将每个细胞悬浮液添加到包含0.5 mM玻璃珠的2 mL管中(CAT#19-622)。然后以3、4和5的速度在Omni珠子破裂4(CAT#25-010)中均匀地均匀,持续45秒。加工后,将裂解物转移到清洁2毫升试管中,并以10,000 x g离心1分钟,以弥补任何细胞碎屑。使用Quick-DNA™真菌/细菌微型REIPREP试剂盒(Zymo,Cat#D6005)1 µL DNA洗脱器在纳米光谱表(Thermo Fisher)上量化1 µL DNA洗脱器,以确定DNA浓度和纯度。
摘要诱导的极化方法(IP)方法具有强大的潜力,可以更好地表征我们星球的临界区域,尤其是在以多相流动为特征的区域中。散装,表面和正交电导率与孔隙水饱和度之间的功率 - 功率 - 差异可能可用于绘制地下水分含量分布。然而,已经观察到这些功率流行关系中的饱和指数n和p随着地材料的质地和孔隙流体的湿气而变化。实验室中的传统实验设置不允许独立可视化孔隙流体分布。因此,两个饱和指数的物理解释尚不清楚。我们使用粘土涂层的玻璃珠开发了一种新型的毫米 - 流体微型模型,该玻璃珠具有出色的可见性和高IP响应。通过实验室实验,我们同时确定了微型模块的复合电导率,并通过此类多孔材料获得了由排水和吸收产生的相应的孔隙尺度流体分布。基于晶粒的复杂表面电导的升级,进行了复杂电导率的有限元模拟,以确定理想的孔隙流体分布下的饱和指数。结果表明,饱和指数n和p因绝缘流体的神经节大小而变化。饱和指数n和p与饱和孔连接性的变化速率表现出功率差异关系,这是通过计算Euler特征的导数来计算的。这些发现为饱和指数与微观流体分布之间的关系提供了新的物理解释。
图 2 用于对光合微生物进行遗传工程改造的常见遗传转化技术示意图。 (A) 对于绿藻 (衣藻) 和真气藻 (微绿球藻):电穿孔和基因枪轰击可用于衣藻和微绿球藻的叶绿体靶向转化,而电穿孔或用玻璃珠涡旋可用于修饰衣藻的核基因组。细菌接合或农杆菌介导的转移也可用于将 DNA 引入这些细胞。 (B) 对于蓝藻:自然转化或接合可用于转移 DNA 以整合到染色体中或作为复制质粒。质粒也可以通过电穿孔转移。 (C) 对于硅藻:电穿孔和细菌接合是可用于将 DNA 引入硅藻的技术的例子。也可以使用农杆菌介导的转移或基因枪轰击
检测、分析、扩增或操作 DNA 和 RNA 的工作流程通常需要从生物样本和/或酶促反应中提取和纯化。Monarch 核酸纯化试剂盒使用一流的硅胶柱技术和基于玻璃珠的新型 HMW DNA 提取方法,可从各种来源快速可靠地纯化高质量的 DNA 和 RNA。使用 Monarch 试剂盒纯化的 DNA 和 RNA 纯度高,适用于各种下游应用,包括测序、克隆、PCR 和其他酶促操作。Monarch 试剂盒的设计考虑到了可持续性;它们使用更少的塑料,并采用负责任采购的可回收材料包装。为方便起见,Monarch 缓冲液和柱也可单独购买。
•连续监测和记录•具有液体(甘油或甘油)或松散培养基(玻璃珠或沙子)或固体(Teflon或铝)的缓冲探针。这些缓冲材料测量了小瓶中疫苗的温度,而不是疫苗单元中的气温。•可以从单元外部轻松读取的数字显示•在(+/- 1°F)内(+/- 1°F)(+/-。5°C)精度•显示当前的最低和最大温度读数•最小/最大显示器的重置按钮•至少4,000个记忆存储•至少4,000个读数•至少读取范围读取量•用于范围内的温度•较低的速度速率/较低的速度速度•降低速度•绘制范围•彩色范围•彩色彩色范围<彩色彩电率<彩绘效率<
用于检测,分析,扩增或操纵DNA和RNA的工作流程通常需要从生物样品和/或酶促反应中提取和纯化。君主核酸纯化试剂盒使用最佳的二氧化硅柱技术提供了从多种来源的高质量DNA和RNA的快速,可靠的纯化,以及一种用于HMW DNA提取的新型基于玻璃珠的方法。DNA和RNA非常纯净,适合在多种下游应用中使用,包括测序,克隆,PCR和其他酶促操作。君主套件的设计考虑到可持续性;它们使用较少的塑料,并用负责任的可回收材料包装。为方便起见,君主缓冲区和列也可以单独使用。
为研究玻璃珠增强热塑性塑料的弹性和粘弹性力学行为,用脉冲激励技术 (IET)、动态力学分析 (DMA) 和拉伸试验 (TT) 测试了两种复合材料。在 20 至 200°C 的温度范围内,以 1、2、5、10 和 20 Hz 的频率对纯聚酰胺 66 和聚对苯二甲酸丁二醇酯及其复合材料 (分别为 30/40 wt-% 和 20/30 wt-%) 进行了 3 点弯曲 DMA 测试。Williams、Landel 和 Ferry (WLF) 理论允许通过确定样品在室温下的特征频率,将频率相关的“破坏性” DMA 测量的弯曲模量与弯曲模式下的非破坏性 IET 测量进行比较。同样,将纵向模式下的 IET 模量与应变率为 1、10 和 100 %/min 的 TT 杨氏模量进行了比较。两种比较都提供了与标准偏差高度一致的模量。此外,还采用了立方体中的立方体模型方法来模拟界面粘附效应,并计算出不同测量技术的合理粘附系数 k adh。
突变体的产生和随后的分析对于理解基因和蛋白质的功能至关重要。在这里,我们描述了 TIM,一种高效、经济、基于 CRISPR 的针对模型生物莱茵衣藻的靶向插入诱变方法。TIM 利用 Cas9 引导 RNA (gRNA) 核糖核蛋白 (RNP) 与外源双链(供体)DNA 一起递送到细胞中。供体 DNA 包含基因特异性同源臂和一个完整的抗生素抗性基因,该基因插入由 Cas9 产生的双链断裂处。在优化该方法的多个参数后,我们能够在两种不同的细胞壁菌株中为六种不同基因中的六种产生突变体,突变效率范围为 40% 到 95%。此外,这些高效率允许在单个实验中同时靶向两个不同的基因。 TIM 在许多参数方面都很灵活,可以使用电穿孔或玻璃珠法来传递 RNP 和供体 DNA。TIM 在 C . reinhardtii 中实现的突变率远高于之前报道的任何基于 CRISPR 的方法,并且有望对许多(如果不是全部)非必需核基因有效。
Monarch 组织 HMW DNA 提取试剂盒提供了一种快速可靠的方法,可从各种组织和细菌以及其他样本类型(包括酵母、昆虫和两栖动物)中提取高分子量 (HMW)、完整的基因组 DNA。优化的组织提取方案利用杵均质化和蛋白酶 K 消化并搅拌以裂解样品,然后进行蛋白质去除步骤并将提取的 DNA 沉淀到大玻璃珠的表面上。稍微修改的细菌提取方案利用溶菌酶在蛋白酶 K 消化之前有效裂解细菌细胞壁。对于标准方案,DNA 大小范围为 50 – ≥ 500 kb,可以调整以产生更长的 DNA,使其达到 Mb 范围,适用于软器官组织和细菌。纯化的 DNA 产量高,纯度极佳,几乎完全去除了 RNA。对于组织和细菌,处理时间约为 90 分钟。组织和细菌的纯度比通常为 1.8-1.9 (A 260 /A 280 ) 和 2.1-2.5 (A 260 /A 230 )。纯化的 HMW gDNA 适用于各种下游应用,包括长读测序 (Oxford Nanopore Technologies ® 和 Pacific Biosciences ® )、光学映射 (Bionano Genomics ® ) 和链接读基因组组装 (10X Genomics ® )。
• EBTRON 可靠的热扩散技术经过现场验证,自 1984 年以来安装了数十万台设备。• 精密玻璃珠热敏电阻可实现长期稳定性和无漂移操作。• 热敏电阻使用防水环氧树脂灌封,可承受水和大气酸的直接暴露。• 传感器探头配有耐用的 FEP 护套、阻燃级电缆,可暴露在紫外线和超低温下。• 按照 NIST 可追溯标准校准。• 每个传感器节点(每个变送器最多 16 个)在 16 个气流速率下进行计算机校准,以确保在整个操作范围内读数传感器精度为 2%。• 标准变送器配备三个独立的模拟输出信号,用于气流、温度或报警以及湿度、焓或露点(如果提供湿度选项)。• 可选配 RS-485(BACnet/Modbus)、以太网(BACnet/Modbus)或 Lon 的附加网络功能。可以提供“拇指驱动器”数据记录器来代替网络选项。• AMD 具有内置高/低气流报警,具有用户定义的设定点和公差。• 每个 AMD 均通过 UL/cUL 认证、CE 认证、BTL 认证(仅限 BACnet 设备)、FCC-Part 15 合规和 RoHS2 合规。