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使用扩散 MRI 多室模型和纤维束测量技术对老年抑郁症和冷漠症患者进行大脑微结构评估
晚年抑郁症 (LLD) 很常见，会导致残疾，并使患痴呆症的风险加倍。冷漠症可能会造成认知能力下降的额外风险，但对其病理生理学的了解尚不清楚。虽然已经使用扩散张量成像 (DTI) 评估了白质 (WM) 的改变，但该模型不能准确地表示 WM 的微观结构。我们假设更复杂的多室模型将提供 LLD 和冷漠症的新生物标志物。研究纳入了 56 名个体（LLD n = 35，26 名女性，75.2 ± 6.4 岁，冷漠评估量表得分（41.8 ± 8.7）和健康对照者，n = 21，16 名女性，74.7 ± 5.2 岁）。在本文中，我们通过沿纤维束直接插入微观结构指标，采用基于纤维束的方法来研究 LLD 和冷漠症的新型扩散模型生物标志物。我们进行了多元统计分析，并结合主成分分析来降维数据。然后，我们通过展示文献中经典报道的 LDD 修改，同时报告 LLD 中冷漠的生物学基础的新结果，测试了我们框架的实用性。最后，我们旨在研究冷漠与不同纤维束中微观结构之间的关系。我们的研究表明，新的纤维束，如纹状体运动前束，可能与 LLD 和冷漠有关，这为重度抑郁症中的冷漠机制带来了新的启示。我们还发现了 5 个不同束的扩散 MRI 指标的统计变化，这些变化此前曾在严重认知障碍痴呆症中报告过，这表明这些束之间的这些改变都与动机和认知有关，可能解释了冷漠如何成为退行性疾病的前驱阶段。
第 2 单元 计算机的功能
计算机 2.2.1 数字计算机的组成部分 数字计算机的关键要素（如图 2.1 中的框图所示）包括：中央处理器、输入、输出和内存。 中央处理器 (CPU) 就像计算机的大脑。它负责执行指令。它控制和协调指令的执行。它由控制单元 (CU)、算术逻辑单元 (ALU) 和寄存器组成。CU 通过解码指令并生成要执行的微操作来控制指令的执行。ALU 负责执行算术和逻辑运算。指令的执行涉及 CPU 的几乎所有部分（CU、ALU 和寄存器）。因此，CPU 被称为计算机系统中最重要的组件。 输入设备用于读取要处理的指令和数据，输出设备显示执行程序后获得的结果。键盘、鼠标和扫描仪是输入设备的例子，而显示器、打印机和绘图仪是输出设备的例子。内存用作工作存储器，用于临时存储程序执行过程中生成的数据和中间结果。计算机使用两种类型的内存：主内存和辅助内存。主内存在日常用语中通常称为 RAM。它是一种读/写内存，用于存储程序和数据。由于 RAM 是易失性的，计算机还使用第二级内存（辅助内存）来永久存储内容。硬盘是不可移动的辅助存储设备，几乎存储了机器上的所有内容。计算机还使用其他可移动辅助内存，如 CD-ROM、磁带和最近的闪存驱动器，将数据永久备份到硬盘上或将数据从一台机器传输到另一台机器。可以通过描述简单个人计算机 (PC) 的主要单元及其互连来更实际地描述数字计算机。如果打开 PC 的 CPU 机柜，您会注意到它包含一个印刷电路板，上面插有许多设备。该印刷电路板通常称为主板。计算机的所有其他主要组件要么直接插入主板，要么通过一束电线连接。CPU、RAM 和设备卡插入主板的各个插槽。连接到 CPU 机柜的硬盘、软盘驱动器、CDROM 驱动器等设备通过电线带连接。主板具有印刷电路，可让所有这些组件相互通信。CPU 机柜还装有电源装置，为计算机系统的所有组件供电。在 CPU 机柜的后端，您可以注意到许多连接槽。这些插槽用于连接各种输入/输出设备，例如键盘、鼠标、打印机、扫描仪，到计算机。 2.2.2 计算机作为数据处理器 计算机的主要功能是根据特定程序处理输入数据以产生所需的输出。这就是为什么计算机通常被视为数据处理设备的原因。计算机的各个组件协同工作以
报告第181号报告 - Lownie的Cotton，Lownie的Hillend，Forfar
服务负责人的报告 - 计划与可持续增长1。摘要1.1本报告涉及计划申请号23/00393/FULM用于建造太阳能农场以及电池储能系统，地下电缆，变电站建筑物，新的访问和访问轨道，安全措施，相关的基础设施和工程，以及Lownie的棉花，Lownie，Lownie，Lownie的Lownie的景观和生物多样性增强。建议拒绝此申请。2。建议2.1建议出于本报告第10节中给出的原因拒绝申请。3。简介3.1寻求完整的计划许可，以建造30MW太阳能农场以及6MW电池储能系统，地下电缆，变电站建筑物，新的访问和访问轨道，安全措施，相关的基础设施和工程，以及景观和生物多样性增强，在Lownie的Lownie，Lownie of Lownie，Lownie of Forfar，Forfar。在附录1中提供了显示网站位置的计划。3.2应用网站（修订）延伸至大约50公顷（HA）（不包括电缆路线和电池存储区域），目前，土地正在农业使用中。该站点包括两个主要开发区域，该区域被确定为田间B，在一个住宅西部的U518 Lownie Moor公共路的南部约为6公顷，该区域被确定为Kyleakin，而田野C位于B9128公共路和C51 Public Road的东部和北部公共路的东部和北部的C51公共路的东部和田野C北部，该路面是山上山之间的山顶。太阳能电池板将占据大部分B。这两个地区附近都有住宅物业。3.3该地点包括用于安装地下电缆路线和电池储能系统（BESS）的土地。地下电缆路线将从太阳能电池板向西延伸约3.3公里，直到向北转向Kingsmuir（Dunnichen Road 21号）。随后，电缆路线将穿过从南部小屋的废弃铁路路堤的东侧，连接到A932 Public Road以北的Cunning Hill的混凝土砌块制造工厂。拟议的贝丝将位于A932以南约275m的Auchterforfar Quarry的小型化合物中。3.4拟议的开发将包括一排在东轴上放置的太阳能电池板，在行之间有560万个间隙。面板将是双种族静态结构，在25度的角度为25度，最大高度为3m。高程显示在直接插入地面上的钢框架上形成的太阳能电池板，并在压载桌子上（凸起的基础）。园林绿化计划表明将沿着北部进行新的树篱种植
无人机改编和对传感器设备的配置，用于实时数字水质测试应用
本报告描述了一个综合水质测试平台的开发，该平台将通过新的Droneport系统技术扩展约翰内斯堡大学（UJ）移动实验室系统。该系统可以为与水质测试方案相关的任务提供各种应用程序，用于评估水中的细菌，化学，金属和其他内容，并扩大其与安全和资源管理监视，映射以及其他定义的空中成像范围有关的任务范围。移动实验室系统提供了多种测试/分析设备和消耗品，以进行现场远程水质测试和分析。嵌入在拟议的移动实验室系统中的无人机技术支持无人机操作，用于使用直接插入水源的测试探针进行数字化测试。无人机操作还将被电容以进行水资源管理范围内定义的所有与摄影测量相关的操作。还将通过绞车安装的通用录音机，实验室对私人云的实验室进行电容，在无人机和实验室之间进行记录，向上/下载数据。UJ参与WRC赞助的无人机适应和对现场的传感器设备的配置，实时数字水质测试应用程序提供了一个渠道，可以在其中实现其目标，以创建集成水质测试平台。这个WRC赞助的项目的标题还简洁地捕获了UJ操作范围。还对适应或安装的绞车系统进行了无人机（UAV）进行研究。另一个严重的动机和考虑是，被驾驶的最前沿和创新技术涉及生物纳米传感器和无人机平台启动的数字探针。The success of the pilot study is contingent on integration of the Stellenbosch University (SUN) digital bacterial probe to Drobotics drone-adapted launch platform configured to relay probe binary data received in real-time from water surface-deployed probes to universal recorders installed and integrated onto the launch platform, further configured to relay data via radio communication in real-time to a command-and-control unit installed in an UJ Mobile Laboratory.进行了与无人机在水资源管理过程中的各种应用中有关的广泛研究和研究。几乎没有与无人机在部署数字探针部署中有关的信息，也没有与使用吊索或绞车/提升系统的启动有关的信息。从无人机平台上唯一记录的数字探针启动涉及无人机下方的多个附加探针，该探针被配置为浮选平台。记录的吊索使用是用于在水收集中发射抽水机以及Sonar Beam设备的部署。因此，操作的范围提出了一个假设，即吊索和/或绞车/提升系统应最适合作为探测水质测试过程中的水源的启动平台。有许多可用的现成无人机调整的绞车/提升机系统，但是，几乎所有配置都以各种配置设计用于从点到点运输包裹/包装。范围需要在运输/启动探针时采用更集成的方法，因为它需要发布/部署，稳定的悬停能力和提升，并涵盖接收和记录的实时数据。在考虑了使用无人机平台进行水资源管理的多个案例研究之后，它决心设计和构建我们自己的集成无人机适应的绞车系统，而不是获取和重新配置通用的现成系统。Drobotics Winch/Hooist系统的设计和配置为启动数字水质测试探针。
在哺乳动物干细胞中利用通用供体进行高效、快速的荧光蛋白敲入
摘要 荧光蛋白 (FP) 标记是细胞生物学的基础方法，因为它可以观察活细胞中的蛋白质分布、动态和与其他蛋白质的相互作用。然而，使用标记蛋白过表达的典型方法可能会扰乱细胞行为并引入定位伪影。为了保持天然表达，可以将荧光蛋白直接插入内源基因中。这种方法在酵母中已经是标准做法几十年了，最近随着 CRISPR/Cas9 的出现，在无脊椎动物模型生物中也成为标准做法。然而，由于同源定向修复 (HDR) 效率低下，内源荧光蛋白标记尚未在哺乳动物细胞中广泛使用。在这里，我们描述了一种简化的方法，用于通过小鼠胚胎干细胞中的非同源末端连接 (NHEJ) 将 FP 标签高效快速地整合到天然基因座中。我们的方案最大限度地减少了使用通用供体的克隆，允许对内源蛋白进行 N 端或 C 端标记，并且从转染到成像只需不到 2 周的时间，从而提高了 FP 敲入在哺乳动物细胞中的适用性。简介荧光蛋白（FP）敲入能够实现内源性标记，从而实现蛋白质可视化，而不会产生过表达伪影1。敲入策略可以让研究人员准确观察和测量活细胞中蛋白质表达、定位和相互作用的动态。自20世纪90年代以来，FP敲入一直是酵母中的标准做法，因为这种生物可以通过同源重组有效地整合FP供体2,3。最近，由于CRISPR/Cas9技术的出现10，FP敲入已在秀丽隐杆线虫4-7和果蝇8,9中得到广泛采用。当由单向导RNA（sgRNA）编程时，Cas9会引入靶向的DNA双链断裂（DSB），细胞可以通过同源定向修复（HDR）或非同源末端连接（NHEJ）11进行修复。HDR因其高保真度而受到青睐12-15。然而，HDR 仅在某些细胞周期阶段 16 活跃，并且需要与靶标匹配的同源臂。因此，基于 HDR 的标记效率要低得多 17,18，并且需要在哺乳动物细胞中费力地克隆。为了规避这些限制，最近已引入 NHEJ 来在哺乳动物细胞中进行 FP 敲入 18–26 。一种名为 CRISPR 辅助插入标记 (CRISPaint) 22 的方法特别精简，因为它使用通用供体质粒，因此唯一需要的克隆是构建基因特异性 sgRNA。供体质粒通过转染引入细胞，与靶基因并行被 Cas9 切割，并通过 NHEJ 以非序列特异性的方式整合到靶基因中。为了允许使用任何基因特异性 sgRNA 同时保持正确的阅读框架，CRISPaint 使用通用的“框架选择器”在三种可能的阅读框架之一中切割通用供体 22 。尽管有这些优势，到目前为止，CRISPaint 仅在少数细胞系中进行了测试。此外，目前形式的 CRISPaint 系统仅可进行 C 端插入，这限制了其应用于蛋白质产物可耐受 C 端标记的基因。在这里，我们描述了一种基于 CRISPaint 的改进方法，该方法可在哺乳动物细胞中灵活、快速地在基因的任一端进行 FP 标记。我们的方法高效，需要的克隆最少，并且可以产生在天然调控元件的控制下表达的功能性内源性标记蛋白。我们在小鼠胚胎干细胞 (mESC) 中测试并优化了这种方法。我们在第一次尝试中成功标记了 5/5 个目标，从转染到成像的时间只有 2 周。此外，我们还构建了一组用于多色标记的质粒。总之，这些进展将促进 mESC 和其他哺乳动物细胞中的细胞生物学研究，并可能提供更快、更简单的快速创建敲入小鼠的途径。