该技术是一种紧凑型自动诊断工具,专为进行血液学测试而设计,适用于中小型实验室。该设备使用先进的流式细胞术技术进行不同类型的血液学测试,如血细胞计数、白细胞分化、血小板计数。该设备已获得 CE 标志。
摘要 — 本文介绍了一种基于电阻抗传感的低成本便携式微流式细胞仪的开发和测试,用于在受控氧微环境下进行单细胞分析。该细胞仪系统基于 AD5933 阻抗分析仪芯片、微流控芯片和由定制 Android 应用程序操作的 Arduino 微控制器。对受镰状细胞病影响的人类红细胞 (RBC) 进行了代表性案例研究,以证明该细胞仪系统的能力。悬浮生物细胞的等效电路模型用于解释单个流动 RBC 的电阻抗。在正常血液中,细胞质电阻和膜电容不会随着氧张力的变化而显着变化。相反,受镰状细胞病影响的 RBC 显示,在缺氧治疗后,细胞质电阻从 11.6 M Ω 降低到 23.4 M Ω,膜电容从 1.1 pF 降低到 0.8 pF。单细胞亚细胞电成分的变化与缺氧治疗引起的细胞镰状过程之间存在很强的相关性。本文报告的代表性结果表明,单细胞电阻抗可用作量化细胞对氧浓度变化反应的敏感生物物理标记。开发的流式细胞术系统和方法还可以扩展到分析其他细胞类型对缺氧的反应。索引术语——电阻抗、微流式细胞术、单细胞分析、缺氧、镰状细胞病I. 引言缺氧(体内缺氧)会导致细胞发生各种生理变化。在全身和单细胞水平上,人们对高海拔或深海潜水引起的缺氧生理反应或病理反应进行了广泛的研究 [1, 2]。单细胞悬浮液的分析已经成为重要的医学兴趣。细胞对缺氧反应的研究为肿瘤病理学 [3]、癌症治疗 [4]、心血管病理生理学 [5]、代谢 [6, 7] 和哺乳动物细胞的稳态机制 [8] 提供了见解。测量细胞缺氧和缺氧环境反应的黄金标准是通过流式细胞术分析单个细胞,测量蛋白质水平,例如缺氧诱导因子 1-alpha (HIF1 α ) 和 BCL2/腺病毒 E1B 19 kDa 蛋白相互作用蛋白 3 (BNIP3) [9, 10]。该方法通过基于抗体的免疫染色针对目标蛋白质提供高特异性,但也需要固定和透化所分析的细胞。最近,基于电阻抗的流式细胞术已被证明是分析单个细胞的传统光学方法的替代方法。它本质上是定量的、非侵入性的和无标记的,
摘要:高通量筛选是药物研发、癌症治疗和疾病诊断中不可或缺的技术,可以大大减少时间成本、试剂消耗和人工费用。本文详细介绍了四种灵敏度高、可及性的高通量筛选方法。荧光、DNA、重金属和非金属同位素条形码通常标记抗体、蛋白质和糖类以识别细胞,分别通过流式细胞术、第二代 DNA 测序、质谱流式细胞术和第二离子质谱法进行检测。将二进制信息编码在条形码中、用条形码标记单个细胞、一起进行细胞表征以及通过条形码识别属于单个细胞的结果是高通量筛选的主要步骤。详细介绍了四种数字条形码在体外和体内高通量筛选中的应用,并总结了它们的优缺点。高通量筛选为多学科研究提供了强大的平台,极大地促进了药物研发、疾病诊断、癌症治疗等的进程。关键词:高通量筛选,荧光条形码,DNA条形码,重金属条形码,非金属同位素条形码■引言
图1:a)在通过流式细胞仪测量的每个天中,不同供体的NK细胞(CD56 +,CD3-)的折叠膨胀。b)在通过流式细胞仪测量的每个天,不同供体的T细胞(CD56 +,CD3 +)的折叠膨胀。c)在通过流式细胞仪测量的每个天,不同供体的T细胞(CD56-,CD3 +)的折叠膨胀。d)在第0-3、3-8和8-15天之间通过流式细胞仪测量的明显生长速率。e)在所有分析的天数中的所有细胞的UMAP投影,每个捐赠者颜色的供体颜色,其中箭头指示的群集C3是唯一基于供体的细胞聚类的区域。f)基于流式细胞仪和转录组注释基于NK细胞的细胞类型测定之间的比较。g)从分析当天着色的每个供体的所有细胞的UMAP投影。h)基于流式细胞仪和转录组注释的T细胞测定细胞类型测定之间的比较。i)在所有分析的天数中所有细胞的UMAP投影,从预测细胞类型的每个供体彩色。
• 阵发性睡眠性血红蛋白尿 (PNH) 的诊断是通过流式细胞术确定的,该技术可在适当的临床环境中显示缺乏糖基磷脂酰肌醇 (GPI) 连接蛋白 (例如 CD55、CD59) 的粒细胞和红细胞 (RBC) 群,例如直接抗球蛋白检测 (DAT) 阴性的溶血性贫血、血栓形成、不明原因的腹痛、再生障碍性贫血 (AA) 或骨髓增生异常综合征 (MDS)。
分离 CD8 + T 细胞实验:通过负选择从健康人血中分离 CD8 + T 细胞,并按照指示用 +/- Cbl 抑制剂进行刺激,然后通过流式细胞术和细胞因子珠阵列进行分析。 OT-I 脾细胞实验:收获 OT-I 小鼠的脾脏并处理以产生单细胞悬浮液。用不同亲和力的卵清蛋白肽 +/- Cbl 抑制剂刺激脾细胞,并通过细胞因子珠阵列评估细胞因子的产生。 体内肿瘤模型:将 CT26 或 MC38 细胞植入皮下,当肿瘤达到 ~75mm 3 时,给小鼠按指示服用 αPD-1(10 mg/kg,IP,Q5D)和/或 Cbl 抑制剂 A0322275(30 mg/kg,PO,QD)。观察肿瘤体积,收集肿瘤,通过流式细胞术进行肿瘤浸润淋巴细胞分析。 癌细胞实验:根据供应商的建议培养癌细胞。根据指示,在不同时间点将细胞接种 +/- Cbl 抑制剂,并添加细胞滴度发光试剂以评估细胞活力。 Cbl 抑制剂化合物信息:Cbl-b/c-Cbl 抑制剂,A0322275,来自专利申请 WO2020264398。
摘要 癌症研究的一个目标是揭示与持续临床结果相关的细胞亚群,以产生新的治疗和生物标志物假设。我们引入了一种机器学习算法,即风险评估群体识别 (RAPID),该算法是无人监督和自动化的,可识别表型不同的细胞群,并确定这些群体是否分层患者生存。利用来自 28 个胶质母细胞瘤的 200 万个细胞的试点质谱流式细胞术数据集,RAPID 识别出其丰度独立且连续地分层患者生存的肿瘤细胞。工作流程中的统计验证包括重复运行随机步骤和细胞子采样。生物学验证使用正交平台、免疫组织化学和 73 名胶质母细胞瘤患者的更大队列来确认试点队列的发现。RAPID 还使用已发表的血癌数据进行了验证,以找到已知的风险分层细胞和特征。因此,RAPID 提供了一种自动化、无人监督的方法,可使用来自患者样本的流式细胞术数据来查找具有统计学和生物学意义的细胞。
招募到 RALL-2016m 的患者(n=44)的中位年龄为 30 岁(18-53 岁),女性/男性比例为 20/24。在方案中,双表型 AL 的诊断率为 – 5%(n=2),T-ALL/淋巴瘤的诊断率为 – 36%(n=16),BCP-ALL 的诊断率为 – 59%(n=26)。通过流式细胞术对患者进行细胞遗传学研究和微小残留病 (MRD) 的集中评估