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通过供体的体内 - 线性化和DNA聚合酶θ/DNA-PK的瞬时抑制，在小鼠胚胎干细胞中有效双重敲门
（未通过同行评审认证）是作者/资助者。保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。此预印本版的版权持有人于2021年5月30日发布。 https://doi.org/10.1101/2021.05.30.446338 doi：Biorxiv Preprint
一种高效的农杆菌介导方法，用于多种植物的瞬时基因表达和功能研究
尽管稳定转化技术的应用使人们对于基因功能有了更深入的了解，但将其应用在高通量研究中仍然十分困难。农杆菌浸润法已经被广泛应用于本氏烟等物种中，用于快速检测基因表达和蛋白质相互作用分析，但该技术在其他植物物种中效果并不理想，包括拟南芥。由于目前在模式植物拟南芥中缺乏高效的高通量瞬时表达系统，我们开发了一种高效、可重复、适用于在拟南芥和其他 7 种植物中瞬时表达多种功能蛋白的方法，包括甘蓝、风疹菜、盐芥、盐芥、马铃薯、辣椒和本氏烟。该方法的有效性已在三个独立的研究机构中得到独立验证，表明该技术的稳健性。此外，除了展示该技术在一系列物种中的实用性之外，我们还介绍了一个案例研究，采用该方法评估拟南芥蔗糖生物合成途径中的蛋白质-蛋白质相互作用。
在重复SARS-COV-2 BNT162B2 mRNA疫苗接种后，与适应性免疫相关的快速瞬时和持久的先天因子变化
细胞因子和趋化因子在响应感染和疫苗接种时塑造先天和适应性免疫方面起着重要作用。解剖早期先天疫苗的特征可能可以预测免疫原性，以帮助优化mRNA和其他疫苗策略的效率。在黄热病，HIV-DADE5，HIV ALVAC，EBOLA RVSV-ZEBOV和三价插入（TIV）疫苗接种（1-7）之后（1-7），几项研究早在黄热病，HIV-ADE5，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，，进行了一些研究（Div>）。 了解COVID-19-BNT162B2 mRNA的影响（P-Files/Biontech）（8）疫苗对先天和训练的免疫反应[（9）中的综述]具有极大的兴趣，并有助于调节适应性免疫。 我们和其他人使用系统血清学（10，11），多膜方法和基于流量的测定法（12-14）的BNT162B2 mRNA疫苗接种后的早期作用（12-14）。 系统的血清学鉴定的免疫学参数可预测COVID-19 Incotection-Ne自愿者中BNT162B2 mRNA疫苗的有益反应（10），COVID-19，康复患者（10）和患有血液学恶性肿瘤的跨性别患者（11）。 我们确定了一个系统性签名，可在1 st 之后24小时检测到几项研究早在黄热病，HIV-ADE5，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，HIV-ALVAC，，进行了一些研究（Div>）。了解COVID-19-BNT162B2 mRNA的影响（P-Files/Biontech）（8）疫苗对先天和训练的免疫反应[（9）中的综述]具有极大的兴趣，并有助于调节适应性免疫。我们和其他人使用系统血清学（10，11），多膜方法和基于流量的测定法（12-14）的BNT162B2 mRNA疫苗接种后的早期作用（12-14）。系统的血清学鉴定的免疫学参数可预测COVID-19 Incotection-Ne自愿者中BNT162B2 mRNA疫苗的有益反应（10），COVID-19，康复患者（10）和患有血液学恶性肿瘤的跨性别患者（11）。我们确定了一个系统性签名，可在1 st
铜绿假单胞菌中的CRISPR-CAS提供瞬时人群水平的免疫力，以防止高噬菌体暴露
原核生物适应性免疫系统，CRISPR-CAS（群集定期间隔短的短滴虫重复序列；与CRISPR相关），需要靶向靶向入侵移动遗传元件（例如噬菌体）的间隔序列。先前的工作已经确定了驱动模型有机体基于CRISPR的免疫的进化的生态变量，铜绿假单胞菌PA14针对其噬菌体DMS3VIR，导致快速噬菌体灭绝。但是，尚不清楚这种获得的免疫力在细菌种群中是否以及如何稳定，以及这如何取决于环境。在这里，我们检查了30天的演化实验中CRISPR间隔者获取和损失的动态，并确定条件使免疫力长期维持之间的平衡与支持噬菌体持久性的替代抵抗策略之间的平衡。具体来说，我们发现初始噬菌体剂量和再感染频率都决定了是否长期保持获得的CRISPR免疫，并且噬菌体是否可以与细菌共存。在人口遗传学水平上，出现和CRISPR免疫的丧失与高水平的间隔多样性有关，随后由于携带菌毛相关突变的细菌的侵袭而下降。在一起，这些结果提供了CRISPR免疫获取和损失动态的高分辨率，并证明累积噬菌体负担决定了CRISPR对生态相关时间表的有效性。
表观基因组编辑器的瞬时递送可稳定抑制非人类灵长类动物中的 PCSK9 并降低 LDL 胆固醇
Jennifer Kwon、Alec Knapp、Andrew Hill、Kristen Browoleit、Sai An、Stuart Sundsdeth、Tyler Goodwin、Michael Hefferan、Kendra Congdon、Charles Gersbach、Blythe Sather
新一代 4D-Nucleofector® 平台
- 对人类原代细胞进行体外改造，用于细胞治疗应用（例如基因组编辑、CAR-T 细胞的生成） - 瞬时生产潜在的治疗性蛋白质或抗体，用于构建体筛选 - 生成大量瞬时改造的原代细胞，用于基于细胞的检测
瞬时流向有限的 - 拉迪乌斯井，并在孔隙弹性的含水层中具有井眼的存储和皮肤效应
本文提出了分析解决方案，用于从孔隙弹性的含水层中抽水，其中充分合并了有限厚度的皮肤区域和井眼存储的合并效果。在拉普拉斯变换域中得出了泵浦引起的轴对称应力，平面应变变形和孔隙压力。使用Stehfest反转算法获得时域溶液。的数值示例，以研究水力降低的水力耦合和毛弹性的影响。结果表明，与使用完全耦合的毛弹性理论预测的缩减相比，传统方法在低渗透性硬岩中井井有条中的下降良好。当存在有限的厚度阳性皮肤的渗透性低于地层的渗透性时，差异会变得更加明显。对于用储存的有限拉迪乌斯抽水井，与井眼存储相关的效果掩盖了毛线弹性的影响。
Singh，A。和Tiwari，V。K.（2023）。人前额叶皮层发育过程中瞬时细胞状态的转录网络。分子的边界
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植物生物技术 40(3): 211-218 (2023)
摘要 基因组编辑对于作物改良非常有用。利用农杆菌中的瞬时表达系统表达基因组编辑酶的方法，称为农杆菌诱变，是基因组编辑技术中用于改良包括马铃薯在内的无性繁殖作物优良品种的一种捷径。然而，用这种方法不能选择经过编辑的个体。再生促进基因的瞬时表达可以导致幼苗再生出芽，而大多数再生促进基因的组成性表达不会导致正常再生的芽。在这里，我们报告我们可以通过正向选择获得基因组编辑的马铃薯。这些再生芽是通过将再生促进基因与基因组编辑酶基因的瞬时表达相结合的方法获得的。此外，我们证实，用这种方法获得的基因组编辑马铃薯不含有农杆菌中使用的二元载体的序列。我们的数据已提交给日本监管机构文部科学省 (MEXT)，我们正在对这些马铃薯进行田间试验以进一步研究。我们的工作为通过再生促进基因的瞬时表达来再生和获取基因组编辑作物提供了一种强有力的方法。
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