决限制问题,因为无需重新调度。另一种形式的 ANM 是由灵活连接提供的。这些连接的合同安排包括较低的初始连接电网成本,以换取可能无补偿的削减。在可再生能源发电渗透率较低的情况下,可再生能源开发商可以考虑这些合同作为替代方案,但随着更多可再生能源项目连接到同一接入点,削减风险会增加,这可能会阻碍这些项目的商业案例。在这些情况下,可以使用本地灵活性产品(例如需求开启和关闭)来管理这些风险。
腺病毒5 WA蛋白复合物是从病毒体中分离出来的,作为双链wra分子,由每条链的5'末端共同连接到Imknawn功能的Virion蛋白上。可以用大肠杆菌异核酸酶III消化WA-蛋白质复合物,以产生类似于WA复制中间体的NOLECULES,因为它们包含长长的单个绞线区域,以5'tenmini结合到最高的蛋白质。非核酸酶III消化大大降低了原酶消化腺病毒5 WNA的感染性。hawever,当至少2400个核苷酸被重重载时,KA蛋白复合物的感染性不会显着改变。这表明末端蛋白可以通过细胞外切核酸酶保护5'终止的单链fran消化。DNA-蛋白质复型从宿主范围突变体制备,其左4%的突变映射与外切核酸外切酶III消化,与野生型限制性片段杂交,将左8%的GENANE片段与HELA细胞旋转。具有野生型表型的病毒以高频回收。
+HUHZHSUHVHQWWZRVLJQ 4QGLQJVWKDWFRQWULEXWH XQGHUVWDQGLQJRI 白色念珠菌DOLIH-WKUHDWHQLQJ KXPDQIXQJDOSDWKRJHQ)LU HVWDEOLVKWKDWWKH 白色念珠菌UHIHUHQFHVWUDLQLVGHIHF 51$LQWHUIHUHQFHDIXQGDP UHJXODWRU\SDWKZD\6HFRQ GLVFRYHUWKDWLQFRQWUD UHIHUHQFHVWUDLQWKHYD PDMRULW\RIC。白色念珠菌LVRODWH FRQWDLQDQDFWLYH51$ LQWHUIHUHQFH51$ LSDWKZ VLOHQFHVJHQHH[SUHVVLRQ &RQVLGHULQJWKDW51$ LSOD FHQWUDOUROHVLQUHYHUVL JRYHUQLQJJHQHH[SUHVVLRQ JHQRPHVWDELOLW\GUXJUH DQGFRXQWHULQJYLUDOLQIH RXU4QGLQJRHUVYDOXDEOH LQVLJKWVLQWRWKHELRORJ GDQJHURXVIXQJDOSDWKRJHQ
是最需要的,无论是在白天还是晚上●由于锂电池变得更容易生产,其成本大幅下降●快速创新意味着新的电池技术,如LFP(消除了对镍和钴的需求)和钠离子(消除了对锂的需求)正在迅速进入市场,带来成本和性能的巨大改进●模块化技术,可以在世界任何地方部署;在电网规模(高达几吉瓦)以及较小规模(几千瓦)的住宅或商业建筑中部署,以增强现场生产的能源消耗
figuren°3:正常细胞对癌细胞对活性氧的敏感性的模型………………………………………………………………………
