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World File Search System电穿孔
引文：Comer, AL、Sriran, B.、Yen, WW、Cruz-Martín, A. 一种使用双侧子宫内电穿孔来探究遗传影响的管道
随着全基因组关联研究揭示了许多神经系统疾病的异质遗传基础，研究特定基因对大脑发育和功能的贡献的需求也随之增加。依靠小鼠模型来研究特定基因操作的作用并不总是可行的，因为转基因小鼠品系非常昂贵，而且许多新的疾病相关基因还没有市售的遗传品系。此外，创建小鼠品系可能需要多年的开发和验证。子宫内电穿孔提供了一种相对快速简便的方法，可以在体内以细胞类型特异性的方式操纵基因表达，只需开发 DNA 质粒即可实现特定的基因操作。双侧子宫内电穿孔可用于靶向大量额叶皮层锥体神经元。将这种基因转移方法与行为方法相结合，可以研究基因操作对前额叶皮层网络功能以及幼鼠和成年鼠社会行为的影响。
使用 CRISPR 试剂对人类 B 细胞系进行电穿孔
图 1. 最佳条件基于细胞存活率和靶向敲除率。根据上述方案，每次电穿孔用含有靶向人 CD19 的 crRNA 的 RNP（从针对不同 B 细胞系中细胞内和细胞外标志物的 30 多种 crRNA 筛选中选择）转染 100 万个 Ramos 细胞。（A）电穿孔后的第二天，用 2.5 μg/mL 碘化丙啶（BioLegend，产品目录号 421301）对部分细胞染色，并通过流式细胞术进行分析。（B）电穿孔五天后，用 2.5 μg/mL Alexa Fluor ® 647 抗人 CD19（BioLegend，产品目录号 302220，克隆 HIB19）加碘化丙啶对部分细胞染色，并通过流式细胞术进行分析。对照 = 未经电穿孔的细胞：RNP 混合物。数据由德国弗莱堡大学的 Marco Cavallari 博士提供。
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