SPOT-F(SPOT-on-the-FLY)——加速阵列生产的点样技术简介:目前,sciFLEXARRAYER 的点样分为两个不同的步骤:移动到某个位置、停止并分配、移动到新位置、停止并再次分配。这适用于广泛的应用,但随着阵列生产中新的吞吐量要求(例如提高生产速度),开发了一种新的点样技术。该技术名为 SPOT-F(Spot-on-the-fly),可在 SCIENION 的生产系统 sciFLEXARRAYER S100 和 sciFLEXARRAYER SX 上启用。设置/打印:SX 和 S100 系统中的驱动机制允许将脉冲单元与电机编码器直接连接。这样可以实现触发脉冲和液滴喷射,而无需停止。点样恰好发生在喷嘴移动到目标上方的那一刻 - 因此得名 SPOT-F(Spot-on-the-fly)。
摘要:蛋白质微阵列已成为药物和生物标志物开发以及诊断等各个领域的一种有吸引力的工具。因此,以微阵列形式进行多重结合亲和力测量变得至关重要。基于微阵列的蛋白质测定的制备依赖于探针溶液的精确分配,以有效固定在活性表面上。微阵列制造所需的设备成本过高,并且需要经过培训的人员来操作高复杂性的机器人点样器,这对研究人员来说是重大的不利因素,尤其是对于资源有限的小型实验室而言。在这里,我们提出了一种低成本、无需仪器的分配技术,通过该技术,熟悉微量移液的用户可以手动创建多重蛋白质测定,与机器人点样测定相比,该测定的捕获效率和噪音水平有所提高。在本研究中,我们使用干涉反射成像传感器平台,通过分析与抗 α -乳清蛋白抗体相互作用获得的结合动力学,比较了手动和机器人分配 α -乳清蛋白探针点的效率。我们表明,通过微量移液器手动点样制备的蛋白质阵列达到并超过了通过最先进的机器人点样器制备的蛋白质阵列的性能。与通过平均 75 个机器人点(对应于相同有效传感器表面积)获得的数据相比,这些无需仪器的蛋白质测定具有更高的结合信号(改善了约 4 倍)和结合曲线中的信噪比 (SNR) 提高了约 3 倍。我们展示了以 24 多路复用芯片格式确定抗原-抗体结合系数的潜力,测量误差小于 5%。
摘要:蛋白质微阵列已成为药物和生物标志物开发以及诊断等各个领域的一种有吸引力的工具。因此,微阵列格式的多重结合亲和力测量变得至关重要。基于微阵列的蛋白质测定的制备依赖于探针溶液的精确分配,以实现在活性表面上的有效固定。设备成本过高,需要经过培训的人员来操作高复杂性的机器人点样器进行微阵列制造,这对研究人员来说是重大的障碍,尤其是对于资源有限的小型实验室。在这里,我们提出了一种低成本、无需仪器的分配技术,通过该技术,熟悉微量移液的用户可以通过手动创建多重蛋白质测定,与机器人点样测定相比,该测定显示出更好的捕获效率和噪音水平。在本研究中,我们使用干涉反射成像传感器平台,通过分析与抗 α-乳清蛋白抗体相互作用获得的结合动力学,比较了手动和机器人分配 α-乳清蛋白探针点的效率。我们表明,通过微量移液器手动点样制备的蛋白质阵列性能达到甚至超过了最先进的机器人点样器制备的蛋白质阵列的性能。与通过平均 75 个机器人点(对应于相同有效传感器表面积)获得的数据相比,这些无需仪器的蛋白质测定具有更高的结合信号(约 4 倍改善)和结合曲线中约 3 倍更好的信噪比 (SNR)。我们展示了在 24 复用芯片格式中确定抗原抗体结合系数的潜力,测量误差小于 5%。
应变促进炔烃-叠氮化物环加成 (SPAAC) 已成为生物正交结合和表面固定中不可或缺的工具。虽然许多研究都集中于增强环辛炔的反应性,但是仍然缺少一种无需任何复杂设施即可评估环辛炔-叠氮化物固定化结合效率的简便方法。在本研究中,与荧光团或生物素部分连接的二苯并环辛炔/双环壬炔 (DBCO/BCN) 的不同衍生物被图案化在超低污染聚合物刷上,这可以在不进行任何先前的封闭步骤的情况下避免非特异性蛋白质污染。聚合物刷由防污底部嵌段和叠氮化物封端的顶部嵌段组成。使用普通荧光显微镜对通过微通道悬臂点样 ( μ CS) 点样的有序阵列进行结合效率的评估。两种环辛炔均通过 μ CS 与含叠氮化物的二嵌段聚合物刷表现出可靠的结合性能,但根据蛋白质结合试验,DBCO 显示出更高的分子固定表面密度。这项工作为选择合适的环辛炔与叠氮化物偶联提供了参考,并可用于设计用于分析物检测、细胞捕获和其他生物应用的生物传感器或生物平台。
使用电气传输和射频磁敏感性的测量结果,研究了Laniga 2的Single晶体的超导晶体的超导相。发现伦敦穿透深度随温度呈指数变化,表明费米表面完全间隙。推断的超流体密度接近单间隙弱耦合各向同性S-波超导体的密度。超导性对于通过电子辐照引起的非磁点样疾病非常健壮。我们的结果通过需要微调的杂质散射幅度来对先前提出的三重态配对状态施加强大的限制,并且最自然地通过具有符号的签名,弱耦合和近似动量独立的单线超导状态来解释Laniga 2中,这不会破坏时间反向对称性。我们讨论了如何将我们的发现与以前指示超导阶段的磁性特征的测量值核对。
生物芯片技术包括一系列技术,这些技术对于生物芯片的开发、生产和在不同生物医学领域的应用至关重要。制造方法起着关键作用,通过微阵列生产技术(如点样、喷墨打印和原位合成),可以实现对生物分子的并行研究。通过微尺度流体操纵实现对生物反应的精确控制,微流体的集成大大改善了生物芯片的功能。为了确保通过化学功能化、物理吸附和生物共轭策略有效且有选择地将目标分子捕获在生物芯片表面,表面化学和生物分子固定方法至关重要。生物芯片技术严重依赖纳米技术,因为量子点、纳米线和纳米颗粒等纳米材料具有更好的标记、传感和信号放大能力。处理和分析生物芯片产生的海量数据集需要整合生物信息学工具和数据分析算法。这使得发现重要的生物系统见解成为可能。
缩写:ALP,碱性磷酸酶;ASC,含 CARD 的凋亡相关斑点样蛋白;CARD,胱天蛋白酶活化和募集结构域;CAPS,冷热蛋白相关周期性综合征;CINCA,慢性婴儿神经皮肤关节综合征;DAMPs,危险相关分子模式;DLBCL,弥漫性大 B 细胞淋巴瘤;ESR,红细胞沉降率;FCAS,家族性冷自发炎综合征;GSDMD,胃蛋白酶 D;IL-1R。IL-1 受体,IL-1RA;IL-1 受体拮抗剂,MGUS;意义不明确的单克隆丙种球蛋白病,MWS;马克-韦尔斯综合征,MYD88;髓系分化原发反应基因 88,NLR;NOD 样受体,NLRC4; NLR 家族胱天蛋白酶募集结构域含 4,NLRP3;NLR 家族,含吡啶结构域 3;NOD,核苷酸结合寡聚化结构域;NOMID,新生儿发病多系统炎症疾病;PGA,医生整体评估;
摘要 本综述介绍了 DNA 微阵列技术及其应用的最新进展。介绍了多种 DNA 微阵列或 DNA 芯片设备和系统,以及它们的制造方法和用途。这包括用于高通量筛选应用的高密度微阵列和用于各种诊断应用的低密度微阵列。所综述的微阵列制造方法包括各种喷墨和微喷射沉积或点样技术和工艺、原位或芯片上光刻寡核苷酸合成工艺以及电子 DNA 探针寻址工艺。所综述的 DNA 微阵列杂交应用包括基因表达分析和点突变、单核苷酸多态性 (SNP) 和短串联重复序列 (STR) 基因分型的重要领域。除了许多分子生物学和基因组学研究用途外,本综述还涵盖了微阵列设备和系统在药物基因组学研究和药物发现、传染病和遗传病和癌症诊断以及法医和遗传鉴定方面的应用。此外,还回顾了正在开发并应用于蛋白质组学和细胞分析新领域的微阵列技术。
在炎症体启动和激活后,对骨row衍生的巨噬细胞(BMDM)进行了白细胞介素-1 B释放的抽象定量性状基因座映射(BMDM)。最强的相关基因座映射到7号染色体上的Pycard基因,该基因座的染色体基因编码为炎症体适配器蛋白凋亡相关的斑点样蛋白(ASC)(ASC)。DBA/2和AKR Pycard基因在其3'未翻译区域(UTR)中仅在单核苷酸多态性(SNP)上有所不同。DBA/2与AKR BMDM的pycard mRNA表达和ASC蛋白水平升高,并增加了炎性体斑点的形成,这与Pycard mRNA稳定性的增加有关,而转录率没有提高。crispr/cas9基因编辑在DBA/2胚胎干细胞上进行,以将pycard 3'utr SNP从dba/2更改为AKR等位基因。由于pycard mRNA稳定性降低,将细胞分化为巨噬细胞后,这种单碱基的变化显着降低了Pycard表达和炎症体活性。
抽象目标已经深入研究了自身免疫性疾病与肠道微生物组之间的关系,并且已经确定了几种与自身免疫相关的细菌分类单元。然而,关于肠道病毒在自身免疫性疾病中的作用知之甚少。在这里,我们根据476个日语的shot弹枪测序进行了整个肠道病毒蛋白分析,其中包括类风湿关节炎(RA),全身性红斑狼疮(SLE),多发性硬化症和健康控制受试者。结果我们的病毒丰度的病例对照比较表明,像健康肠道病毒蛋白的主要组成部分一样,斑点样噬菌体在患有自身免疫性疾病的患者(特别是RA和SLE患者)的肠道中大大降低。此外,podoviridae的SLE肠道肠道显着降低。为了了解这些病毒如何影响细菌组,我们进行了定量病毒 - 细菌关联分析,并定期插入了短期间隔短的短裂重复基于基于基于病毒的病毒 - 基杆菌相互作用分析。我们确定了podovirida E和粪便核之间的共生。此外,还鉴定了多个细菌靶标(例如,Ruminococcus spp)。结论我们的数据表明,肠道病毒蛋白可以直接或通过细菌影响我们的身体。我们的分析已经阐明了与自身免疫相关的肠道微生物组的先前缺失的部分,并提出了有助于自身免疫性疾病的新候选者。