目的:我们在这里报告了接受尿中黑色素瘤(UM)肝转移切除术(NCT02849145)的患者中循环肿瘤DNA(CTDNA)检测的前瞻性研究结果。背景:在UM患者中,肝脏是最常见的,通常是转移的部位。肝转移的局部治疗,例如手术切除,可能对选定的患者有益。方法:入学后,有资格接受肝手术的转移性UM患者的血浆样本在手术前后收集。GNAQ / GNA11突变在存档的肿瘤组织中鉴定出来,用于通过液滴数字聚合酶链反应来量化CtDNA,然后与患者的手术结果相关。结果:包括四十七名患者。肝手术与无细胞循环DNA水平的主要增加有关,手术后2天(约20倍)峰值。在40名可评估患者中,14例(35%)在手术前可检测到CTDNA,中位等位基因频率为1.1%。这些患者经历了统计上短的无复发生存
引言:规范/引力对偶背景下的一个核心问题是理解体经典几何是如何编码在边界态的纠缠结构中的,人们希望通过研究冯·诺依曼熵在这种环境下特有的性质来提取有关这种编码的有用信息。互信息一夫一妻制 (MMI) 的发现 [4,5] 表明,对于几何状态,即与经典几何对偶的全息共形场论 (CFT) 的状态,Hubeny-Rangamani-Ryu-Takayanagi 处方 [6,7] 意味着边界 CFT 中空间子系统的熵满足一般不适用于任意量子系统的约束。此后,人们发现了新的全息熵不等式,全息熵锥 (HEC) [8] 得到了广泛的研究 [9 – 20] 。随着参与方数量 N 的增加,寻找新的不等式很快变得在计算上不可行
酪蛋白酶水解剂(锥虫),I型使用锥虫类型I类型I用于制备各种培养基,例如无菌测试培养基,诊断媒体和培养基以进行生化特征。摘要和原理胰酮是通过酪蛋白的酶水解获得的。酪蛋白是主要的牛奶蛋白,也是氨基氮的丰富来源。胰酮I型用于支持挑剔的微生物的生长,也适用于发酵研究。存储和稳定存储在紧密闭合的容器中脱水的介质脱水。避免冷冻和过热。在标签上到期日之前使用。打开后,保持粉末状培养基闭合以避免补水。注意:可应要求提供TSE/BSE证书。指示指的是要制备的介质公式中的最终浓度。质量控制测试规格外观浅黄色 /淡黄色棕色粉末。完全溶于水中的溶解度。颜色和清晰度为1%w/v浅黄色,透明溶液。在高压灭菌的15 psi / 15分钟pH值6.12 - 7.02的灰分含量不超过12%的灰分损失(水分含量)不超过5%α-氨基氮含量不超过12%没有金黄色葡萄球菌没有文化反应:细菌在30°C-35°C下孵育18-24小时后观察到的文化特征,在20°C-25°C生物体(ATCC)生长葡萄球菌(6538)良好的ESCHERICHIA(6538)良好的葡萄球菌(873)中真菌的真菌为2-5天。 (9027)良好的链球菌(19615)良好的白色念珠菌(10231)良好的巴西曲霉(16404)好
*通信。M.A.Chiurillo,辛辛那提大学生物科学系,辛辛那提,俄亥俄州45221-006,美国。电话号码:(+1)513-556-9758传真号码:(+1)513-556-5299电子邮件:chiurima@ucmail.uc.uc.uc.uc.uc.uc.edu N. Lander,辛辛那提大学,辛辛那提大学的生物科学系,辛辛那提大学,俄亥俄州俄亥俄州4522221-11-纽约州。电话号码:(+1)513-556-9798传真号码:(+1)513-556-5299电子邮件:landernm@ucmail.uc.uc.uc.edu
日本东京都千代田区神田绀屋町8 NCO神田绀屋町7F ー9 上海上海市闵行区紫秀路100 号(虹桥·总部1 号) 2 号楼1 楼A 室Tel : + 86 21 5956 8315
简介:紫皮蛋白是一种由各种细菌产生的双座,众所周知,可以显示出广泛的药物特性。不幸的是,天然紫饼蛋白生产商的生产力低,导致了不一致的紫cile蛋白供应,从而限制了其作为未来治疗剂的应用。异源表达系统,例如大肠杆菌和Pichia Pastoris,提供了一种产生这些高价值的次级代谢物的替代方法。这项工作描述了大肠杆菌中紫质蛋白异源生产的遗传体系的发展。方法:紫c。violaceum,mth01的生产者是从马来西亚马来西亚大学的林理学基础上分离出来的。使用基因特异性底漆,整个7.3 Kb紫out基因簇从C. volaceum mth01 DNA成功扩增,克隆到PUC19矢量(PVIO19)中,然后分别为PET-3A和PET-3A和PET-11B,分为PVIO3A和PVIO3A和PVIO11B,分别为PET-3A和PET-11B。为异源表达,优化了碳源,温度,诱导剂(IPTG)和L-色氨酸的参数。使用TLC和FTIR分析了从紫色的大肠杆菌转化体中提取的violacein。结果:几天后,含有PVIO3A或PVIO11B的大肠杆菌转化体开发了紫色菌落,表明紫co菌菌素在大肠杆菌中成功表达。TLC分析显示,RF值可与脱氧维奥莱辛(紫氧化紫葡萄丝(Deoxyviolacein)(一种中介代谢物)中的脱氧葡萄蛋白相媲美,而FTIR光谱揭示了胺和羰基的存在,这两个都是吲哚的特征。结论:此处描述的大肠杆菌异源系统可以利用葡萄糖或甘油作为碳源。将L-色氨酸添加到生长培养基中对于成功表达紫col途径是必要的。
杰斐逊数字共享将这篇文章带给您免费和开放访问。Jefferson Digital Commons是Thomas Jefferson大学教学中心(CTL)的服务。Commons是杰斐逊书籍和期刊的展示,经过同行评审的学术出版物,大学档案馆的独特历史收藏以及教学工具。Jefferson Digital Commons允许研究人员和感兴趣的读者在世界任何地方学习并与Jefferson奖学金保持最新状态。本文已被杰斐逊数字共享的授权管理员所接受,以纳入药理学,生理学和癌症生物学教师论文。有关更多信息,请联系:jeffersondigitalcommons@jefferson.edu。
摘要:这项研究旨在确定在室温和真空包装下添加超声的椰子贝壳液体烟雾在北京鸭干的效果。地鸭干由浸泡在椰子壳液体烟雾(CSL)中的紫鸭肉(Anas Platyrhynchos fimderus)制成,该烟雾(CSL)被超声处理20分钟,并用大蒜,galangal,galangal,coriander,coriander,coriander,tamarind,tamarind,盐,盐和椰子糖调味。使用完全随机的设计(CRD)进行了实验室实验(对照:0天存储期,T1:7天,T2:14天,T3:21天,T4:28天)和4个复制。结果表明,添加超声的CSL对北皮地面鸭的保质期有所不同,对pH,质地,颜色L,a*,a*,a*,a*,a,aw,水含量,水含量,脂肪,脂肪,碳水化合物,硫代巴比妥酸(tba)和iodine数字具有显着影响(p <0.01)。对灰分含量具有显着影响(p <0.05),对水的容量(WHC),蛋白质含量和有机摄影的质量没有显着影响。可以得出结论,在室温下储存地鸭干14天,真空包装并未显示出对pH,水活动,水含量,脂肪,蛋白质,蛋白质,TBA和碘的损害,并且没有发生疾病。
目的蛋白质经常用融合标签来表达,以方便实验分析。在通常为二倍体的锥虫中,标签编码 DNA 片段通常与一个天然等位基因融合。然而,由于重组细胞在转染后占群体的 0.1% 以下,这些 DNA 片段还包含一个标记盒用于正向选择。因此,天然 mRNA 非翻译区 (UTR) 被替换,可能会扰乱基因表达;在锥虫中,UTR 通常会在广泛和组成性多顺反子转录的背景下影响基因表达。我们试图开发一种标记策略,以保留血流形式非洲锥虫的天然 UTR,在这里我们描述了一种基于 CRISPR/Cas9 的敲入方法来驱动精确和无标记的必需基因标记。使用简单的标签编码扩增子,我们标记了四种蛋白质:组蛋白乙酰转移酶,HAT2;组蛋白去乙酰化酶,HDAC3;切割和多聚腺苷酸化特异性因子 CPSF3;以及变体表面糖蛋白排除因子 VEX2。该方法保留了天然 UTR,并产生了表达功能性重组蛋白的克隆菌株,通常两个等位基因都被标记。我们展示了基于免疫荧光的定位和富集蛋白质复合物的实用性;在本例中是 GFP HAT2 或 GFP HDAC3 复合物。这种精确标记方法有助于组装表达必需重组基因的菌株,同时保留其天然 UTR。
在最近引入 CRISPR/Cas9 技术进行基因敲除、基因敲入、基因补充和内源基因标记之前,很少有基因工具可用于研究克氏锥虫。核糖开关是天然存在的自裂解 RNA(核酶),可被配体激活。我们实验室最近的研究结果证明了枯草芽孢杆菌中的 glmS 核酶可用于布氏锥虫的基因沉默,该核酶已被证明可控制响应外源葡萄糖胺的报告基因表达。在这项工作中,我们使用 CRISPR/Cas9 系统用活性(glmS)或非活性(M9)核酶对克氏锥虫糖蛋白 72(TcGP72)和液泡质子焦磷酸酶(TcVP1)进行内源性标记。通过 PCR 确认基因标记,并通过蛋白质印迹分析验证蛋白质下调。通过免疫荧光分析和体外生长定量进行进一步的表型表征。我们的结果表明,该方法成功地抑制了两种基因的表达,而无需培养基中的葡萄糖胺,这表明克氏锥虫在正常生长条件下产生足够水平的内源性葡萄糖胺 6-磷酸来刺激 glmS 核酶活性。该方法可用于敲除克氏锥虫中的必需基因并验证这种寄生虫中的潜在药物靶点。
