IGEA UK Suites 1 & 2, Parkhill Business Centre Suites 1 & 2, Parkhill Business Centre Annexe, Walton Road, Wetherby, Annexe, Walton Road, Wetherby, West Yorkshire LS22 5DZ, UK West Yorkshire LS22 5DZ, UK 电话:+44 1937 547065 电话:+44 1937 547065 www.igeamedical.co.uk www.igeamedical.co.uk info.uk@igeamedical.com info.uk@igeamedical.com www.igeamedical.com www.igeamedical.com
* 对于不想将 FBS 与静息原代 T 细胞一起使用的用户,建议使用以下培养基成分:CTS OpTmizer T 细胞扩增 SFM(货号 A1048501)+ 2.6% CTS OpTmizer T 细胞扩增 SFM 补充剂 + 5% CTS 免疫细胞血清替代品 (SR)(货号 A2596101)+ 3% GlutaMAX 补充剂(货号 35050061)+ IL-7 和 IL-15。
电气额定值 100–240 VAC,50/60 Hz,270 VA 脉冲电压 500–2,500 V 脉冲持续时间 1–100 毫秒 最大占空比 0.1 充电时间 最长 6 秒 海拔高度 最高 2,000 米 工作温度 15°C 至 30°C 最大相对湿度 最高 80% 防护等级 IPX0 保护接地 I 类(接地) 安装类别 II 仪器类型 台式装置 设备尺寸(宽 x 长 x 高) 9.5 x 10.1 x 7.6 英寸(24.1 x 25.7 x 19.3 厘米) 1 通道移液器工作站尺寸(宽 x 长 x 高) 4.9 x 6.6 x 5.0 英寸(12.4 x 16.8 x 12.7 厘米) 8 通道移液器工作站尺寸(宽 x 长 x 高) 5.2 x 8.9 x 4.8 英寸(13.2 x 22.6 x 12.2 厘米) 设备重量 10.1 磅(4.6 千克) 内置功能 触摸屏(800 x 600 像素),数字显示
本文件中提及的产品的预期用途各不相同。有关具体预期用途声明,请参阅使用说明 (IFU)。© 2022 Thermo Fisher Scientific Inc. 保留所有权利。除非另有说明,所有商标均为 Thermo Fisher Scientific 及其子公司的财产。C-Flex 是 Saint-Gobain Performance Plastics Corporation 的商标。Tritan 是 Eastman Chemical Company 的商标。
Gibco™ CTS™ Xenon™ 电穿孔仪器 Cat. No. A50301 建议细胞浓度 20 x 10⁶ 至 100 x 10⁶ 细胞/mL 电穿孔体积 1 mL; 5–25 mL 电穿孔室容量 1 mL 5–25 mL 电穿孔体积的运行时间 7–22 分钟 电穿孔脉冲电压范围 500–2,500 V 电穿孔脉冲宽度范围 1–30 ms 电穿孔脉冲间隔范围 500–1,000 ms 电穿孔脉冲数 1–10 支持 21 CFR 第 11 部分合规性 是,可进行软件升级(请咨询) 开放平台通信 - 统一架构 (OPC-UA) 兼容性 是 云连接实用程序 是 细胞搅拌器转速 60 rpm 预冷技术 Peltier 预冷温度设定范围 10–30°C 尺寸(高 x 宽 x 深),门完全打开时 43.1 x 26.5 x 21.2 英寸(109.5 x 67.4 x 53.9 厘米) 重量 154.3 磅(70 千克) 电气额定值 100–240 V, 1,200 VA 触摸显示屏 8 英寸电容式
本文件中介绍的方法由一位在实验中使用过 Alt-R CRISPR-Cas9 系统的 IDT 客户提供。本文件可作为在类似模型生物中使用 Alt-R CRISPR-Cas9 系统的起点,但可能并未针对您的基因或应用进行完全优化。IDT 不保证方法或此类方法的任何性能。IDT 应用专家只能提供与本文件中概述的方法相关的一般技术支持和故障排除支持。
图 6. CD4 与 CD8 T 细胞比例的保持。通过流式细胞术鉴定 CD4 和 CD8 T 细胞。非电穿孔细胞(条件 0)在活细胞、单个细胞和未转染细胞(TCRαβ + )上进行门控,而电穿孔细胞在活细胞、单个细胞和敲除细胞(TCRαβ – )上进行门控。非电穿孔细胞与使用 Neon 系统(100 µL)和 CTS Xenon 系统(1 和 9 mL)电穿孔的细胞之间的 CD4(深蓝色)和 CD8(浅蓝色)T 细胞比例基本保持一致。
3.1. 将最多 30 mL 的细胞悬浮液装入输入袋。 3.2. 将输入袋和输出袋连接至各自的液体管路。 3.3. 将 MultiShot 墨盒插入仪器。 3.4. 将电穿孔室推杆向前推,使电穿孔室与仪器的电触点接合。 3.5. 将输入袋连接至支架挂钩,并将输出袋放入输出袋托盘中。 3.6. 将管子穿过每个泵和预冷块。
► GFP 表达是选择电穿孔条件的常用工具。选择电穿孔条件时使用的有效载荷是相关的。转染 RNP 或 GFP-mRNA 时细胞活力相当 (A);然而,转染效率根据使用的有效载荷而不同,GFP-mRNA 转染在更广泛的电穿孔参数中较高,而 RNP 效率与施加的电压相关 (B)。
6. 用 2 mL 电解缓冲液填充 Neon NxT 管(对于 10 μ L Neon NxT 吸头,使用缓冲液 E10)。 7. 将 Neon NxT 管插入 Neon NxT 移液器站。 8. 在设备上设置所需的电穿孔方案和脉冲条件。 9. 将预热的细胞培养板从培养箱移到生物安全柜 10. 要将 Neon NxT 吸头插入 Neon NxT 移液器,请按下移液器上的按钮至第二档以打开夹子。 11. 按照下面的板图或表格对样品进行电穿孔。移取样品溶液,将移液器停靠在站上,然后应用相应的电穿孔方案(11a)。每次电穿孔运行完成后,将样品转移到