关于漆酶介导的新兴污染物降解的综述揭示了一种有希望的可持续解决方案,以越来越多地关注由新颖的,不受调节的化合物引起的环境污染。新兴污染物,包括药品,个人护理产品和工业化学品,由于其持久性和生物弥补的潜力,对生态系统和人类健康构成了重要风险。传统的水处理方法o o n en o n and无法有效去除这些污染物。漆酶,一种天然存在的酶,是一种环保且有效的方法来降解这些污染物。通过利用漆酶的催化能力,这项研究表明了一种可行的途径来减轻新兴污染物的环境影响,促进清洁水体和更健康的生态系统。漆箱介导的过程不仅与绿色化学原则保持一致,而且还支持可持续水处理技术的发展,为环境保护和公共卫生安全的更广泛的影响做出了贡献。
摘要双酚在食品和环境系统中广泛保留。少量的双酚A可以直接影响人类健康。然而,双足A的最近比色检测方法仍然符合诸如复杂操作和高盐溶液的影响等挑战,从而导致不准确的检测结果。在此,Ag 3 PO 4纳米颗粒是通过简单的共沉淀方法制备的,并且具有出色的漆酶模拟催化活性。在Ag 3 PO 4纳米颗粒的催化作用下,双酚A失去了电子,并与4-氨基 - 抗吡啶进一步反应形成红色物质。因此,首先基于模仿AG 3 PO 4纳米颗粒的漆酶活性来建立一种新型的双酚的快速比色方法。比色法的检测限制为低至0.222 mg·L -1,该限制低于中国国家卫生和计划生育委员会和美国食品和药物管理局。此外,比色方法对其他竞争目标表现出极好的选择性。进一步的研究证实了比色方法在实际食品和水样品中检测双酚A的准确性,可靠性和速度,这表明这种比色方法在实际应用中可能至关重要。
储存和稳定性: 尿嘧啶 DNA 糖基酶采用干冰或蓝冰运输。到货后储存于 -20°C 下,以获得最佳稳定性。 有效期: 在外包装盒标签上的有效期内,在推荐条件下储存并正确处理时,试剂盒可保持完整活性。 单位定义: 一个单位是指每分钟催化含尿嘧啶双链 DNA 释放 60 pmol 尿嘧啶的酶量。通过 37°C 下 30 分钟内在含有 0.2 mg DNA ( 10 4 -10 5 cpm/mg )的 50 mL 反应预混液中释放 [ 3 H]- 脲嘧啶来测量活性。 安全预防措施: 处理试剂前请阅读并理解 SDS (安全数据表)。首次发货时提供 SDS 的纸质版文件,此后可应要求提 供。 质量控制: Meridian 遵守 ISO 13485 质量管理体系运行。尿嘧啶 DNA 糖基酶在放行前经过广泛的活性测试。
Anzalone, AV、Koblan, LW 和 Liu, DR (2020)。使用 CRISPR–Cas 核酸酶、碱基编辑器、转座酶和主要编辑器进行基因组编辑。《自然生物技术》,1-21。
摘要:腐生担子菌分泌的漆酶是一种多功能生物催化剂,仅需氧气即可氧化多种芳香族化合物。酿酒酵母是真菌漆酶工程的首选宿主。为了帮助酵母分泌活性酶,天然信号肽通常被酿酒酵母α交配因子(MF α 1)的前原前导序列取代。然而,在大多数情况下,只能获得基础酶水平。在酿酒酵母中与α因子前原前导序列融合的漆酶的定向进化过程中,我们证明了信号肽中积累的突变显著提高了酶的分泌。在这里,我们描述了为增强在酿酒酵母培养物液体提取物中检测到的漆酶活性而实施的不同蛋白质工程方法。我们通过使用实验室中连续进行的漆酶进化活动获得的适应性最强的突变 α 因子前导序列,证明了天然和工程漆酶的分泌得到改善。我们还特别关注了蛋白质 N-糖基化在漆酶生产和特性中的作用,以及通过共识设计引入保守氨基酸,从而能够表达酵母原本不会产生的某些漆酶。最后,我们修改了在之前的定向进化活动中积累的漆酶编码序列 (CDS) 突变的贡献,这些突变促进了酶的生产。
[摘要]肿瘤细胞通过代谢重编程适应了快速生长和分裂的需求,与正常细胞相比,具有不同的代谢特征,包括葡萄糖和氨基酸的失调,中央碳
氧化芳香族底物的酶已在一系列基于细胞的技术中显示出效用,包括活细胞邻近标记 (PL) 和电子显微镜 (EM),但也存在一些缺点,例如需要有毒的 H 2 O 2 。在这里,我们探索了漆酶作为哺乳动物细胞中 PL 和 EM 的一种新型酶类。LaccID 是通过 11 轮定向进化从祖先真菌漆酶产生的,它使用 O 2 而不是有毒的 H 2 O 2 催化多种芳香族底物的单电子氧化,并且对活细胞和固定细胞的表面质膜均表现出活性选择性。我们表明,LaccID 可与基于质谱的蛋白质组学一起使用,以绘制通过抗原特异性 T 细胞受体与肿瘤细胞结合的 T 细胞不断变化的表面组成。此外,我们使用 LaccID 作为可遗传编码的标签,用于在哺乳动物细胞培养物和苍蝇大脑中通过 EM 可视化细胞表面特征。我们的研究为未来基于细胞的 LaccID 应用铺平了道路。
【产品简介】 本产品是从高度耐热菌 Thermus aquaticus 中克隆其 DNA 聚合酶基因,原核表达后经柱层析纯化获得的超纯、高效、耐热 DNA 聚合 酶, SDS-PAGE 显示为一条 94kD 的蛋白条带。该酶除具有 5 ' -3 ' DNA 聚合活性外,还具有少量的 5 ' -3 ' DNA 外切活性,但不 具有 3 ' -5 ' DNA 外切活性(校读活性),适用于常规 PCR 扩增。 M5 HiPer plus Taq DNA Polymerase 扩增得到的 PCR 产物含有 3'-A 碱基,可直接用于 TA 克隆 ( 聚合美 TOPO-TA 克隆载体货号: MF019 或 MF020) 。
离子液体 (IL) 是室温下熔融的有机盐,可用于多种用途。许多 IL,例如 1-乙基-3-甲基咪唑乙酸盐 ([C 2 C 1 Im][OAc]),已被证明可以在预处理过程中从生物质中去除大量复杂的生物聚合物木质素。通过生物途径(例如酶)来增值木质素很有前景,但受到许多用于预处理的 IL 生物相容性低的限制。热稳定酶的发现和酶工程技术的应用已经产生了能够承受高浓度 IL 的生物催化剂。将木质素从废品转化为增值化学品对于未来纤维素生物精炼厂的成功至关重要。为此,我们在水性 [C 2 C 1 Im][OAc] 中筛选了超嗜热菌(嗜热菌)的木质素分解酶漆酶的活性。尽管该漆酶具有嗜热性(T opt > 90 ◦ C),但仅在 2% (w/v) [C 2 C 1 Im][OAc] 中观察到明显的活性损失(> 50%)。动力学研究表明,IL 可以与游离酶和酶-底物复合物结合。对接模拟表明阳离子倾向于与靠近活性位点的区域结合。然后,我们采用合理的设计策略来提高漆酶在 [C 2 C 1 Im][OAc] 中的活性。共进行了 8 次单氨基酸突变;然而,与野生型相比,突变体在 [C 2 C 1 Im][OAc] 中的活性没有显著提高。该研究结果揭示了酶-IL相互作用的复杂性质以及设计生物木质素增值策略时面临的挑战。