引言嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法为治疗诸如血红蛋白病,免疫缺陷和各种形式的癌症等疾病提供了巨大的潜力。在这些疗法中,病毒载体是创建最终CAR-T产品的关键组成部分。病毒载体促进了感兴趣的基因的传递,这有助于T细胞识别癌细胞。慢病毒通常被选择为病毒载体,因为它在转导分裂和非分裂细胞及其既定的安全概况方面的有效性(Sinn等,2005)。使用LV进行了200多次正在进行的临床试验,用于体内细胞修饰或体内疗法,以及最近对几种EX Vivo LV疗法的FDA批准,正在发生病毒载体需求的主要激增(ClinicalTrialStrials.gov)。低慢病毒滴度生产从当前的细胞培养物中获得的生产需要大量生产量来满足需求,这意味着大规模的培养基制剂和产品存储以及长期而复杂的生物反应器种子火车和病毒制造过程。LV的不稳定性质也带来了挑战,在室温下半衰期为8-40小时,在37°C下为8 - 12小时,这可以进一步降低有效的滴度(Dautzenberg等,2021,Labisch等,2021,2021,以及Higashikawa和Chang and Chang,2001年)。解决这些大规模制造缺点的一种方法是加强LV生产过程。此外,TFDF灌注可以在72小时的时间内将LV连续收获到4°C的储存容器,以维持LV功能滴度(Labisch等,2021)。最近的出版物表明,使用切向流动深度过滤(TFDF)灌注技术用于LV制造可以提高工艺生产率并降低成本(Tran等,2022; Tona等,2023)。TFDF疗法的这种连续的轻柔收获特征LV灭活问题,该问题会对批处理模式下的LV产生产生负面影响。TFDF技术提供2 - 5 µm的孔径深度滤波器,以切向流量模式运行,以保留生物反应器中的细胞和细胞碎屑,同时可以连续收获废物代谢物和分泌的载体。
炎性症是在感测各种外源和内源性刺激的情况下形成的多蛋白平台,并触发了IL-1β和IL-18的释放以及凋亡细胞死亡。Intivogen提供了一系列细胞系,可研究NLRP1,NLRP3,NLRC4或caspase-4炎症体。可以使用荧光或在培养上清液中使用IL-1β和IL-18报告基细胞在原位监测这些炎症体的激活(请参阅第8页)。
污染源 支原体污染的可能来源有多种。近年来,人们对该问题的认识不断提高,这可能改变了各个来源的贡献。过去,牛血清等培养试剂一直是相当大的污染源。如今,大多数实验室更喜欢无支原体测试血清。实验室人员可能会将支原体引入培养物中,现在他们接受了培训,以避免在处理培养物时受到污染。然而,其他来源更难避免。任何添加到培养物中的物质都是相关的,例如病毒悬浮液、抗体溶液或培养基成分。来自原始组织分离物的支原体在报告病例中所占比例不到 1%。迄今为止最常见的来源是来自受感染培养物的交叉污染。实验室交换受感染的培养物,从而无意中传播支原体。PanReac AppliChem 为每个细胞培养实验室提供检测和治疗支原体的工具。对于显微镜检测,我们提供经过验证的荧光染料 DAPI(产品代码 A1001,包装尺寸从 10 毫克到 10 克)。
Horizon HAP1 细胞系在干冰上运输。虽然已采取预防措施防止 CO 2 在运输过程中进入小瓶,但建议在收到细胞后将其在液氮中储存两天或更长时间,以让任何 CO 2 消散。从液氮储存中取出小瓶时,将其置于室温下约 30 秒或更长时间,以使液氮从小瓶中消散。注意:处理储存在液氮中的小瓶时,务必佩戴防护眼镜和手套。
Josephine Abney Bill&Hazel Allin Anonymous George Ballentine Ford,Lincoln,Inc。Josephine Abney Bill&Hazel Allin Anonymous George Ballentine Ford,Lincoln,Inc。Believe in Me Foundation Bionano Genomics BlueCross BlueShield of South Carolina Foundation Countybank Foundation Ravenel & Elizabeth Curry Foundation Dianne Patricia Leary Fund The Duke Endowment The Duke Energy Foundation Robert & Martha Erwin First Citizens Foundation Foundation for a Greater Greenwood The Fullerton Foundation, Inc. Harold P. Hope III Dru Timmons James & Ennis James William A.&贝蒂·J·克劳伯信托基金会史蒂文和克莱尔·库尔·安迪·安迪和芭芭拉·马西米拉·约翰和诺玛·麦克拉汉尼Stevenson Chip&Lorraine Stockman Sonny&Kay Tuck Chris&Rebecca Twomey家庭基金会Don Wilson Ray L. Wilson Fund Frank&Cathy Witney
癌症研究中最重要的目标之一是了解肿瘤细胞的形成。与 2D 细胞培养相比,球体可以更准确地模拟实体肿瘤。它们有助于显示区分肿瘤细胞和健康细胞的生理变化。多细胞肿瘤球体模型可以更深入地了解肿瘤微环境,使研究人员能够直观地了解细胞间的相互作用、肿瘤细胞如何吸收营养以及如何增殖。以下是癌症球体非基质胶 3D 方案的示例,展示了包括接种、培养基交换、染色和成像在内的自动化工作流程。
图1 chiba chiba University Takemura博士提供的数据参考:使用低药物吸附和高氧渗透性的培养板检测药物诱导的肝损伤的新型体外筛查系统。药物代谢和药代动力学,52:100511,(2023)。
百合小牛山的微卵石自动传播,布拉德·斯威德隆德和Yoshiyuki Miwa I.简介112 II。大规模繁殖113 III的体外分化和生长的体外分化和生长。使用生物反应器技术从微卵石中的微卵形117 IV微繁殖中的微卵泡自动繁殖,在非微块状条件下123 V悬浮培养细胞中的微繁殖125 Vi 125 VI。Lium Micropropagation中的机器人技术125 VII。将百合微卵布移植到土壤128 VIII中的自动化过程。 在未来问题和透视图中为llium的理想化自动化微繁殖过程128参考129将百合微卵布移植到土壤128 VIII中的自动化过程。在未来问题和透视图中为llium的理想化自动化微繁殖过程128参考129
流感A(H1N1)PDM09细胞培养的1个候选疫苗病毒或重组疫苗抗原(S)用于开发和生产疫苗,用于在2023年南半球流感型流感季节中使用的疫苗,使用认证的细胞线(例如MDCK 33016 PF A,NIID-MDCK b)由WHO全球流感监测和响应系统(GISRS)的WHO合作中心(CCS)进行。WHO CCS还对细胞培养的候选疫苗病毒(CCCVV)进行抗原和遗传分析。除非另有说明,否则这些CCCVV已通过双向血凝抑制(HI)或病毒中和(VN)测试(VN)测试针对细胞培养的传播原型病毒与WHO建议2相匹配2。WHO CCS对这些CCCVV进行了其他测试(包括不定代理)。国家或区域控制当局通常批准每个国家使用的流感疫苗的制造,组成和制定3。制造商应就使用这些CCCVV进行流感疫苗生产的适用性咨询相关的国家或区域控制当局。