Fanny Leenhardt,Matthieu Gracia,Catherine Perrin,Claudia Muracciole-Bich,BénédicteMarion等。液相色谱 - 潮流质谱测定法,用于在药物相互作用的临床背景下人类血浆中CDK4/6抑制剂定量。药物和生物医学分析杂志,2020,188,pp.113438。10.1016/j.jpba.2020.113438。HAL-03003807V2
o布拉德福德测定法:库马西亮蓝色G-250染料试剂。o用于BCA测定:BCA试剂A和B,CUSO₄解决方案。o用于洛瑞测定法:碱性铜试剂,叶核酸试剂。o用于紫外线吸收:磷酸盐缓冲盐水(PBS)或其他合适的缓冲液。4。微板读取器或分光光度计5。移液器和移液器提示6。测试管或微板井7。卧式(用于UV吸收方法)8。Vortex Mixer 9。孵化器(对于某些测定)10。蒸馏水
摘要:许多人遭受脱发和皮肤色素异常的困扰,突出了对支持药物发现研究的简单测定的需求。当前的测定法具有各种局限性,例如仅体外,不够敏感或无法实现。我们利用了双侧对称性和大尺寸的小鼠晶须卵泡来开发一种称为“ Whisker卵泡微注射测定”的小说在体内测定中。在此测定中,我们使用与晶须大小相似的微针直接拔出小鼠晶须,然后将分子直接注入晶须卵泡的一侧,然后我们在另一侧注入溶剂作为对照。一旦晶须再次长大,我们就定量测量了它们的长度和颜色强度,以评估分子对头发生长和着色的影响。使用几种化学物质和蛋白质测试该测定法。化学物质米诺地尔和鲁ac替尼以及蛋白质RSPO1促进了头发生长。可以以低至0.001%的浓度检测到临床药物米诺地尔的作用。化学脱氧核糖素抑制了黑色素的产生。蛋白质NBL1被鉴定为一种新型的毛发抑制剂。总而言之,我们成功地建立了一种敏感和定量的体内测定法,以评估化学物质和蛋白质对头发生长和着色的影响,并通过使用该测定法确定了一种新型调节剂。在研究蛋白质功能以及开发用于治疗脱发和皮肤异常色素沉着的药物时,这种晶须卵泡显微注射测定将是有用的。
• 费用项目 90280** 的账单说明 (iii) – 抗核抗体 - 免疫荧光筛查:90280 仅在 12 个月内支付一次,除非患者的病情表明出现 CTD。 • 费用项目 90281** 的账单说明 (iv) – EIA 抗核抗体:90281 仅在 12 个月内支付一次,除非患者的病情表明出现 CTD。 • 费用项目 90120 的账单说明 (i) – 可提取核抗原:可提取核抗原 (90120) 仅在免疫荧光 (90280) 或酶联免疫吸附 (90281) 抗核抗体筛查呈阳性后才需支付,已知或出现 CTD 的产前患者除外。 • 费用项目 90121** 的账单说明 (i) - 抗核抗体,通过多重免疫测定法进行特异性检测,修改如下:ANA,通过多重免疫测定法进行特异性检测 (90121) 仅在通过免疫荧光 (90280) 或酶免疫测定法 (90281) 进行阳性抗核抗体筛查后才需支付,已知或新出现 CTD 的产前患者除外。
sars-cov-2一直在世界各地传播,经常发展为具有更大人类感染能力的新变体。SARS-COV-2及其突变体使用血管紧张素转化酶2(ACE2)作为细胞进入受体,该酶触发了几种依靠ACE2重组蛋白作为诱饵受体的使用的covid-19的治疗策略。在这项工作中,我们将ACE2无声FC融合蛋白(ACE2-HFCLALA)作为针对COVID-19的候选疗法。通过ELISA和流式细胞仪抑制测定法测量,该融合蛋白能够阻止SARS-COV-2 RBD与ACE2受体的结合。此外,我们使用了经典的中和测定法和后代中和测定法,以表明ACE2-HFCLALA融合蛋白能够中和正宗病毒。此外,我们发现与D614G菌株相比,这种融合蛋白在具有不同感兴趣的变量(Alpha,Beta,Delta和Omicron)方面更有效地预防体外感染(Alpha,Beta,Delta和Omicron)。我们的结果表明,该分子在治疗和预防性环境中使用使用ACE2作为通往人类细胞的门户的治疗和预防设置的潜力。
线粒体在细胞能量生产和代谢中起着核心作用。执行这些功能所需的大多数蛋白质是在细胞质中合成的,并进口到线粒体中。线粒体功能障碍引起的越来越多的代谢性疾病可以追溯到线粒体蛋白导入的错误。通常使用进口到纯化的线粒体中的放射性标记的前体蛋白来研究前体蛋白的进口机制。在这里,我们建立了基于荧光的进口测定法,以分析蛋白质进口到线粒体中。我们表明,荧光标记的前体可以使进口分析具有与使用射线活性前体的敏感性相似的敏感性,但它们提供了用picomole分辨率量化导入的优势。我们将导入测定法调整为96台板格式,以允许以筛选兼容格式进行快速分析。此外,我们表明荧光标记的前体可用于监测纯化的线粒体中F 1 F 0 ATP合酶的组装。因此,我们提供了一种基于敏感的荧光进口测定法,可以实现定量和快速的进口分析。
线粒体在细胞能量生产和代谢中起着核心作用。执行这些功能所需的大多数蛋白质是在细胞质中合成的,并进口到线粒体中。线粒体功能障碍引起的越来越多的代谢性疾病可以追溯到线粒体蛋白导入的错误。通常使用进口到纯化的线粒体中的放射性标记的前体蛋白来研究前体蛋白的进口机制。在这里,我们建立了基于荧光的进口测定法,以分析蛋白质进口到线粒体中。我们表明,荧光标记的前体可以使进口分析具有与使用射线活性前体的敏感性相似的敏感性,但它们提供了用picomole分辨率量化导入的优势。我们将导入测定法调整为96台板格式,以允许以筛选兼容格式进行快速分析。此外,我们表明荧光标记的前体可用于监测纯化的线粒体中F 1 F 0 ATP合酶的组装。因此,我们提供了一种基于敏感的荧光进口测定法,可以实现定量和快速的进口分析。