1 日内瓦大学医院外科系细胞分离与移植中心、日内瓦大学外科系组织工程与器官再生实验室、瑞士日内瓦、2 意大利米兰圣拉斐尔健康大学糖尿病研究所、3 荷兰莱顿莱顿大学医学中心内科系、4 瑞典隆德大学临床科学系、5 瑞典隆德大学隆德干细胞中心、6 瑞典隆德大学瓦伦堡分子医学中心、7 瑞典隆德斯科讷大学医院心胸外科与移植系、8 挪威奥斯陆大学基础医学研究所混合技术中心卓越中心、9 英国纽卡斯尔纽卡斯尔大学转化与临床研究所再生医学、干细胞与移植主题、10 组织银行里昂市民临终关怀医院和细胞,法国里昂 Edouard Herriot 医院,11 牛津胰岛移植联盟,牛津糖尿病、内分泌和代谢中心 (OCDEM),牛津大学丘吉尔医院,英国牛津,12 迪肯大学医学院,健康学院,澳大利亚维多利亚州 Waurn Ponds,13 瑞典议会,瑞典斯德哥尔摩,14 欧洲器官移植协会,荷兰阿姆斯特丹,15 博洛尼亚大学 Sant Orsola 综合医院 (IRCCS) 里昂大学国际传染病研究中心 (CIRI),法国里昂大学,INSERM,U1111,克劳德大学Bernard Lyon 1, CNRS, UMR5308, 里昂高等师范学院, 里昂, 法国
图2杀死CHO-K1细胞的摇瓶中的曲线,抗生素尿霉素的浓度不同。实验总共进行了四个重复。每隔第二天(用黑色箭头表示)通过离心和在新鲜培养基中与补充纯嘌呤霉素重悬于细胞分离中。(a)描绘的是由Kuhner Tom设备确定的氧转移速率(OTR)。为了清楚起见,随着时间的推移,每个第十二个测量点都被标记为符号。在从数据中删除了由于温度适应引起的每个介质交换后,OTR数据中的单个Outliner。有关原始数据,请参阅图S2A。两个在线监视的生物学重复用实线和填充符号或虚线和开放符号表示。(b)离线培养了另外两种生物学重复。离线分析的生物学重复被描述为固体和填充的符号或虚线和开放符号。通过离线摇瓶通过Neubauer室法在每个培养基交换处确定可行的细胞密度(VCD)。(c)可行性是从相同样品中计算出来的。在Kuhner Tom设备中进行培养。培养条件:100 ml玻璃瓶,温度(T)= 36.5 C,摇动频率(n)= 140 rpm,摇动直径(D 0)= 50 mm,填充体积(V L)= 20 ml,5%CO 2,70%rel。哼。启动细胞密度:5 10 5细胞/mL。
摘要:尽管器官可用性有限和移植后并发症,但肾脏移植仍然是终末期肾脏疾病(ESKD)的最佳治疗方法。但是,正在开发创新的透析技术,例如便携式,可穿戴和可植入的生物人工肾脏系统,目的是解决这些问题并改善患者护理。理想的可植入装置可以结合生物反应器和血液超滤,以复制关键的本机细胞功能,以进行溶质重吸收,分泌和内分泌活性。今天,植入生物反应器对肾细胞疗法的可行性打开了基于硅纳米孔膜的完全植入的生物人工肾脏的挑战,以确保免疫学隔离,细胞活力以及维持血液底物的代谢活性的可能性。当前的技术不足以获得有效的人造生物反应器来达到生理血液净化,这需要一个更复杂的系统从血液中产生超滤,该血液可以通过细胞处理并作为尿液消除。生物反应器中的细胞数量,内分泌活性,免疫学细胞分离,溶质和液体分泌/吸收性,细胞活力,血液和超滤流量控制以及血栓形成性是基本问题,这些问题需要新技术,如今,这似乎是对植入植入的人工kidney的设计,这似乎是挑战的。本评论旨在在这个特定的肾脏替代疗法领域中分析艺术的状态,以突出当前的局限性和未来的技术发展,以创建能够使用可以复制所有本地肾脏功能的人造器官治疗ESKD的植入和可穿戴器官。
摘要:为了将转化的细胞与非转化细胞分离,抗生素可选标记基因通常用于遗传转化。获得转基因植物后,通常有必要从植物基因组中去除标记基因,以避免调节问题。但是,许多无标记的系统耗时且劳动力密集。同源性修复(HDR)是使用同源臂进行同源重组的过程,以实现DNA双链断裂(DSB)的精确修复。定期间隔间隔的短质体重复序列(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(CAS9)系统是一种强大的基因组编辑工具,可以有效地引起DSBS。在这里,我们分离了一个在茎,射击尖端和渗透性中高度表达的基因的水稻启动子(P SSI),并通过使用此P SSI驱动CRISPR/CAS9介导的HDR用于MarkerFree(PSSICHMF),从而确立了高耐高率序列 - 切除策略。在我们的研究中,在73.3%的T 0植物和T 1植物的83.2%中检测到PSSICHMF诱导的标记基因缺失。在T 1后代获得了高比例(55.6%)的纯合标记植物。重组GUS报告者ADAD分析及其对重组产物的测序显示由PSSICHMF方法介导的精确缺失和修复。总而言之,我们的CRISPR/CAS9介导的HDR自动拆卸方法提供了一种节省时间和有效的策略,用于从转基因植物中去除标记基因。
•使用SIMS 2000或同等软件对食品的感觉分析•细胞培养技术,培养基制剂,肿瘤细胞分离和分子生物学方法的经验。例如,维持用于临床前(体内和体外)实验中的哺乳动物和/或主要细胞系。•色谱经验:气相,微甲,薄层,离子,液体(UHPLC)分析食品或相关产品中的污染物,营养或功能成分。•质谱经验:诱导耦合的血浆质谱仪,串联质谱仪与气体色谱耦合(GC-MS/MS),Orbitrap或其他质谱仪与超高性能液体冰镇仪(LC-MS)耦合,以分析污染物,营养或功能相关的综合产品或相关组成部分。具有多个电离源的经验(例如,APPI,APCI,ESI,DESI)是一种资产。•振动光谱经验:共焦拉曼显微镜,更富含粉红色的红外显微镜和分光光度计,以分析食品中的污染物,营养或功能成分。•使用自动加压溶剂提取器(加速溶剂或超临界流体提取器),微波提取,超单子波波或溶剂溶剂溶液提取物,在食品或相关产品中提取污染物,养分或功能成分。•以前的经验开发了植物性食品或功能性食品,在食品或相关产品中保留营养或功能成分。•技术/手稿写作和分析方法开发技能。•能够与政府,学术和行业合作伙伴在团队背景下工作。•强大的生物信息学,代谢组学,化学计量学或统计技能。•评估食物生物活性或验证健康益处的细胞培养专业知识。•使用拉曼,FTIR和Orbitrap或其他高分辨率质谱仪的经验是一种资产。•对研究设计,研究方法和数据分析有深入的了解。•能够使用MS OF CE(Word,Excel,PowerPoint,Outlook,Outlook,Teams,SharePoint)。•英语发达的口头,书面和人际交往能力。
3伊拉克库法大学药学学院,伊拉克库法大学4护理学院,摘要:脱氧核糖核酸(DNA)带有遗传性代码,这些代码由细胞翻译而成,可以同步核糖核酸(RNA)和多肽(RNA)和多肽,这些核酸(RNA)和多肽可以产生和表演VITARE VILATE和PERRACE VITAR。 双螺旋结构是Watson和Crick提出的DNA的最多研究的模型。 DNA作为遗传物质起作用的能力可以在细胞分裂过程中存储和进行,以使该信息加倍并传输到传入的一代。 DNA结构中的任何损害是癌症和其他疾病进展的基本直接原因。 DNA损伤的因素可以归类为外源性和内源性因素。 在本文文章中,我们重点介绍了有关DNA的结构,功能和临床意义的证据支持的信息。 1。 引言DNA的发现可以追溯到1869年,当时一位名叫Friedrich Miescher的瑞士生物化学家正在研究其化学成分来源的白细胞。 他从干净的手术敷料中获得了这些白细胞。 尽管他在细胞的所有细胞器和结构中都是原始的,但他很快将其范围缩小到细胞核,因为在用酸治疗后,出现了他称为“核素”的沉淀物。 大多数分子生物科学学生都会在实验室中进行该实验的某种版本,在这些实验室中,它们将DNA与细胞分离。 DNA的优雅结构,从核苷酸到染色体,是使其充当遗传信息的载体的原因。3伊拉克库法大学药学学院,伊拉克库法大学4护理学院,摘要:脱氧核糖核酸(DNA)带有遗传性代码,这些代码由细胞翻译而成,可以同步核糖核酸(RNA)和多肽(RNA)和多肽,这些核酸(RNA)和多肽可以产生和表演VITARE VILATE和PERRACE VITAR。双螺旋结构是Watson和Crick提出的DNA的最多研究的模型。DNA作为遗传物质起作用的能力可以在细胞分裂过程中存储和进行,以使该信息加倍并传输到传入的一代。DNA结构中的任何损害是癌症和其他疾病进展的基本直接原因。DNA损伤的因素可以归类为外源性和内源性因素。在本文文章中,我们重点介绍了有关DNA的结构,功能和临床意义的证据支持的信息。1。引言DNA的发现可以追溯到1869年,当时一位名叫Friedrich Miescher的瑞士生物化学家正在研究其化学成分来源的白细胞。他从干净的手术敷料中获得了这些白细胞。尽管他在细胞的所有细胞器和结构中都是原始的,但他很快将其范围缩小到细胞核,因为在用酸治疗后,出现了他称为“核素”的沉淀物。大多数分子生物科学学生都会在实验室中进行该实验的某种版本,在这些实验室中,它们将DNA与细胞分离。DNA的优雅结构,从核苷酸到染色体,是使其充当遗传信息的载体的原因。其他研究人员后来进一步表征了“核素”,并将其更名为核酸,因为研究表明该核酸由嘌呤和嘧啶碱,糖和磷酸盐组成。核酸,包括确定四个碱基以及它们含有脱氧核糖核酸的发现 - 因此被称为脱氧核糖核酸(DNA)。发现形成DNA分子主链结构的含氮碱基是对:鸟嘌呤(g)的胞嘧啶(C)和与胸腺氨酸(T)相同量的腺苷(A)(Minchin&Lodge,2019)。但是这种复杂性并非一无所获。沃森(Watson)和克里克(Crick)在1953年的论文中揭示了两个关键方面,这些方面构成了这种美丽的设计:以互补的方式配对核苷酸碱基(与胺的腺嘌呤,胰鸟嘌呤的鸟嘌呤)和双螺旋(Watson&Crick,1953年)。结构DNA结构是众所周知的,许多几何参数被认为是它们的特征,这些参数包括:螺旋弯曲,凹槽宽度,骨干和糖苷扭转角,糖冰瓶,螺旋桨扭曲,螺旋桨扭曲,滚动,滚动,倾斜,倾斜度,螺旋式上升和旋转和扭曲(Sagenger,Sagenger,1984年)。如图(1)所示,脱氧核糖核酸是聚合分子。它是由识别为核苷酸的单体单元的重复而形成的。核苷酸由5-碳糖(脱氧核糖),氮基碱和一个或多个磷酸基团组成。但是,在通过这些充当构建基块的核苷酸形成的DNA中,将三个磷酸基团相互引入。(Lamprecht等,2015)。在此过程中丢失了两种磷酸盐;因此,最后,DNA链每个核苷酸具有一个磷酸基团。
出版的书籍和章节 航空航天 1. 燃烧基础,印度 Prentice Hall,2008 年,编辑书籍:A. K. Ghosh 和 D. P. Mishra 第 21 届全国航空航天工程师大会论文集,2007 年,D. P. Mishra。 生物科学与生物工程 2. 亲和细胞分离:基础、分析和制备方法。编辑:Ashok Kumar、Igor Yu Galaev 和 Bo Mattiasson;Springer-Verlag(德国海德堡)2007 年。 3. 智能聚合物在蛋白质亲和沉淀中的应用。在:智能聚合物:生产、研究和应用。在生物技术和生物医学中(Igor Yu. Galaev 和 Bo Mattiasson 编辑)。第二版 CRC Press,Taylor & Francis Group,美国博卡拉顿,第 402-436 页,2007 年,Kumar,A.、Galaev,I. Yu. 和 Mattiasson,B. 4.用于药物输送和基因转染的刺激响应性纳米粒子。在:颗粒药物输送手册(M. N. V. Ravi Kumar 编辑)。美国科学出版社,美国,2008 年,Kumar,A. 和 Jain,E. 5.使用金属螯合物进行蛋白质亲和沉淀。在:Zachariou,M.(编辑),亲和色谱法:方法和协议 - 分子生物学方法,The Humana Press Inc. Totawa,新泽西州,美国,2008 年,Kumar,A.、Galaev,I. Yu.和 Mattiasson, B. Chemical 6. 书籍章节(第 12 章)标题为使用多目标优化的阵列信息学:从基因表达到基因网络,载于《多目标优化:化学工程中的技术和应用》,即将由 World Scientific Co. Pv 出版
概要海洋哺乳动物在其进化枝中表现出一些最戏剧性的生理适应性,并提供了无与伦比的洞察力,以对相对较短的时间尺度上推动收敛进化的机制。这些适应中的一些,例如对缺氧的极端耐受性和长期的食物剥夺,在大多数限制性哺乳动物中并不常见,并且挑战了已经建立的供应和需求平衡的代谢原则。非靶向的OMICS研究开始揭示此类适应性的遗传基础,但是目前缺乏测试这些动物功能意义的工具。用原代细胞的细胞建模代表了阐明生理适应的分子病因的强大方法,这是在器官中加速基因组至酚类研究的关键步骤,其中不可能转传(例如,大型,较大的,长寿,长期,全面的,全面的,联邦,联邦保护的物种)。原代细胞中的基因扰动研究可以直接评估特定的突变,基因丢失或重复的赋予功能优势,例如海洋哺乳动物中的缺氧或胁迫耐受性。在这里,我们总结了原代细胞中的遗传和药理操纵方法如何在其他非传统哺乳动物物种中进行先进的机械研究,并强调了在海洋哺乳动物中进行此类研究的需求。我们还提供了在模仿体内态的条件下与海洋哺乳动物细胞分离,培养和进行实验的关键注意事项。我们提出,原代细胞培养是进行功能机理研究(例如基因敲低,过表达或编辑)的关键工具,可以提供对海洋哺乳动物生理适应的基因组和有机体水平之间缺失的联系。
背景:间质干细胞衍生的外泌体(MSC-EXO)具有治疗潜力。然而,尚未阐明MSC -EXO对H 2 O 2引起的损伤后人类原代黑素细胞生存和黑色素发生的影响。因此,我们研究了MSC -EXO对人类原发性黑色素细胞的H 2 O 2生存的影响及其在体外的增殖,凋亡,衰老和黑色素发生的影响。方法:通过顺序离心从人MSC制备MSC-EXO,并以透射电子显微镜,Western blot和纳米颗粒跟踪分析为特征。人类原发性黑色素细胞分离并用不同浓度的MSC-EXO处理,然后暴露于H 2 O 2。此外,通过CCK-8,流式细胞仪,Western Blot,L-DOPA染色,酪氨酸酶活性,酪氨酸酶活性和RT-QPCR测试了使用MSC-EXO预处理对黑素细胞增殖,凋亡,衰老和黑色素生成的影响。结果:使用较低剂量的MSC -EXO保护人类原代黑素细胞免受H 2 O 2触发的凋亡的预处理,而较高剂量的MSC -EXO的预处理增强了H 2 O 2 O 2诱导的黑色素细胞细胞的细胞凋亡。Compared with the untreated control, pretreatment with a lower dose (1 µg/mL) of MSC-Exo enhanced the proliferation of melanocytes, abrogated the H 2 O 2 -increased p53, p21, IL-1β, IL-6 and IL-8 expression and partially rescued the H 2 O 2 -decreased L-dopa staining reaction, tyrosinase activity, MITF and黑素细胞中的TRP1表达。MSC-EXO可能是白癜风的有前途的治疗策略。结论:我们的发现表明,使用低剂量的MSC -EXO治疗可以通过改善H 2 O 2诱导的黑素细胞的凋亡和黑素细胞衰老来促进人类原发性黑素细胞的增殖和黑色素发生。关键词:间充质干细胞衍生的外泌体,黑素细胞,凋亡,增殖,衰老
项目概述背景:胰岛素治疗是晚期2型糖尿病(T2DM)治疗的主要治疗方法,最近已证明由于患有心血管细胞和周围的血管性脂肪蛋白脂肪脂质脂肪脂肪脂肪症的胰岛素抵抗(IR),由于存在胰岛素耐药性(IR),在晚期动脉粥样硬化的患者中产生有害的心血管效应。在人血管壁和PVAT中激活失调的胰岛素信号传导,导致血管氧化应激增加,并激活促进性动脉粥样硬化过程。因此,在CVD的背景下,有未满足的需要更好地理解器官特异性,分子IR的发病机理,并开发新的胰岛素敏化策略,以利用胰岛素的全部治疗潜力。假设:我们假设:1)心血管硬化患者的心血管细胞的特征是分子IR,独立于全身性IR状态; 2)脂肪IR可能会受到肥胖,糖尿病和对数级炎症等全身参数的影响; 3)心血管胰岛素敏化可能会扭转胰岛素的直接有害作用,从而诱导心脏保护表型。目的:1)在人动脉粥样硬化的背景下,在心血管细胞[内皮细胞(ECS),血管平滑肌细胞(VSMC)和PVAT脂肪细胞]中表征胰岛素信号传导; 2)研究低度系统性和局部炎症,肥胖和糖尿病对心血管硬化患者心血管脂肪胰岛素信号传导的影响; 3)提出了人血管和PVAT中分子胰岛素信号传导的新调节剂,这些调节剂可以充当器官特异性心血管胰岛素敏化的靶标。实验性工作计划:该工作计划将建立在牛津群体,血管和脂肪(OXHVF)的牛津群体上,这是心脏手术患者最精致的同类群体之一:大型血管生物库(乳腺静脉 - 素食性动脉内部,素食静脉 - 静脉 - 静脉 - 静脉 - 静脉 - 脂肪),心肌和脂肪组织(At),含有时代(AT)(及其含量不同)周围,血管周围,皮下和臀肌)以及循环的生物标志物测量,整个基因组数据以及参与者的RNA测序组织数据(n> 1600)以及心脏CT图像。正在进行的组织收集(〜3-5例患者 /周),样品用于体内组织培养和心血管细胞分离,用于人类细胞培养实验。AIM 1:我们将询问ECS中胰岛素信号传导的细节,从晚期冠状动脉粥样硬化患者中分离出的VSMC(包括糖尿病患者和非糖尿病患者),以及用既定的动脉粥样硬化模拟方案培养的原代细胞。我们的特征将使用