最近的大流行素(例如Covid-19)强调了快速开发诊断方法检测不断发展的病原体的重要性。CRISPR-CAS技术最近已用于开发诊断测定,以针对DNA或RNA的序列特异性识别。这些测定法对黄金标准QPCR具有相似的敏感性,但可以将其部署为易于使用和廉价的测试条。然而,发现可以设计底漆的基因组的诊断区域需要广泛的生物信息学分析。我们开发了Python软件包KRISP,以使用未对准的基因组序列或变体调用格式(VCF)文件作为输入来帮助彼此区分样本组的引物和诊断序列的分解。KRISP已通过使用有效的算法在几乎线性时间内运行,使用最小RAM并在可用时利用并行处理来处理大型数据集。在实验室证明了KRISP结果的有效性,通过成功设计CRISPR诊断测定法,以区分突然的橡木死亡病原体Phytophthora ramorum和密切相关的植物菌种类。KRISP根据宽松许可发布开源,并具有快速设计CRISPR-CAS诊断测定所需的所有文档。
降低这些高成本影响的重要方法是使用技术来自动化某些过程并带来双重好处,也就是说,提高了良好的患者护理速度以及对专业人士的良好生活质量。免疫各种负面的人工智能(I.A.)它可以以更快,更有效的速度预测和支持诊断。例如,在美国欧洲癌症杂志上发表的一项研究中,它显示了I.A.的模型。使用深度学习算法,能够以大于11的病理学家诊断癌症。因此,我们看到技术科学是一种不断增长且没有回归道路,这已经为私人和公共卫生系统带来了真正的解决方案。但是,特别是在心理健康治疗方面,这些程序仍在爬行,因为到目前为止,大多数护理仅与主观经验的标准有关,当我们谈论公共保健自然更加复杂时,这会变得更糟。
细胞活力测定试剂盒,绿色/红色荧光提供了一种方便而健壮的方法,可以通过使用两种荧光染料,钙调钙钙钙钙蛋白盐AM和碘化丙啶,从而确定细胞活力,从而可以同时检测和区分可行的和不可行的细胞。作为荧光染料,钙软糖AM最初是非荧光的。被动地进入细胞后,仅存在于活细胞中的细胞内酯酶,将小钙蛋白AM水解为钙调钙蛋白(Bratosin等人)。绿色荧光的强度与酯酶活性量成正比,因此可以与活细胞的数量相关。碘化丙啶是第二种氟化染料;但是,与钙软糖不同,它只能越过死亡细胞的受损膜。进入死细胞后,碘化丙啶在与DNA结合时会产生红色。该试剂盒中的染料非常适合与荧光显微镜或荧光微孔板读取器一起使用,该板板读取器能够在FITC(适用于钙调蛋白)和TRITC(用于碘化丙啶)通道中检测。该测定法可以检测和量化粘附或悬浮培养物中的细胞增殖,或将其纳入体外细胞毒性测定法。
摘要:我们提出了一种受自然复杂机制启发的新型比色方法,能够选择性地确定具有高灵敏度的5-羟色胺。此方法利用了链接到金纳米颗粒(SA-Aunps)的唾液酸(SA)分子的固有结合亲和力。在5-羟色胺结合,sa-aunps骨料和Sa-unps吸光度的特征性红移后,也会发生剧烈的色彩变化(红色至蓝色),即使没有仪器也很容易观察到。提出的方法有效地消除了潜在干扰物种(例如多巴胺,肾上腺素,L-酪氨酸,葡萄糖胺,半乳糖,甘露糖和草酸)的干预措施。缺乏与5-羟色胺相关的与结构相关的前体L- tryptophan的变化,进一步证实了这种方法检测方法的高选择性。比色法具有宽的线性动态范围(0.05 - 1.0μm),检测的低极限(0.02μm)和快速响应时间(5分钟)。该方法的检测极限低于到目前为止报道的其他比色性羟色胺传感器。通过在处理后血浆中采用5-羟色胺回收测定法评估了所提出的方法在生物样品分析中的使用。回收率为90.5%至104.2%,显示出有希望的临床应用潜力。
Ferula Tadshikorum pimenov是一种多年生,单核,强烈而令人不愉快的味道芹菜家族的草本植物(Umbelliferae) - apiaceae(Umbelliferae),在23-27(30-27年)进行了大量的生命周期。它在共和国南部地区的山区中部生长 - 喀什卡达里亚和Surkhandarya地区[1-3]。药用原材料都在地下(在根的空气乳汁中发生)和植物的地上部分。树脂(9.35-65.15%),口香糖(12-48%)和精油(5.8-20%)代表了根的乳状汁的化学成分。阿雷齐诺醇,阿萨雷酚及其系素衍生物:Farnesiferol C和Umbelliferon从树脂中分离出来[4-5]。
摘要:在过去的几十年中,在人类生物学样本中的药物分析方面已经取得了相当大的科学进步。但是,患者的药物血浆水平不正确仍然是一个重要问题。本综述论文试图研究基于固体吸附剂(包括固体相萃取(SPE)和固相微剥夺(SPME),在过去十年中的常见样品制备技术(SPT)中取得的进步,尤其是在分子刺激的刺激(包括MIPS)(包括MIPS)(MIPS)(MIPS),包括固体相(SPME),包括固体相。吸附剂。这类材料被称为“智能吸附剂”,对各种刺激(例如磁场,pH,温度和光线)表现出量身定制的反应。提供了有关这些高级SPT如何与液相色谱质量质谱法(LC-MS)分析技术结合使用的现代药物分析的局势的详细信息,该技术包括高性能液相色谱(HPLC)和超高性能液相色谱(UHPLC)以及任何MS,例如MS,MS MS,MS MS,包括高性能液相色谱(HPLC)和MS MS MS,高分辨率(HRMS)质谱。还提供了一些笔记,以效果较低的技术(例如带有紫外线(HPLC-UV))和二极管阵列检测(HPLC-DAD)检测的高性能液相色谱。最后,我们对拟议方法和该研究领域的未来前景的困难和收益进行了一般综述。
umuagwo,P.M。B.1038,,尼日利亚尼日利亚IMO州OWERRI,尼日利亚大学物理与天文学系,尼日利亚大学,尼日利亚大学,410001,尼日利亚埃努古州,c c c Q Quaid-i-Azam大学,伊斯兰堡Quaid-i-Azam大学中心,伊斯兰堡44000,44000 University, Xi'an, 710072, China e UKM-NCP Joint Research and Development Center, Universiti Kebangsaan Malaysia, Lingkungan Ilmu, 43600 Bangi, Selangor, Malaysia f Institute of Microengineering and Nanoelectronics (IMEN)-Center of Excellence in Physics (CoE Physics), Quaid-i-Azam University, Islamabad, 44000,巴基斯坦G纳米科学非洲网络(Nanoafnet)Ithemba Labs-intional Research Foundation,萨默塞特西部7129,旧福雷路1号 Box 722,Somerset West,Somerset West,Western Cape Province,南非H UNESCO-UNISA非洲纳米科学/纳米技术主席,南非大学(UNISA)研究生学院(UNISA),Muckleneuk Ridge,P.O。 Box 392,Pretoria,Pretoria,南非I I IMO理工大学的物理系,尼日利亚IMO州OWERRI,IMO州J.,尼日利亚尼日利亚IMO州OWERRI,尼日利亚大学物理与天文学系,尼日利亚大学,尼日利亚大学,410001,尼日利亚埃努古州,c c c Q Quaid-i-Azam大学,伊斯兰堡Quaid-i-Azam大学中心,伊斯兰堡44000,44000 University, Xi'an, 710072, China e UKM-NCP Joint Research and Development Center, Universiti Kebangsaan Malaysia, Lingkungan Ilmu, 43600 Bangi, Selangor, Malaysia f Institute of Microengineering and Nanoelectronics (IMEN)-Center of Excellence in Physics (CoE Physics), Quaid-i-Azam University, Islamabad, 44000,巴基斯坦G纳米科学非洲网络(Nanoafnet)Ithemba Labs-intional Research Foundation,萨默塞特西部7129,旧福雷路1号Box 722,Somerset West,Somerset West,Western Cape Province,南非H UNESCO-UNISA非洲纳米科学/纳米技术主席,南非大学(UNISA)研究生学院(UNISA),Muckleneuk Ridge,P.O。 Box 392,Pretoria,Pretoria,南非I I IMO理工大学的物理系,尼日利亚IMO州OWERRI,IMO州J.Box 722,Somerset West,Somerset West,Western Cape Province,南非H UNESCO-UNISA非洲纳米科学/纳米技术主席,南非大学(UNISA)研究生学院(UNISA),Muckleneuk Ridge,P.O。Box 392,Pretoria,Pretoria,南非I I IMO理工大学的物理系,尼日利亚IMO州OWERRI,IMO州J.Box 392,Pretoria,Pretoria,南非I I IMO理工大学的物理系,尼日利亚IMO州OWERRI,IMO州J.
Bioassay • Uses a monocyte stable cell line • Measures the ability of antibody in activating the cells upon binding to target Y • Activation is measured by secretion of chemokine Z, positively correlates to the antibody concentration • Chemokine Z indicates monocyte activation to macrophage, but does not distinguish M2 vs M1 → the
转化的生长因子-BETA(TGFβ)信号通路在建立免疫抑制性肿瘤微环境中起着至关重要的作用,使抗TGFβ剂成为癌症免疫疗法的重要领域。然而,针对上游细胞因子和受体的当前抗TGFβ药物的临床翻译仍然具有挑战性。因此,小分子抑制剂的发展特异性靶向TGFβ途径的下游主调节器SMAD4,将采取一种替代方法,具有明显的抗TGFβ信号传导的替代方法。在这项研究中,我们介绍了在超高通量筛选(UHTS)1536孔板格式中基于细胞裂解物的多路复用时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)测定。该测定法可以同时监测SMAD4和SMAD3之间的蛋白质 - 蛋白质相互作用,以及SMADS及其共识DNA结合基序之间的蛋白质-DNA相互作用。多路复用的TR-FRET分析表现出高灵敏度,从而使单氨基酸分辨率下的Smad4-Smad3-DNA复合物进行了动态分析。此外,多路复用的UHTS分析证明了筛选小分子抑制剂的鲁棒性。通过对FDA批准的生物活性化合物库进行试验筛选,我们将gambogic Acid和Gambogenic Acodic鉴定为潜在的HIT化合物。这些概念验证的发现强调了我们优化的多重TR-FRET平台的大规模筛选的实用性,以发现针对SMAD4-SMAD3 – DNA复合物作为新型抗TGFβ信号剂的小分子抑制剂。
摘要:苹果的苦腐是由不同的Colletotrichum物种引起的一种经济重要的全球疾病,具体取决于许多因素,例如气候,地理,其他宿主和作物管理实践。培养,形态和基于单位液测序的方法用于识别Colletotrichum物种的有效性受到严重限制,而可用于描述物种的多核序列分型方法是昂贵,时间密集的,并且需要高专业知识。我们开发了以下九种coltotrichum物种的物种特异性水解探针实时PCR分析,在美国中大西洋中引起苦腐腐烂。来自阿司霉菌物种复合物的若虫。在搜索14个基因区域后,我们在其中5个目标物种中设计了底漆和探针。四个引物 - 探针套装对被复式。灵敏度测试显示出可检测到0.5 pg DNA。这些实时PCR分析将对这些关键的Colletotrichum物种提供快速而可靠的识别,对于旨在阐明其生物学,流行病学和管理苹果的研究至关重要,因为在美国生产和消耗的树木水果。