1。如果需要进一步的长期研究,糖尿病发生后两到五天(如血糖水平所示)会接受分泌胰岛素的颗粒。 2。 胰岛素颗粒释放约0.1 U /24小时> 30天,在IACUC啮齿动物手术指南之后,使用制造商的套管卡或手术切口将皮下植入皮下植入。 如果对植入物胰岛素颗粒进行切口,请按照与渗透泵植入IACUC标准程序相同的说明,但是您不会植入渗透泵,而是植入胰岛素颗粒。 遵循胰岛素颗粒制造商提供的给药指南。 根据制造商的不同,体重不到25克的小鼠可能只需要一个胰岛素颗粒。血糖不受正常范围内(70-150 mg/dl)内的较大小鼠可能会接受两个胰岛素颗粒。 3。 应在协议中描述替代性胰岛素治疗。糖尿病发生后两到五天(如血糖水平所示)会接受分泌胰岛素的颗粒。2。胰岛素颗粒释放约0.1 U /24小时> 30天,在IACUC啮齿动物手术指南之后,使用制造商的套管卡或手术切口将皮下植入皮下植入。如果对植入物胰岛素颗粒进行切口,请按照与渗透泵植入IACUC标准程序相同的说明,但是您不会植入渗透泵,而是植入胰岛素颗粒。遵循胰岛素颗粒制造商提供的给药指南。根据制造商的不同,体重不到25克的小鼠可能只需要一个胰岛素颗粒。血糖不受正常范围内(70-150 mg/dl)内的较大小鼠可能会接受两个胰岛素颗粒。3。应在协议中描述替代性胰岛素治疗。
电穿孔会导致细胞膜通透性暂时增加,并导致兴奋细胞和非兴奋细胞的跨膜电压 (TMV) 发生长时间变化。然而,这些 TMV 变化的机制仍有待完全阐明。为此,我们使用 FLIPR 膜电位染料将两种不同的细胞系暴露于单个 100 µ s 电穿孔脉冲后,在 30 分钟内监测 TMV。在表达极低水平内源性离子通道的 CHO-K1 细胞中,脉冲暴露后的膜去极化可以用非选择性漏电流来解释,这种漏电流一直持续到膜重新密封,使细胞能够恢复其静止的 TMV。在表达多种不同离子通道的 U-87 MG 细胞中,我们意外地观察到初始去极化阶段之后的膜超极化,但仅在 33 ◦ C 时发生,而在 25 ◦ C 时未发生。我们开发了一个理论模型,该模型得到了离子通道抑制剂实验的支持,该模型表明超极化在很大程度上可归因于钙激活钾通道的激活。离子通道激活与 TMV 和细胞内钙的变化相结合,参与各种生理过程,包括细胞增殖、分化、迁移和凋亡。因此,我们的研究表明离子通道可能是影响电穿孔后生物反应的潜在靶点。
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10p的抽象部分缺失是一种罕见的疾病。这种疾病的共同特征包括智力障碍,发育延迟,畸形特征,甲状旁腺功能减退,耳聋和肾异常,但患者之间的表型可能会有所不同。我们报告了一个婴儿女孩,出现了全球发育延迟,唇裂,先天性外脱皮,喉乳突,心房间隔缺陷和感觉性听力损失的独特面部特征。46,xx,del(10p→ter)在G带分析中观察到。进行了染色体微阵列,以获取有关可能与临床表型,医疗问题和管理有关的缺失大小和基因受累的更多详细信息。缺失涉及10p15.3 – p12.31的区域,大约为19.528739 MB。缺失的大小可以确定表型的变异性,而微阵列对于更好地理解缺失大小和基因受累的必要条件是必要的。
手术程序:将根据IACUC的啮齿动物生存手术指南制备怀孕(12.5-16.5 d后)女性的腹部。然后,将在皮肤和腹膜中进行腹部中线切口,长度约1.5厘米至2厘米,以暴露子宫角。应注意维持无菌的子宫和周围的组织,并用温暖的无菌盐水保持湿润。胚胎/胎儿可以使用纤维光通过子宫壁进行透射,以可视化受体组织。可视化目标区域的其他方式,例如超声。完成电穿孔程序后,子宫角将返回腹膜腔,切口将以两层关闭。完成电穿孔程序后,子宫角将返回腹膜腔,切口将以两层关闭。
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图 6. CD4 与 CD8 T 细胞比例的保持。通过流式细胞术鉴定 CD4 和 CD8 T 细胞。非电穿孔细胞(条件 0)在活细胞、单个细胞和未转染细胞(TCRαβ + )上进行门控,而电穿孔细胞在活细胞、单个细胞和敲除细胞(TCRαβ – )上进行门控。非电穿孔细胞与使用 Neon 系统(100 µL)和 CTS Xenon 系统(1 和 9 mL)电穿孔的细胞之间的 CD4(深蓝色)和 CD8(浅蓝色)T 细胞比例基本保持一致。
Gibco™ CTS™ Xenon™ 电穿孔仪器 Cat. No. A50301 建议细胞浓度 20 x 10⁶ 至 100 x 10⁶ 细胞/mL 电穿孔体积 1 mL; 5–25 mL 电穿孔室容量 1 mL 5–25 mL 电穿孔体积的运行时间 7–22 分钟 电穿孔脉冲电压范围 500–2,500 V 电穿孔脉冲宽度范围 1–30 ms 电穿孔脉冲间隔范围 500–1,000 ms 电穿孔脉冲数 1–10 支持 21 CFR 第 11 部分合规性 是,可进行软件升级(请咨询) 开放平台通信 - 统一架构 (OPC-UA) 兼容性 是 云连接实用程序 是 细胞搅拌器转速 60 rpm 预冷技术 Peltier 预冷温度设定范围 10–30°C 尺寸(高 x 宽 x 深),门完全打开时 43.1 x 26.5 x 21.2 英寸(109.5 x 67.4 x 53.9 厘米) 重量 154.3 磅(70 千克) 电气额定值 100–240 V, 1,200 VA 触摸显示屏 8 英寸电容式
* 对于不想将 FBS 与静息原代 T 细胞一起使用的用户,建议使用以下培养基成分:CTS OpTmizer T 细胞扩增 SFM(货号 A1048501)+ 2.6% CTS OpTmizer T 细胞扩增 SFM 补充剂 + 5% CTS 免疫细胞血清替代品 (SR)(货号 A2596101)+ 3% GlutaMAX 补充剂(货号 35050061)+ IL-7 和 IL-15。