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World File Search System细胞培养
gibco-cell培养 - 培养书手册.pdf
手册和视频旨在作为细胞培养基础知识的介绍。手册的前四章关注细胞培养，涵盖了诸如熟悉专用于细胞培养实验的实验室要求，实验室安全，无菌技术和细胞培养的微生物污染的要求，以及提供传递，冻结和冻结和解冻培养的培养细胞的基本方法。手册的随后两章关注各种转染技术，并为选择适当的转染方法的一般指南提供了通用指南，用质粒DNA，寡核苷酸和RNA转染细胞，以及用于体外和体外和体内的培养物的培养物，并选择了反射的细胞。
评估三维神经母细胞瘤球体细胞培养模型中的RIST分子靶向方案
摘要：背景：高危神经母细胞瘤患者的结果仍然很差，并且迫切需要新的治疗策略。RIST方案代表了一种新型的计量和多模式治疗策略，用于将分子靶向药物作为“预处理”与常规化学疗法主链结合的高危神经细胞瘤，目前在II期临床试验中进行了评估。用于临床前药物测试，与mo-nolayer培养物相比，癌细胞的生长是球体的优势，因为它重现了广泛的肿瘤特征，包括三维结构和癌症干细胞（CSC）特性。这项研究的目的是建立一个神经母细胞瘤模型，以严格评估RIST治疗方案。方法：通过mRNA和蛋白质分析和球体生存能力通过基于发光的测定进行评估CSC标记表达。通过组织微阵列分析和患者数据挖掘评估RNA结合蛋白LA在神经母细胞瘤中的异常表达。结果：与单层培养物相比，球体培养物显示出较高的CSC样标记（CXCR4，Nanog和BMI）亚组的表达和更高的THR389磷酸化表达。球体靶向分子的“预处理”降低了肿瘤信号传导和CSC标记表达。结论：RIST治疗方案有效地降低了以晚期CSC特性为特征的神经母细胞瘤球体的活力。
电活性4D多孔支架基于导电聚合物作为反应迅速且动态的体外细胞培养平台
摘要：在体内，细胞居住在3D多孔和动态的微环境中。它提供了在生理和病理过程中调节细胞行为的生化和生物物理提示。在基本细胞生物学研究，组织工程和基于细胞的药物筛查系统的背景下，挑战是开发相关的体外模型，以整合细胞微环境的动态特性。利用有希望的高内相乳液模板，我们在这里设计了一个具有广泛互连的孔隙率的Polyhipe支架，并将其内部3D表面官能化，具有薄薄的电活性导电聚合物聚（3,4-乙基二乙烯二苯乙烯）（PEDOT）将其变成4D电子scappersive。所产生的支架与成纤维细胞，支持的细胞浸润和宿主细胞具有细胞相交，这些细胞显示出3D扩散的形态。它在富含离子和蛋白质的复杂培养基中表现出了强大的致动，并且其电子恢复活力并未通过成纤维细胞定殖改变。多亏了自定义的电化学刺激设置，在共聚焦显微镜下，Polyhipe/Pedot支架的机电响应在原位表征，并显示出10％可逆的体积变化。最后，在几个机电刺激的循环中，设置用于实时监测和原位成纤维细胞在Polyhipe/Pedot支架中培养的原位成纤维细胞。因此，我们证明了这种可调节支架的概念证明，作为未来4D细胞培养和机械生物学研究的工具。关键字：工程细胞微环境，4D支架，响应式细胞培养平台，Polyhipe，Pedot，电子导电聚合物，原位细胞刺激■简介
从头设计和开发富含细胞培养模型的体内肺灌注富含营养的灌注液
摘要：离体肺灌注（EVLP）通过在移植前评估“边缘”肺而增加了供体肺的利用。要将其作为供体肺部修复平台开发，需要长时间的EVLP，并且需要新的灌注液以提供足够的营养支持。人类肺微血管内皮细胞和上皮细胞用于测试不同的公式以获得基本的细胞功能。在EVLP细胞培养模型上进一步测试了选定的公式，并测量了细胞的效果，凋亡以及GSH和HSP70水平。将细胞培养基（DMEM）与当前的EVLP灌注液混合时，以剂量依赖性的方式将细胞增强的溶液，DMEM增强的细胞增强和迁移以及减少的凋亡。根据DMEM设计和测试了一种新的EVLP灌注液。最终公式包含5 g/L dextran-40和7％白蛋白，被称为D05D7A解决方案。与Steen溶液相比，它抑制了冷静态储存和温暖的再灌注诱导的细胞凋亡，改善的细胞增强性以及人类肺细胞中的GSH和HSP70水平。基于富含营养的EVLP灌注液可能是延长EVLP并支持供体肺修复，重新调节并进一步改善供体肺质量和数量的供体肺部修复的有前途的公式。
FOGS：用于打击野生动物贩运的 SNPSTR 标记数据库和用于迁地保护的细胞培养库
摘要 非法野生动物贸易是国际上日益严重的问题。偷猎动物不仅导致种群和物种灭绝，而且对生态系统和经济造成严重后果。本研究介绍了一种分子标记系统，当局可以使用它来检测和证实野生动物贩运。SNPSTR 标记将短串联重复序列与扩增子内的单核苷酸多态性相结合，以提高鉴别能力。在 FOGS（物种保护法医遗传学）项目中，我们为 74 种脊椎动物建立了 SNPSTR 标记集。平均而言，每组由 19 个 SNPSTR 标记组成，每组有 82 个 SNP。已识别出 1300 多个 SNPSTR 标记和 300 多个 STR 标记。此外，通过其生物库管道，FOGS 项目能够冷冻保存来自 91 种脊椎动物的体细胞以及来自另外 109 种物种的可行组织以供日后细胞起始，为未来的异地保护提供了策略。此外，还有更多濒危物种的固定组织和 DNA 样本被存入生物库。因此，FOGS 是一项跨学科研究，结合了分子野生动物法医和保护工具。SNPSTR 组和细胞培养信息可通过 FOGS 数据库 (https://fogs-portal.de/data) 访问，该数据库向全球科学家、研究人员、饲养员和当局开放，以保护野生动物免受非法贸易侵害。
原位监测揭示了人类多能干细胞培养的细胞环境不稳定性
哺乳动物细胞培养物是生物医学研究中的基石资源，但是已发表的实验的结果通常会遇到可重复性的挑战。这导致着眼于细胞培养条件对细胞反应的影响和实验发现的可重复性。在这里，我们频繁地对溶解的O 2和CO 2进行了光学传感器斑点和CO 2进行原位监测，并在三种广泛使用的人类体细胞和多能干细胞系的标准批次培养物中对细胞增殖和中pH的同时评估。我们整理了来自文献的数据，以证明标准细胞培养物始终表现出环境不稳定性，这表明这可能是影响实验发现的普遍问题。我们的结果表明，在标准批次培养期间，体外细胞培养物始终经历大量的环境参数。这些发现应促进进一步的努力，以增加实验结果与体内生理学的相关性并增强可重复性。
回顾复杂的体外细胞培养，强调流体流动的重要性，并通过器官芯片肝脏模型进行说明
人们普遍认为，制药行业需要一种更具生理相关性的体外模型，以更好地预测药物毒性和疗效。十多年前，一种被称为“芯片器官”（OOAC）的新技术的出现引起了极大的兴奋，因为人们相信 OOAC 可以满足这一需求。政府机构和风险投资的开发活动和投资激增。大多数开发 OOAC 的组织选择使用采用微加工技术制造的微流体设备，该技术在电子行业有着悠久的成功历史，因为它在微电子芯片中提供了更强的功能、更好的性能和经济效益。然而，生物系统中液体流动的物理原理与控制微电子电路中电子的物理原理非常不同。经过 10 年的紧张发展，值得研究 OOAC 技术的现状并评估需要什么才能实现预期的转变。令人失望的是，包括 OOAC 在内的先进体外方法至今仍无法减少使用动物进行药物安全性评估的次数。似乎至少有三个因素：i) 缺乏对医学研究中动物替代与药物开发中高通量筛选 (HTS) 需求之间相互冲突的市场需求的理解 ii) 开发更复杂模型（尤其是在使用微流体时）的技术困难 iii) 在行业采用任何新技术之前，需要有证据表明该技术对行业具有强大的经济优势。