图1通过整合侧向流条(RAA -LF)系统,重组酶 - AID放大测定法的特异性和灵敏度。(a)横向流条的说明。FITC-生物素标记的RAA扩增子首先与胶体金标记的抗FITC抗体结合。随着偶联的飞行,该建筑群被测试线上的链霉亲和蛋白捕获。其余的复合物继续向前扩散,并被控制线的抗FITC抗体抗体捕获。在测试和控制线上的视觉带表示正读数,而控制线处的单个频段仅表示负读数。(b,c)用底漆和探针集对MPXV和VACV DNA的RAA -LF检测,靶向D6R,E9L,N3R和N4R基因。控件不包括模板控件(模拟)。(d)使用MPXV DNA作为具有横向流量读数的模板的D6R,E9L,N3R和N4R引物的检测极限。MPXV DNA浓度作为基因组拷贝/μL表示。控件不包括模板对照(模拟)。(E)在手掌温度下放大N4R引物和探针设置的横向流量结果。在指定的时间消除了10μL反应产物的体积并用横向读数进行测试。所有实验重复了三次,显示了一个代表性结果。
4.FB 过零检测(谷底开通)和副边导通时间检测 在 FB 过零时,功率 MOSFET 开通,而后功率 MOSFET 开通时间达到 COMP 控制的时间,功率 MOSFET 关断,
1 西班牙马德里伊迪帕斯拉巴斯大学医院微生物学服务中心,28046; fernandolazaroperona@gmail.com(FL-P.); elie.dahdouh@idipaz.es(ED); serromansoto@gmail.com (SR-S.); sonia23jr@gmail.com (SJ-R.); juliogarciarodriguez@gmail.com (JG-R.) 2 癌症表观遗传学实验室,医学和分子遗传学研究所(INGEMM),拉巴斯大学医院,28046 马德里,西班牙; rodriguez.antolin.c@gmail.com 3 西班牙马德里 28046 拉巴斯大学医院内科服务部传染病科和热带及旅行医学科; fercalleprieto@gmail.com 4 西班牙马德里拉巴斯大学医院重症医学科,28046; alexander.agrifoglio@salud.madrid.org 5 西班牙马德里 28047 戈麦斯乌拉中央防御医院 CBRN 和传染病科; fmemnov@oc.mde.es * 通信地址:jesus.mingorance@idipaz.es;电话:+ 34-91-207-1625 † 这些作者对这项工作做出了同等贡献。
摘要目的本研究的目的是开发一种在隔离器工作室上取样和检测腺病毒衍生的基因治疗(GT)载体的方法。方法我们使用定量PCR(Q-PCR)来检测纯GT产物的标准稀释液和采样表面提取物中的病毒基因组。我们比较了三个用于表面采样的设备(棉花压缩,棉签和聚酯羊群),并对每个设备进行了阳性对照,阴性对照和诱导的污染测试。结果我们的结果表明,Q-PCR分析检测到GT纯产物,并在整个稀释范围内得到扩增。Q-PCR分析中预期和测量的矢量颗粒数量的平均差为1.27 log。聚酯拭子的总提取体积中的颗粒数为4.66×10 8(占初始数量的7.8%),棉签的颗粒数量为3.82×10 8,棉签的颗粒数量为3.82×10 8,棉签的2.88×10 7(4.8%)(4.8%)。结论这些初始结果表明,对工作表的病毒监测是可行的,将有助于我们验证GT产品供应链。
可以在诗歌,艺术和历史描述(例如埃及象形文字)中观察到病毒疾病后遗症的记录。不仅人类,而且植物也受到病毒感染的影响。德国化学家阿道夫·梅耶(Adolf Mayer)(1876)研究烟草摩西疾病,指出,它可以在接种病植物汁的健康植物中复制,表现出其感染性。后来俄罗斯生物学家迪米特里·伊瓦诺夫斯基(Dimitri Ivanovski,1892年)采取了最重要的一步,他提出了果汁,并证明了这种疾病不是细菌原因。和1898年,荷兰微生物学家Martinus Beijerinck进一步迈出了一步,表明病毒的感染性在连续稀释后仍然存在,当时毒剂可能是细菌毒素的可能性。