深度突变扫描是一种研究各种研究问题(包括蛋白质功能和稳定性)的有效方法。在这里,我们使用高通量 CRISPR 基因组编辑对参与细胞包膜合成的三种必需大肠杆菌蛋白质(FabZ、LpxC 和 MurA)进行深度突变扫描,并研究突变在其原始基因组环境中的影响。我们使用超过 17,000 种蛋白质变体来研究蛋白质功能和单个氨基酸在支持生存力方面的重要性。此外,我们利用这些库来研究针对选定蛋白质的抗菌化合物的抗药性发展。在所研究的三种蛋白质中,MurA 似乎是更优越的抗菌靶标,因为它的突变灵活性低,这降低了获得同时保留 MurA 功能的抗药性突变的机会。此外,我们根据每种化合物的抗药性突变数量对抗 LpxC 先导化合物进行进一步开发排名。我们的结果表明,深度突变扫描研究可用于指导药物开发,我们希望这将有助于开发新型抗菌疗法。
凋亡(通常称为程序性细胞死亡)不断发生在人类中。随着癌细胞的酸度增加,诱发了凋亡。在健康细胞中,质子泵蛋白允许H +离子渗透到细胞膜,从而调节pH值。然而,质子泵抑制剂(PPI),例如奥美拉唑,防止质子运动,导致pH调节。在先前的研究中,奥美拉唑诱导了Jurkat T淋巴细胞的细胞死亡;但是,尚无证实细胞是通过细胞凋亡或通过坏死而死亡的,而细胞爆发。通过使用膜联蛋白-V染色,可以测量奥美拉唑,右氯唑唑和埃索美吡唑对凋亡诱导的影响。细胞死亡。右兰索拉唑和埃索美拉唑在18小时时均达到100%的凋亡,表明它们具有较早的凋亡激活点。为了测量细胞活力的程度,通过用小钙蛋白 - 乙酰氧基甲基(AM)染料染色细胞来测量胞质酯酶活性。Jurkat细胞暴露于Omeprazole,Dexlansoprazole和Esomeprazole六个小时,并监测30小时以测量生存能力。阿霉素是一种已知的化学治疗性,在测试凋亡诱导和生存力时也被用作阳性对照。使用荧光显微镜成像时,由于膜联蛋白V-FITC的结合而导致凋亡荧光的任何细胞以及由于PI的结合而导致的坏死细胞荧光。用钙软蛋白AM(如果细胞荧光,它们)被认为是可行的,而非荧光细胞被认为是坏死的。在30小时的标记下,右倾角唑的生存力最小(40.0±3.5%的细胞可行),其次是阿霉素(62.9±1.8%),埃索美普唑(66.2±1.6%)和欧洲普拉唑(69.29±2.01%)(69.29±2.01%),在比较(71%)中(71%)(71%)。右兰索拉唑的生存能力低,表明需要使用相同的PPI和暴露方法进行毒性研究,以确定最佳药物浓度。奥美拉唑和埃索美瑞唑的最佳浓度为1 µm,右兰索拉唑啉为0.5 µm。未来的研究包括使用膜联蛋白V-FITC和碘化丙啶(PI)染料在确定浓度下测试细胞死亡方法。
A. 任务描述和预算项目理由 该项目旨在开发航空母舰专用技术,将船舶技术基础注入现有和未来的航空母舰,并可能实现目前无法实现的子系统设计能力。该项目将海军技术基础、其他政府实验室和私营部门最有前途的技术转化为特定的先进开发工作。该项目开发的所有系统都有可能支持新兴需求和其他有前途的系统技术,以插入新的航空母舰设计中。重点是开发船体、机械、推进、电气、航空、作战系统和战斗支援系统、子系统和组件,以显著提高航空母舰的可负担性、人力需求、生存力和作战能力,并满足对未来航空母舰运行至关重要的现有和待定法规和法令的要求。该项目还涵盖了支持 CVN 78 采购所需的任务,包括但不限于工程支持、计划和项目支持、物流支持、建模和仿真、测试和评估、人力和项目相关研究以及设计支持系统,例如集成数字环境 (IDE)。
副标题 B — 项目要求、限制和局限性 第 211 节 国防科学技术战略的编纂。第 212 节 高级学位持有者在人员示范实验室的直接雇用权的编纂。第 213 节 国防创新部门的职责和地区活动。第 214 节 国防设立的促进竞争性研究计划的要求的编纂。第 215 节 国防部科学技术再造实验室相关权限的编纂。第 216 节 新兴技术和国家安全威胁指导委员会相关改进。第 217 节 国家微电子研究与开发网络相关改进。第 218 节 修改快速获取学术机构技术人才和专业知识的机制,以支持国防部的任务。 219. 对加强国防部研究、开发、测试和评估中心的试点计划进行技术修正。第 220 节。少数机构的国防研究和工程活动。第 221 节。DDG(X) 驱逐舰工程工厂的测试计划。第 222 节。研究非常规战争的联盟。第 223 节。开发和实施用于生存力和杀伤力测试的数字技术。
联合测试与评估 (JT&E) 计划考虑新兴技术以及日益复杂和动态的联合多领域作战环境,以开发旨在提高美国作战效能、适用性和战斗生存力的解决方案。各军种和作战司令部 (CCMD) 帮助确定需要在其职责范围内解决的关键挑战,以保持联合多领域作战的优势。JT&E 计划提供作战测试和评估管理和专业知识,以开发、测试和验证联合解决方案,包括敏捷作战战术、技术和程序 (TTP)、使用概念 (CONEMP) 和作战概念 (CONOPS)。反过来,各军种和 CCMD 为 JT&E 项目的规划和执行及其向作战部队的成功过渡提供领导和支持。JT&E 计划侧重于无法在每个单独的军种和 CCMD 内经济或有效地维持的联合要求。鉴于跨领域的平台、网络和指挥与控制解决方案的集成度和依赖性不断提高,JT&E 的使命和对系统测试的独特关注对于国防部的战略目标(包括现代化)变得越来越重要。JT&E 测试技术、劳动力人才和回访对于充分评估整个 CCMD 的作战计划的有效性至关重要。
摘要 基因补偿是一个引人注目的生物学概念,它解释了生物体在基因变异因突变而中断时,如何保持其适应性和生存力。然而,基因补偿的潜在机制仍然无法解决。当敲除介导和敲低介导的表型存在差异时,基因补偿的初始概念已在模型生物中得到研究。在斑马鱼模型中,一些研究报告称,斑马鱼突变体并没有表现出与斑马鱼变体相同的基因所显示的严重表型。斑马鱼突变体而非变体中的这种现象是由于基因补偿的反应造成的。2019 年,两项令人惊叹的研究部分揭示了基因补偿可能是通过调节 NMD 和/或携带 PTC 的 mRNA 与突变斑马鱼的表观遗传机制协作来上调补偿基因所触发的。在这篇评论中,我们想更新遗传补偿研究的最新进展和未来前景,其中包括时间依赖性参与的假设,并解决敲除介导和敲低介导之间的差异,以研究基因
委员会章程 G-45 人机系统集成 2021 年 6 月 1.0 总则 本章程规定了 SAE International (SAE) G-45 人机系统集成 (HSI) 委员会的目标和运作程序。G-45 委员会活动应根据本章程的规定并按照 SAE International 的 ESC - 执行标准委员会和系统管理委员会制定的程序进行,如执行标准委员会董事会治理政策和系统管理委员会指南所示。 2.0 范围和目标 SAE G-45 人机系统集成技术委员会负责开发和维护人机系统集成及其支持学科的需求文件,包括人为因素工程、人员、人力、宜居性、培训、安全和职业健康、部队保护和生存力。HSI 规范、标准、指南、数据项描述和其他需求文件主要供国防部和国防承包商(工业)在系统采购中使用。这些工件也适用于其他政府机构(例如 NASA、国土安全部、FAA)、国际政府机构和其他商业实体。G-45 委员会的技术重点是以下系统:• 航空航天(例如飞机、航天器、无人驾驶飞机和航天器),• 地面车辆(例如
A. 任务描述和预算项目理由 该项目旨在开发航空母舰专用技术,将船舶技术基础注入现有和未来的航空母舰,并可能实现目前无法实现的子系统设计能力。该项目将海军技术基础、其他政府实验室和私营部门最有前途的技术转化为特定的先进开发工作。该项目开发的所有系统都有可能支持新兴需求和其他有前途的系统技术,以插入新的航空母舰设计中。重点是开发船体、机械、推进、电气、航空、作战系统和战斗支援系统、子系统和组件,以显著提高航空母舰的可负担性、人力需求、生存力和作战能力,并满足对未来航空母舰运行至关重要的现有和待定法规和法令的要求。该项目还涵盖了支持 CVN 78 采购所需的任务,包括但不限于工程支持、计划和项目支持、物流支持、建模和仿真、测试和评估、人力和项目相关研究以及设计支持系统,如集成数字环境 (IDE)。
副标题 B — 项目要求、限制和局限性 第 211 节 国防科学技术战略的编纂。第 212 节 高级学位持有者在人员示范实验室的直接雇用权的编纂。第 213 节 国防创新部门的职责和地区活动。第 214 节 国防设立的促进竞争性研究计划的要求的编纂。第 215 节 国防部科学技术再造实验室相关权限的编纂。第 216 节 新兴技术和国家安全威胁指导委员会相关改进。第 217 节 国家微电子研究与开发网络相关改进。第 218 节 修改快速获取学术机构技术人才和专业知识的机制,以支持国防部的任务。 219. 对加强国防部研究、开发、测试和评估中心的试点计划进行技术修正。第 220 节。少数机构的国防研究和工程活动。第 221 节。DDG(X) 驱逐舰工程工厂的测试计划。第 222 节。研究非常规战争的联盟。第 223 节。开发和实施用于生存力和杀伤力测试的数字技术。
基于植物生长促进细菌的固体和液体制剂枯草芽孢杆菌BS006被设计为蔬菜苗圃生产的生物接种剂。考虑到从生产过程到土壤应用的微生物生存的重要性,在20、30和40°C的十二个月内评估了每个配方中的孢子生存力(CFU)。在评估的三个温度水平下,固体和液体配方的生存率分别高于85和90%。将细菌生物学活性评估为苗圃中的生菜,西兰花和番茄的植物生长促进。在播种和播种后21天,以三个浓度(1x10 7,5x10 7,1x10 8 cfu/ml)施加制剂。根和空中长度和干重是评估响应变量。观察到了积极的效果,特别是在1x10 8孢子/ml的液体配方中,显示了根和空中部位的最长长度,并且根和叶面部分中的干重值最高。关于内生芽孢杆菌,枯草芽孢杆菌定植的根,茎和叶,达到8x10 2至1x10 5 cfu/g之间的浓度。
