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World File Search System琼脂
酵母提取物钙碳酸盐葡萄糖琼脂
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限制摘要和琼脂糖凝胶电泳
T ECHNIQUES I N M OLECULAR B IOLOGY – R ESTRICTION D IGEST AND A GAROSE G EL E LECTROPHORESIS This lab will introduce you to DNA modification by restriction enzymes using the purified plasmids you prepared from your transformation.我们还将使用水平凝胶电泳对纯化的质粒和消化进行分析。您将对限制酶进行切割之前和之后对纯化的质粒进行凝胶分析。您将执行质粒的模拟（控制）摘要，一种具有两种不同限制酶和双重摘要的单个摘要。从中，您应该能够确定Qiagen微型制备质粒DNA的纯度，以及在PQE60载体中的WGMDH插入物。一定要阅读有关限制摘要（教科书读数）和琼脂糖凝胶（教科书和讲义）的信息，以了解每个概念的理论，并了解执行成功实验所需的细节。必需的视频 - 新英格兰Biolabs准备的网页上的限制酶链接。观看所需的最小视频是（具有限制性酶的消化，限制酶消化的标准协议和NEB限制酶Double Digigest协议视频）。在进行实验之前，您还应该查看其他几个。https://www.neb.com/applications/cloning-‐and-‐synthetic-‐ biology/dna-‐preparation/restriction-‐enzyme-‐digestion Practical notes on Restriction Endonucleases (RE) and Their Use Enzymatic Unit definition: 1 Unit = amount of enzyme necessary to digest 1 µg DNA in 1 hr (37°C, with适当的缓冲区）。glycerol Re Digests。确保您使用的是正确的缓冲液，酶与底物的正确比率（DNA和正确消化的条件）。Rextion缓冲每个限制酶具有一个缓冲液，其中最高活性（通常为10倍浓缩物）。某些酶具有共同的缓冲液，而其他酶则需要与独特的缓冲液一起使用以进行最佳活动。几家公司（以新英格兰的Biolabs为例）具有与多种酶合作的共同缓冲液。您的网站上有一个链接 - 探索几家公司以了解缓冲液和酶。存储条件RE通过反复暴露于较高的温度来对活动丧失敏感；使用库存以长期存储保持在-20°C，在使用时在〜0°C（在冰上）处于〜0°C（在冰上）。进行消化时，温育几个小时后，某些酶的活性就会损失。由于RE昂贵，因此必须谨慎处理库存。酶应在-20°C时不断存储在非冻结冰箱中。（无霜的冰柜定期在冰点上加热以限制冰的积累。）也最好将酶放在冰箱中的绝缘容器中，该酶在打开冰柜时会限制温度变化（如果存储在霜冻的冰柜中，这一点尤其重要）。为防止在-20°C下冻结，RE库存在含有50％甘油的溶液中。由于在存在> 5％甘油的情况下可以抑制或改变RE活性，因此应库存不超过10％的最终RE消化反应混合物。[A 1:10 RE的稀释度将50％的甘油含量为5％。]在不正确的缓冲液条件下或在存在> 5％甘油的情况下，RE的恒星（*）活性可以显示出改变的DNA裂解特异性，称为“恒星活性”。在这种情况下，酶可以识别出其正常6 bp识别位点的4个基对子集，因此将在比预期的更多位点上切割DNA。例如，熟悉的酶EcoRI因其在低离子强度溶液中的恒星活性而臭名昭著。
大豆酪蛋白消化琼脂平板含 0.1% 聚山梨醇酯 80（伽马射线照射）（三件装）
大豆酪蛋白消化物琼脂是一种广泛使用的培养基，它支持多种生物的生长，甚至是奈瑟菌、李斯特菌和布鲁氏菌等苛刻菌的生长。添加血液的培养基提供了完美界定的溶血区，同时由于其含有氯化钠，可防止红细胞溶解。它在医疗行业中经常用于生产抗原、毒素等。它简单且不含抑制剂的成分使其适用于检测食品和其他产品中的抗菌剂。胰蛋白胨大豆琼脂被各种药典推荐作为无菌测试培养基（6、3）。胰蛋白胨大豆琼脂符合 USP（6）的规定，用于微生物限度测试和抗菌防腐剂有效性测试。Gunn 等人（2）使用该培养基来培养苛刻菌，并研究添加 5%v/v 血液后的溶血反应。胰蛋白胨和大豆蛋白胨的组合使该培养基营养丰富，可提供氨基酸和
麦芽酵母琼脂
1. Wickerham, J. Tropical Med. Hyg., 42, 176 (1939) 2. Williams, (Ed.)，2005，《官方分析化学家协会官方分析方法》，第 19 版，AOAC，华盛顿特区 3. 微生物类型培养物保藏中心和基因库 (MTCC) 微生物技术研究所，昌迪加尔。 4. Isenberg, HD 《临床微生物学程序手册》第 2 版。 5. Jorgensen, JH、Pfaller, MA、Carroll, KC、Funke, G.、Landry, ML、Richter, SS 和 Warnock., DW (2015) 《临床微生物学手册》，第 11 版。 1. 6. 美国公共卫生协会，《乳制品检验标准方法》，1978 年，第 14 版，华盛顿特区 7. Salfinger Y. 和 Tortorello ML，第五版（编辑），2015 年，《食品微生物检验方法概要》，美国公共卫生协会，华盛顿特区 8. Wehr HM 和 Frank JH，2004 年，《乳制品微生物检验标准方法》，第 17 版，APHA Inc.，华盛顿特区
板计数琼脂，1.2％琼脂
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Hofer的碱性中等 ezstain骨细胞染色套件 磷酸盐缓冲盐水，pH 7.4，1x Hicrome™uti agar M-FC琼脂基础 M1245.pdf 葡萄糖肽琼脂 使用Himedia的MAG24平台 乳酸杆菌夫人（Agar Mrs Mrs），颗粒状 营养肉汤 盐水营养琼脂 酵母提取物agar 磷酸盐缓冲盐水，pH 7.2，10x
原理和解释农杆菌是导致植物肿瘤的细菌属。大多数农杆菌是植物病原体，其自然栖息地位于易感植物的根和地下茎周围（1）。农杆菌Tumefaciens是该属中最常见的物种。农杆菌以其在自身和植物之间转移DNA的能力而闻名，因此，它已成为基因工程改善植物的重要工具。如Subba Rao（4）所述， HOFERS碱性培养基的配制，用于生长农杆菌，同时抑制土壤中的根瘤菌。 它是一种具有高碱性pH的选择性培养基。 农杆菌在较高的pH下生长，而根瘤菌在碱性pH下生长。 培养基补充甘露醇作为碳水化合物或碳源。 酵母提取物提供氮营养素。 氯化钠保持培养基的渗透平衡。 磷酸二硫酸二硫酸盐缓冲培养基。 百里香蓝是pH指示剂，在高碱性pH值下保持蓝色。HOFERS碱性培养基的配制，用于生长农杆菌，同时抑制土壤中的根瘤菌。它是一种具有高碱性pH的选择性培养基。农杆菌在较高的pH下生长，而根瘤菌在碱性pH下生长。培养基补充甘露醇作为碳水化合物或碳源。酵母提取物提供氮营养素。氯化钠保持培养基的渗透平衡。磷酸二硫酸二硫酸盐缓冲培养基。百里香蓝是pH指示剂，在高碱性pH值下保持蓝色。
营养琼脂
原理和解释养分培养基是用于维持微生物的基本培养基，通过富含血清或血液来培养挑剔的生物，也用于在生化或血清学测试之前进行纯度检查（1,2）。营养琼脂非常适合演示和教学目的，在这种目的中，通常需要在环境温度下培养更长的生存期，而不会在更营养的基材中发生过度生长的风险。这种相对简单的公式已保留，并且仍被广泛用于各种材料的微生物检查，也建议通过标准方法进行。这是几种用于常规培养微生物的非选择性介质之一（3,4）。它可用于并非特别挑剔的细菌培养和枚举。添加不同的生物液，例如马或绵羊血，血清，蛋黄等。使其适合于培养相关的亲切生物。肽，HM肽B和酵母提取物提供必要的氮化合物，碳，维生素以及细菌生长所需的一些微量成分。氯化钠维持培养基的渗透平衡。
讲座27：用于DNA分析的琼脂糖凝胶电泳
A。DNA浓度，电压和缓冲液浓度。B.凝胶百分比，缓冲液浓度和电压。C. DNA的大小，凝胶浓度和DNA构象。D.凝胶的长度，缓冲液浓度和DNA浓度。
氮杂杆菌琼脂（mannitol）
微生物在实验室以及自然界中的存活取决于它们在某些化学和物理条件下生长的能力。对这些条件的理解使我们能够表征分离株并区分不同类型的细菌。此类知识也可以用于控制实际情况下微生物的生长。通常是有机嗜性的生物，也可以称为化学养殖。这些生物可以将各种有机化合物用作碳和能源。因此使用的常见糖是葡萄糖。ATP是由底物级或氧化磷酸化产生的。 培养基包含葡萄糖，作为碳源。 在培养基中的钼酸钠增加了氮的固定（3）。 培养基中的各种盐作为缓冲液以及对化学可营养细菌的必需离子。ATP是由底物级或氧化磷酸化产生的。培养基包含葡萄糖，作为碳源。在培养基中的钼酸钠增加了氮的固定（3）。培养基中的各种盐作为缓冲液以及对化学可营养细菌的必需离子。