1 尼日利亚伊洛林大学动物学系(寄生虫学)。2 尼日利亚奥逊州立大学社区医学系。3 尼日利亚阿贝奥库塔联邦医疗中心内科系。4 尼日利亚伊巴丹大学兽医公共卫生系。5 尼日利亚拉各斯大学医学院。6 尼日利亚艾滋病医疗基金会治疗服务部。7 尼日利亚伊图库-奥扎拉尼日利亚大学教学医院医学院。8 尼日利亚恩杜富-阿利克亚历克斯·埃克韦梅联邦大学微生物学系。通讯作者电子邮件:lawalmaryam167@gmail.com * DOI:http://doi.org/10.38177/AJBSR.2024.6402 版权所有 © 2024 Lawal Oyebimpe M. 等人。这是一篇根据知识共享署名许可条款分发的开放获取文章,允许在任何媒体中不受限制地使用、分发和复制,但必须注明原作者和出处。文章收稿日期:2024 年 8 月 9 日文章接受日期:2024 年 10 月 21 日文章发表日期:2024 年 10 月 25 日
摘要:开发了一种采用 Percoll™ 梯度离心法从大西洋鲑 Salmo salar 的体肌组织中纯化 Kudoa thyrsites 孢子的方法。然后用高度纯化的孢子免疫近交系 BALB/c 小鼠,以衍生分泌 Kudoa 特异性单克隆抗体 (mAb) 的杂交瘤。通过免疫荧光显微镜和流式细胞术对 mAb 进行分析表明,几种 mAb 对 K. thyrsites 孢子表面的抗原具有特异性,而其他 mAb 与 K. thyrsites、K. paniformis 和 K. crumena 孢子的极性荚膜或极性细丝发生反应。使用表面结合 mAb 对孢子裂解物进行免疫印迹,结果显示 46 至 >220 kDa 的宽条带,而针对极性荚膜和极性细丝抗原的特异性 mAb 检测到不同分子量的更清晰条带,具体取决于 Kudoa 物种。K. thyrsites 孢子表面抗原的主要表位被证明是碳水化合物,这是由其对无水三氟甲烷磺酸处理的敏感性和对蛋白酶 K 处理的抗性决定的。使用 K. thyrsites 特异性 mAb 对分离的、完整的、透化的疟原虫和含有疟原虫的体细胞肌肉组织薄切片进行免疫荧光显微镜检查,发现在产生孢子的疟原虫和受感染的大西洋鲑鱼肉中都有孢子的强烈标记。通过免疫印迹法检测到的孢子只有 100 个,表明这些 mAb 具有用于开发基于现场的诊断测试的潜力。