分子生物学分析相较于培养方法具有多种优势,包括能够识别更广泛的目标生物、提高灵敏度和特异性。细菌 DNA 分离是分子生物学分析中的一种简单解决方案。使用高温加热的煮沸技术会破坏细胞壁通透性。加热煮沸技术可以使用具有不同传热机制的水浴和加热块来实现。结果表明,使用加热块分离的样品的浓度值在 77,6 ng/µl – 200,45 ng/µl 范围内,而使用水浴分离的样品的浓度值在 145,575 ng/µl – 288,8 ng/µl 范围内。使用水浴可获得最高的 DNA 浓度。在波长 A260/A280 下测得的纯度值在纯度范围内没有差异。关键词:DNA 分离、煮沸、水浴、加热块
摘要 大肠杆菌是印度尼西亚尿路感染 (UTI) 的主要原因,每年约有 180,000 例报告。UTI 病例越多,越需要使用准确、快速、简单且经济的 DNA 分离方法进行 PCR 诊断。然而,目前煮沸 DNA 分离法中没有从蛋白质和 RNA 污染物中纯化 DNA 的阶段。本研究旨在调查将蛋白酶 K 和 RNase 纳入煮沸 DNA 分离法对分离过程中大肠杆菌 DNA 纯度和浓度的影响。煮沸法涉及加热至 95 C – 100 C 导致细胞裂解并释放细胞成分,包括 DNA。尿液样本以不同的麦克法兰标准(0.25、0.5 和 1)人工污染大肠杆菌。然后进行煮沸 DNA 分离法,然后使用 NanoDrop 分光光度计分析纯度和浓度。本研究表明,煮沸 DNA 分离法中使用的蛋白酶 K 和 RNase 浓度与随后的 DNA 纯度和浓度增加之间存在正相关性。尽管与未添加蛋白酶 K 和 RNase 相比,DNA 纯度和浓度有所增加,但与未添加蛋白酶 K 和 RNase 相比,其统计学意义并不显著,DNA 纯度的 p 值为 0.245,DNA 浓度的 p 值为 0.353。建议进一步研究在煮沸 DNA 分离法中使用更高的蛋白酶 K 和 RNase 浓度,以提高大肠杆菌 DNA 的纯度和浓度。这种增强可以改善 PCR 扩增并有助于诊断大肠杆菌相关的尿路感染。关键词煮沸法、DNA 纯度、DNA 浓度、蛋白酶 K、RNase。
摘要:研究了四种加热强度(热弹性蛋黄,嘿;煮熟的蛋黄,sey;正常煮的蛋黄,ney;和煮沸的蛋黄,oey,oey,oey)对煮蛋黄的脂质分子的影响。结果表明,除胆汁酸,溶物磷脂酰肌醇和溶物磷脂酰胆碱外,四个加热强度对脂质和脂质类别的总丰度没有显着影响。然而,在量化的所有767个脂质中,在四个加热强度下,在蛋黄样品中筛选了190个脂质的差分丰度。沸腾和沸腾的人通过热变性改变了脂蛋白的组装结构,并影响了脂质和载脂蛋白的结合,从而增加了低到中等甘油酸的甘油三酸酯。在Hey and Sey中,磷脂降低,溶血磷脂和游离脂肪酸增加表明,在相对低强度的加热下,潜在的磷脂水解潜在水解。结果为加热对蛋黄脂质纤维的影响提供了新的见解,并将支持公众选择蛋黄的烹饪方法。