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梭状芽胞杆菌和巴斯德疫苗
梭状芽胞杆菌和巴斯德氏菌疾病都可能导致羔羊突然死亡。两者都是通过疫苗预防的，因此应被视为羊群健康计划的一部分。梭状芽胞杆菌是产生毒素的细菌；它们在土壤，水和分解动物组织中发现。不同类型的梭状芽孢杆菌导致不同的临床疾病。您可能已经听说过浆肾，羊肉痢疾，黑色疾病，bighead和破伤风，但也有许多由梭状芽胞杆菌引起的其他致命疾病。巴斯德奶酪会导致溶血性疫苗的细菌引起的肺炎突然发作。通常是致命的。它也可能导致年轻羔羊的致命败血症。
01-00765-JP 使用 EluNA™ 从孢子中提取 DNA 和...
基因分析的应用范围十分广泛，包括医学、法医学和农业。在传染病领域，可以通过特异性检测病原体的DNA或RNA来识别病原体。在法医学领域，从生物样本（血液、头发等）中提取的DNA信息被用作识别罪犯的证据。此外，在农业领域，人们进行基因分析是为了从农作物和牲畜中选出有用的个体。在进行此类基因分析时，通常需要从生物组织等样本中提取核酸（DNA和RNA）作为预处理步骤。
梭状芽胞杆菌艰难梭菌临床途径
约翰·霍普金斯（John Hopkins存在可疑的梭状芽孢杆菌（C.）艰难梭菌感染（CDI）。该临床途径不解决与CDI患者隔离和必要环境程序有关的预防感染活动。该临床途径不能解决因传染剂或其他原因引起的其他腹泻原因的评估或管理。此临床途径解决以下临床问题和问题：
针对改良的梭状芽胞杆菌肠毒素靶向过表达甲状腺和肺癌
灌注梭菌肠毒素（CPE）可用于消除过表达其细胞表面CPE受体的癌细胞 - Claudins的子集（例如CLDN3和CLDN4）。但是，CPE不能靶向仅表达CPE不敏感的Claudins（例如CLDN1和CLDN5）的肿瘤。为了克服这一限制，结构引导的修改被用来结合CPE变体，这些变体可以与CLDN1，CLDN2和/或CLDN5强烈结合，同时保持结合CLDN3和CLDN4的能力。启用（a）靶向最常见的内分泌恶性肿瘤，即CLDN1-Over-over表达甲状腺癌，以及（b）改善针对全球最常见的癌症类型，非小细胞肺癌（NSCLC）最常见的癌症类型，这是由多种Claudins（包括Claudins）高表达Clddn1和Clddn1和Claudins的高度表达。 在甲状腺癌（K1细胞）和NSCLC（PC-9细胞）模型上应用了不同的CPE变体，包括新型突变体CPE-MUT3（S231R/ S313H）。 在体外，CPE-MUT3而不是CPEWT显示出对K1细胞的CLDN1依赖性结合和细胞毒性。 对于PC-9细胞，与CPEWT相比，CPE-MUT3改善了Claudin依赖性细胞毒性靶向。 在体内，具有K1或PC-9肿瘤的异种移植模型中肿瘤内注射CPE-MUT3可诱导坏死，并降低了两种肿瘤类型的生长。 因此，CPE的定向修改可以消除CPEWT无法靶向的肿瘤实体，例如，使用新颖的CPE-MUT3，CLDN1-过表达甲状腺癌。启用（a）靶向最常见的内分泌恶性肿瘤，即CLDN1-Over-over表达甲状腺癌，以及（b）改善针对全球最常见的癌症类型，非小细胞肺癌（NSCLC）最常见的癌症类型，这是由多种Claudins（包括Claudins）高表达Clddn1和Clddn1和Claudins的高度表达。在甲状腺癌（K1细胞）和NSCLC（PC-9细胞）模型上应用了不同的CPE变体，包括新型突变体CPE-MUT3（S231R/ S313H）。在体外，CPE-MUT3而不是CPEWT显示出对K1细胞的CLDN1依赖性结合和细胞毒性。 对于PC-9细胞，与CPEWT相比，CPE-MUT3改善了Claudin依赖性细胞毒性靶向。 在体内，具有K1或PC-9肿瘤的异种移植模型中肿瘤内注射CPE-MUT3可诱导坏死，并降低了两种肿瘤类型的生长。 因此，CPE的定向修改可以消除CPEWT无法靶向的肿瘤实体，例如，使用新颖的CPE-MUT3，CLDN1-过表达甲状腺癌。在体外，CPE-MUT3而不是CPEWT显示出对K1细胞的CLDN1依赖性结合和细胞毒性。对于PC-9细胞，与CPEWT相比，CPE-MUT3改善了Claudin依赖性细胞毒性靶向。在体内，具有K1或PC-9肿瘤的异种移植模型中肿瘤内注射CPE-MUT3可诱导坏死，并降低了两种肿瘤类型的生长。因此，CPE的定向修改可以消除CPEWT无法靶向的肿瘤实体，例如，使用新颖的CPE-MUT3，CLDN1-过表达甲状腺癌。
改进的CRISPR/CAS9工具用于梭状芽胞杆菌快速代谢工程
摘要：群集定期间隔短的短膜重复序列（CRISPR）/CAS（CRISPR相关蛋白质）9工具已经彻底改变了生物学 - 已经构建了几个高效的高效工具，这些工具已导致能够快速设计模型细菌，例如，Escherichia coli。但是，CRISPR/CAS9工具的使用已落后于非模型细菌，阻碍了工程工作。在这里，我们开发了改进的CRISPR/CAS9工具，以实现与工业相关细菌丙梭菌的有效快速代谢工程。以前的努力在C. actobutylicum中实施CRISPR/CAS9系统已受到缺乏严格控制的诱导系统以及大质粒的影响，从而阻碍了较低的转化效率。我们从艰难梭菌的木糖诱导系统控制下成功地将Cas9基因从链球菌诱导的系统控制到了基因组，然后我们表明，这导致了一个紧密控制的系统。然后，我们优化了编辑盒的长度，从而产生了一个小的编辑质粒，该质粒还包含UPP基因，以便使用UPP /5-氟尿嘧啶的反式系统快速失去质粒。我们使用该系统执行LDHA和PTB-BUK操纵子的单独和顺序缺失。
肠道梭状芽胞杆菌衍生的吲哚酸通过激活妊娠X受体
骨稳态通过破骨细胞介导的骨吸收和成骨细胞介导的骨形成保持。绝经后妇女雌激素水平的急剧下降会导致破骨细胞过度活化，骨稳态受损和随后的骨质流失。肠道微生物组的变化会影响骨矿物质密度。但是，肠道微生物组在雌激素缺乏引起的骨质流失及其潜在机制中的作用仍然未知。在这项研究中，我们发现孢子菌的丰度（C. spor。） 及其衍生的代谢产物，吲哚丙酸（IPA）在卵巢切除（OVX）小鼠中降低。 体外测定法表明IPA抑制了破骨细胞的分化和功能。 在分子水平上，IPA抑制了核因子Kappa-配体（RANKL）诱导的妊娠X受体（PXR）泛素化和降解的受体激活剂，从而导致PXR与P65的持续结合增加。 在体内每日IPA给药或重复的C. spor。 定殖侵害了OVX诱导的骨质流失。 保护活细菌免受严峻的胃环境，并延迟口服孢子孢子的排空。 从肠道，一个C. spor。 - 封装的丝纤维蛋白（SF）水凝胶系统，在OVX小鼠中获得了与重复的细菌移植或每日给药相当的OVX小鼠的骨骼保护。 总体而言，我们发现肠道孢子 - 衍生的IPA通过调节PXR/p65复合物来参与雌激素缺乏诱导的破骨细胞过度活化。在这项研究中，我们发现孢子菌的丰度（C. spor。）及其衍生的代谢产物，吲哚丙酸（IPA）在卵巢切除（OVX）小鼠中降低。体外测定法表明IPA抑制了破骨细胞的分化和功能。在分子水平上，IPA抑制了核因子Kappa-配体（RANKL）诱导的妊娠X受体（PXR）泛素化和降解的受体激活剂，从而导致PXR与P65的持续结合增加。在体内每日IPA给药或重复的C. spor。 定殖侵害了OVX诱导的骨质流失。 保护活细菌免受严峻的胃环境，并延迟口服孢子孢子的排空。 从肠道，一个C. spor。 - 封装的丝纤维蛋白（SF）水凝胶系统，在OVX小鼠中获得了与重复的细菌移植或每日给药相当的OVX小鼠的骨骼保护。 总体而言，我们发现肠道孢子 - 衍生的IPA通过调节PXR/p65复合物来参与雌激素缺乏诱导的破骨细胞过度活化。在体内每日IPA给药或重复的C. spor。定殖侵害了OVX诱导的骨质流失。保护活细菌免受严峻的胃环境，并延迟口服孢子孢子的排空。从肠道，一个C. spor。- 封装的丝纤维蛋白（SF）水凝胶系统，在OVX小鼠中获得了与重复的细菌移植或每日给药相当的OVX小鼠的骨骼保护。总体而言，我们发现肠道孢子 - 衍生的IPA通过调节PXR/p65复合物来参与雌激素缺乏诱导的破骨细胞过度活化。C.孢子。包含的SF水凝胶系统是一种有前途的工具，可打击绝经后骨质疏松症，而无需重复的细菌移植。
灌注灌注琼脂基础
参考文献1。en ISO 11133：2014+AMD1：2018+AMD2：2020。 食物，动物饲料和水的微生物学 - 制备，生产，存储和性能测试。 2。 ISO 14189：2013。 水质 - 灌注梭菌的枚举 - 使用膜过滤的方法。 3。 ISO 7937：2004。 食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。 4。 Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。 确定性DI梭状芽胞杆菌（Sucque provenienti o污染da acque浅表表）。 5。 downes F.P.和K. Ito（2001）食品微生物学检查的纲要。 第4版。 美国公共卫生协会，华盛顿特区6。 Haushild，A.H.W。和A. Hilsheimer（1974）对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon，S.M.，O.A。 Kautler和J.T. Peeler（1971）改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22：688。 8。 Shahidi，SA。 和AR Ferguson（1971）App。 微生物。 21：500-606。en ISO 11133：2014+AMD1：2018+AMD2：2020。食物，动物饲料和水的微生物学 - 制备，生产，存储和性能测试。2。ISO 14189：2013。 水质 - 灌注梭菌的枚举 - 使用膜过滤的方法。 3。 ISO 7937：2004。 食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。 4。 Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。 确定性DI梭状芽胞杆菌（Sucque provenienti o污染da acque浅表表）。 5。 downes F.P.和K. Ito（2001）食品微生物学检查的纲要。 第4版。 美国公共卫生协会，华盛顿特区6。 Haushild，A.H.W。和A. Hilsheimer（1974）对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon，S.M.，O.A。 Kautler和J.T. Peeler（1971）改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22：688。 8。 Shahidi，SA。 和AR Ferguson（1971）App。 微生物。 21：500-606。ISO 14189：2013。水质 - 灌注梭菌的枚举 - 使用膜过滤的方法。3。ISO 7937：2004。 食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。 4。 Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。 确定性DI梭状芽胞杆菌（Sucque provenienti o污染da acque浅表表）。 5。 downes F.P.和K. Ito（2001）食品微生物学检查的纲要。 第4版。 美国公共卫生协会，华盛顿特区6。 Haushild，A.H.W。和A. Hilsheimer（1974）对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon，S.M.，O.A。 Kautler和J.T. Peeler（1971）改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22：688。 8。 Shahidi，SA。 和AR Ferguson（1971）App。 微生物。 21：500-606。ISO 7937：2004。食物和动物喂养物质的微生物学 - 检测梭状芽胞杆菌的水平方法 - 菌落计数技术。4。Rapporti Istisan 07/5 ISSA 005B Rev.00。确定性DI梭状芽胞杆菌（Sucque provenienti o污染da acque浅表表）。5。downes F.P.和K. Ito（2001）食品微生物学检查的纲要。第4版。 美国公共卫生协会，华盛顿特区6。 Haushild，A.H.W。和A. Hilsheimer（1974）对perfrigens枚举的评估和修改。 应用。 微生物。 27:78。 7。 Harmon，S.M.，O.A。 Kautler和J.T. Peeler（1971）改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22：688。 8。 Shahidi，SA。 和AR Ferguson（1971）App。 微生物。 21：500-606。第4版。美国公共卫生协会，华盛顿特区6。Haushild，A.H.W。和A. Hilsheimer（1974）对perfrigens枚举的评估和修改。应用。微生物。27:78。 7。 Harmon，S.M.，O.A。 Kautler和J.T. Peeler（1971）改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22：688。 8。 Shahidi，SA。 和AR Ferguson（1971）App。 微生物。 21：500-606。27:78。7。Harmon，S.M.，O.A。 Kautler和J.T. Peeler（1971）改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22：688。 8。 Shahidi，SA。 和AR Ferguson（1971）App。 微生物。 21：500-606。Harmon，S.M.，O.A。Kautler和J.T. Peeler（1971）改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。 应用。 微生物。 22：688。 8。 Shahidi，SA。 和AR Ferguson（1971）App。 微生物。 21：500-606。Kautler和J.T.Peeler（1971）改进了灌注梭状芽胞杆菌的枚举。应用。微生物。22：688。8。Shahidi，SA。 和AR Ferguson（1971）App。 微生物。 21：500-606。Shahidi，SA。和AR Ferguson（1971）App。微生物。21：500-606。
梭状芽胞杆菌艰难梭菌感染与转录活性微生物群落的差异有关
梭状芽胞杆菌艰难梭菌感染（CDI）每年在美国约30万住院，相关的货币成本为数十亿美元。肠道微生物组营养不良对CDI很重要。据我们所知，元文字组合（MT）仅用于表征肠道微生物组组成和功能，在一项涉及CDI患者的先前研究中。因此，我们利用MT研究了CDI+（n = 20）和CDI-（n = 19）样品在微生物类群和表达基因方面的活性群落多样性和组成的差异。根据CDI状态，未检测到有关丰富性或偶数的显着（Kruskal-Wallis，p> 0.05）的显着差异。但是，基于CDI状态的聚类对于活性微生物分类群和表达的基因数据集都很重要（Permanova，P≤0.05）。此外，与CDI-样品相比，CDI+中的差异特征分析表明，机会性病原体的肠球菌病原体和Ruminococcus gnavus的表达更大。仅考虑真菌序列时，糖霉菌科在CDI-中表达了更多的基因，而其他31种真菌分类群则被确定为显着（Kruskal-Wallisp≤0.05，log（LDA）≥2）与CDI+相关。我们还检测到基于CDI状态的各种基因和途径（Kruskal-Wallisp≤0.05，log（LDA）≥2）显着差异。值得注意的是，与生物膜形成相关的差异基因通过艰难梭菌表达。这为艰难梭菌对抗生素的抵抗和体内频繁复发提供了另一个可能的贡献。此外，更多的CDI+相关真菌分类群构成了额外的证据，表明该分枝杆菌对CDI发病机理很重要。未来的工作将集中于确定艰难梭菌在感染过程中是否积极产生生物膜，以及任何特定的真菌分类群在CDI中是否特别有影响力。
［干细胞生物学］
阿斯桑医学中心儿童医院儿科科学系，乌尔山大学医学院P-065严重的肝曲正弦障碍综合症（SOS）案例，HLA半合并后，通过使用Hokus-10术语SOS来挽救生命后，HLA半融合后的疾病后，hla半融合后的疾病后，该病房均可通过诊断和干预措施来挽救生命。基于Hokus-10的早期干预阿斯桑医学中心儿童医院儿科科学系，乌尔山大学医学院P-065严重的肝曲正弦障碍综合症（SOS）案例，HLA半合并后，通过使用Hokus-10术语SOS来挽救生命后，HLA半融合后的疾病后，hla半融合后的疾病后，该病房均可通过诊断和干预措施来挽救生命。基于Hokus-10的早期干预阿斯桑医学中心儿童医院儿科科学系，乌尔山大学医学院P-065严重的肝曲正弦障碍综合症（SOS）案例，HLA半合并后，通过使用Hokus-10术语SOS来挽救生命后，HLA半融合后的疾病后，hla半融合后的疾病后，该病房均可通过诊断和干预措施来挽救生命。基于Hokus-10的早期干预阿斯桑医学中心儿童医院儿科科学系，乌尔山大学医学院P-065严重的肝曲正弦障碍综合症（SOS）案例，HLA半合并后，通过使用Hokus-10术语SOS来挽救生命后，HLA半融合后的疾病后，hla半融合后的疾病后，该病房均可通过诊断和干预措施来挽救生命。基于Hokus-10的早期干预阿斯桑医学中心儿童医院儿科科学系，乌尔山大学医学院P-065严重的肝曲正弦障碍综合症（SOS）案例，HLA半合并后，通过使用Hokus-10术语SOS来挽救生命后，HLA半融合后的疾病后，hla半融合后的疾病后，该病房均可通过诊断和干预措施来挽救生命。基于Hokus-10的早期干预阿斯桑医学中心儿童医院儿科科学系，乌尔山大学医学院P-065严重的肝曲正弦障碍综合症（SOS）案例，HLA半合并后，通过使用Hokus-10术语SOS来挽救生命后，HLA半融合后的疾病后，hla半融合后的疾病后，该病房均可通过诊断和干预措施来挽救生命。基于Hokus-10的早期干预