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PARG 敲除 MDA-MB-231 细胞系
描述 PARG 敲除 MDA-MB-231 细胞系是一种 MDA-MB-231 细胞系，其中人类 PARG（聚 ADP-核糖糖水解酶）长同工酶（PARG111、PARG102 和 PARG99）已使用 CRISPR/Cas9 基因组编辑从基因上去除，慢病毒编码 CRISPR/Cas9 基因和针对人类 PARG 的 sgRNA（单向导 RNA）。该细胞系已通过基因组测序和蛋白质印迹分析验证。背景聚（ADP-核糖）糖水解酶 (PARG) 是一种分解代谢酶，参与 PARylated 链的降解，释放 ADP-核糖和寡（ADP-核糖）链。 PAR（聚 ADP 核糖基化）稳态由 PAR 聚合酶 (PARP) 家族和 PARG 调节，以响应细胞应激条件，例如 DNA 损伤反应 (DDR)。PARG 活性与炎症、缺血、中风和癌症中的细胞反应有关。PARG 在乳腺癌中过度表达，与肿瘤生长和存活有关。PARG 活性降低可以增强当前癌症疗法（例如化疗和放疗）的效果，使 PARG 选择性抑制剂抑制成为癌症和免疫疗法中一种有前途的方法。MDA-MB-231 是一种源自乳腺腺癌的上皮细胞系，具有突变的 p53。它是 ER（雌激素受体）、HER2 和 E-钙粘蛋白阴性，用作晚期乳腺癌的模型。应用
用姜黄素处理的肿瘤细胞系的生存力和肿瘤干细胞标记物的显着降低
羟基烷酰甲烷，姜黄素III）（3-5％）一起称为姜黄素（Anand等，2008）。此外，针对姜黄素的几种互变异物（包括酮和烯醇形式）得到了区分，姜黄素受pH和溶液或固态的极性变化的影响（Kawano等，2013）。许多科学研究都支持姜黄素的显着特性，包括抗微生物，抗carcino-genic，抗炎和抗氧化活性（Prasad等人，2014a; Shakibaei等，2014，2014，2007; Shakibaei等，2015）。姜黄素已通过广泛的实验室和临床实验（例如Shakibaei等人）作为抗癌剂良好。（2015）表明，姜黄素在体外增强了5-氟尿嘧啶对结直肠癌细胞系的抗肿瘤活性（Shakibaei等，2015）。癌症干细胞（CSC）具有自我更新，分化和其他干细胞特性的能力，被视为新兴的治疗靶标（Chen等，2013; Subramaniam et al。，2010）。已经发现，作为癌细胞的一小部分癌症干细胞在癌症的起始和进展中起着突出的作用，血管生成，血管生成，侵袭，转移，对癌症的治疗和复发性（Gerger等，2011; Klarmann et al。 Zhao等，2011）。最近，各种癌症干细胞生物标志物，例如CD44，CD133，ALDH1在几种类型的癌症中进行了广泛的研究（Buhrmann等，2014； Klonisch等，2008； Shakibaei等，2014）。在过去的十年中发表的大量研究支持了姜黄素的潜力及其修改形式，可以单独或与其他抗癌剂结合使用几种类型的癌细胞培养物中的CSC（Buhrmann等，2014; Li and Zhang and Zhang，2014; Shakibaei es; shakibaei等，2014）。Cur- curmin对CSC的影响可能与其直接或间接影响自我更新途径，肿瘤形成，肿瘤微环境，酶活性和细胞表面标记的能力有关（Buhrmann等，2014; Li and Zhang，li and Zhang，2014; Shakibaei; shakibaei等，2014）。在多种同工型中表达的CD44糖蛋白参与了许多与癌症所有阶段有关的细胞信号通路（Buhrmann等，2014； Williams等，2013）。因此，CD44已被作为预防癌症，检测，预后和筛查癌症干细胞对各种治疗模型的反应的参数（Blacking，2013; Negi等，2012）。糖蛋白CD133的表达与癌细胞中的干细胞样性质有关。的确，其对癌细胞的表达据报道是预后和预测治疗结果的重要标记（Grosse-Gehling等，2013； Glumac和Lebeau，2018）。酶醛脱氢酶1（ALDH1）可以保护细胞免受氧损伤的影响，并通过将视黄醇转化为视黄酸，参与调节细胞增殖（Huang等，2009）。aldh1被作为人类结肠癌的潜在生物标志物，被用作预后标记（Chen等，2011; Tomita等，2016）。使用姜黄素作为治疗剂受到其生物效率和生物效能感的限制，该生物效率受到大量研究项目的影响。迄今为止从体外和体内研究可用的所有证据都表明，特定的担忧是姜黄素的稳定性和生物利用度较低（Anand等，2007）。然而，更好地了解姜黄素在细胞培养基或人体室中的稳定性（例如，血液，组织器官）是新型治疗发展的重要预先预期，因为姜黄素的浓度与影响生物学系统的能力之间存在牢固的关系。的确，已经开发了几种策略，例如佐剂，脂质体，磷脂复合物，磷脂复合物，纳米颗粒或姜黄素的结构类似物，以克服上述问题（Prasad等，2014b，2014b）。在本研究中，研究了Cur- cur-在体外研究的时间和剂量依赖性对癌症干细胞标志物CD44，CD133和ALDH1的表达的依赖性作用。此外，在不同培养系统中检查了姜黄素和姜黄素的稳定性。
2iCELL8®CX单细胞系统的芯片用户手册
对于图书馆构建，ICELL8 CX系统将DNA提取试剂分配给了过滤器文件指定的单细胞芯片的1,600个候选井。芯片通过ICELL8 CX热循环仪上的DNA提取（在本手册中称为热循环仪）。DNA提取后，分发了包含专有准随机引物的前置化混合物。准随机引物与基因组DNA上的选择性位点结合，然后以线性方式对其进行前序。DNA，从而生成最终的库结构。从芯片中提取结果库并纯化。验证步骤后，库准备在Illumina®平台上进行排序。图1（在接下来的两个页面上）显示了从准备好的单元到创建序列准备就绪库的应用程序的工作流程。
石墨烯官能化碳化钛的合成和表征及其对癌细胞系的细胞毒性作用
石墨烯是一种多功能材料，在各种领域（例如电子，能量，生物医学和环境）具有出色的应用，其特殊的机械强度，电导率和导电性，透明度和化学稳定性。石墨烯已被广泛用于生物学和医疗环境中。mxene是一种二维（2D）材料，由于其表面终止（氧{-O}，氟{-f}，氟{-F}和羟基{-oH}）和透视金属碳化物或碳化物或硝酸酯，因此对水和电导率具有很强的亲和力。mxene最近引起了广泛的应用和独特属性的极大关注。本研究的重点是石墨烯功能化MXENE的合成和表征。此外，我们研究了其对癌细胞系的细胞毒性作用。使用扫描电子显微镜（SEM），X射线衍射（XRD）和傅立叶变换红外光谱（FTIR）测定法对石墨烯功能化的MXENE进行表征。
优化LX-2细胞系的核反射方案
摘要来自肝脏疾病，非酒精性脂肪性肝炎（NASH）是一种影响世界上5.3％的人的疾病。NASH患者的肝脏患有炎症，这也称为纤维化，可以是慢性的，并导致肝硬化的发展。为治疗纤维化患者，正在进行研究以开发抗纤维化疗法以抑制纤维化。在这些研究中，重点是开发自身蛋白酶抑制剂以减少纤维化。酶自身蛋白酶在LPA的产生中起重要作用，LPA是细胞外信号分子。lpa可以作为细胞外分子与LPA 1-3受体结合，而LPA 4-6受体则在ATX的指导下优选地通过LPA激活。由于LPA受体参与纤维化，因此希望使用人类肝星状细胞（HSCS）细胞系LX-2研究这些受体在肝纤维化中的差异，并用LPA受体敲除。要创建此基因敲除细胞系，需要使用CRISPR/CAS9转染LX-2细胞进行优化的核反理®方案。在这里，基于转染效率和细胞活力，将核对甲基®程序EW-113和CA-137进行比较。需要用于核对®实验150.000个细胞。为了在离心后获得最小的细胞损失，研究了不同的离心程序（90xg 10分钟，240xg，持续3分钟，300xg持续5分钟）。从实验的结果中，离心程序之间的离心损失最小的离心机损失没有显着差异。从转染效率和细胞活力的结果中，该程序CA-137是最合适的程序，具有最高的细胞活力，并结合了具有CRISPR/CAS9的LX-2细胞的足够高的转染效率。
抗死亡通路诱导作为 CRISPR/Cas-9 敲除结肠直肠癌细胞系的潜在靶向治疗
受调节的细胞死亡是一种基本的生物学过程，在维持组织稳态和消除受损或不必要的细胞方面起着至关重要的作用。铁死亡是一种铁依赖性过程，特征是氧化和受损脂质的积累，从而导致程序性细胞死亡。在调节这一过程的铁死亡途径基因中，可以考虑GPX4、TFRC、ACSL4、FSP1、SLC7A11 和 PROM2。有许多众所周知的铁死亡途径调节剂，本综述将对此进行讨论。不同组织来源的细胞对这些调节剂表现出敏感或抗性表型。在某些情况下，细胞治疗过程中会发生意外变化，表明可能存在调节死亡途径。我们假设细胞（尤其是结直肠癌细胞系）从铁敏感性转变为铁抗性可能是诱导化学抗性的结果。利用 CRISPR/Cas-9 基因组编辑等新技术，可以实现诱导表型“转换”。
注释研究人员 - 如何访问英国干细胞库干细胞系
从英国访问干细胞库的干细胞系此信息表的目的是为您提供逐步指南，以从英国干细胞库中获取人类干细胞系以及您的请求者在此过程中扮演的角色。假定您将阅读使用人类干细胞系的实践守则的相关部分。本文档的当前版本可在医学研究委员会（MRC）和银行的网站上获得。这些笔记不包含有关将人类胚胎干细胞系进出英国的信息，也不包含与从银行以外的其他来源获取人类胚胎干细胞有关的信息。《实践守则》中包含有关这些领域（包括路线图）的详细信息。还假定您已经完成了所有必要的步骤，并已收到了所有必要的权限，以启动您要求干细胞系列的项目。这可能包括对研究资金项目的同行评审；道德委员会的研究批准；相关国家当局的许可和认证要进行工作以及为其进行的设施。如果您是海外请求者，则还应确保您和任何指定的合作者都遵守与使用胚胎干细胞在您所在国家 /地区使用胚胎干细胞有关的任何政府法规或实践守则。您还应确保银行在发货前已知任何海关要求。步骤1咨询干细胞系的UKSCB目录。The online catalogue lists all the stem cell lines currently available to researchers and can be found on the Bank's website or via the link below: https://nibsc.org/science_and_research/advanced_therapies/uk_stem_cell_bank/cell_line_catalogue.aspx If the cell line(s) you require is not listed on our catalogue, please consult the UK Stem Cell Registry which lists all存放在银行中但尚未可用的细胞系。在这种情况下，您可以通过通过这些票据末尾给出的地址向银行发送电子邮件来询问可能可用性或替代单元线以适合您的目的。如果您希望使用的单元线未出现在目录中或注册表中，则可能需要考虑通过银行以外的访问路线。可以通过在这些票据末尾给出的地址向指导委员会获得有关此信息的更多信息。
开发高生产力，无纹状病毒的SF9昆虫细胞系，用于大规模AAV生产用于心血管基因疗法
ATCC衍生的SF9父母细胞系被解冻并传递，直到在适应SFRV减少的培养条件之前恢复到正常条件下恢复。通过在细胞颗粒和用过的培养基上进行基于反向转移酶（RT）PCR的测定法，常规监测培养物的生长和生存力，以及对SFRV信号的日志还原。降低SFRV 4周后，将所得培养物被镀至96孔板，而用过的培养基（未检测到RV信号后，确定的RV-无RV）用于促进克隆的生长。
由于双重SAMDH1突变而引起的三名患有AICARDI-GOUTIères综合征的三名患者的诱导多能干细胞系
aicardi-gouti` eRes综合征（AGS）是一种系统性的炎症性疾病，并且在婴儿早期开始时（Aicardi and Goutieres，1984）。患者通常患有白细胞症状，其特征是易怒，肌张力障碍，癫痫发作和发烧，导致严重的发育延迟和小头畸形。脑成像显示基底神经节钙化和进行性脑萎缩。ags模仿子宫内获得的病毒感染。一些患者会出现自身免疫性疾病全身性红斑狼疮患者的体征，包括肝炎，血小板细胞减少症，抗核抗体以及皮肤恐龙病变（Ramantani等，2010）。淋巴细胞增多症和抗病毒细胞因子干扰素（IFN）-α在脑脊液中通常在疾病病程初期观察到。全身激活I型IFN，如外周血细胞中IFN刺激的基因的上调所示（也称为IFN信号）通常可以连续检测到。ags是一种由至少九种不同基因（AGS1-AGS9）突变引起的遗传异质性疾病，该疾病在核酸代谢和免疫识别的过程中起作用（Crow and Stetson，2022）。在这项研究中，使用无整合的仙台病毒方法来重新编程源自皮肤活检或外周血单核细胞（PBMC）的成纤维细胞（来自SAMHD1中的常染色体隐性突变（AGS5）的三名AGS患者（AGS5）（AGS5）（Rice等，2009）。SAMHD1编码SAM结构域和含HD结构域的蛋白1，一种依赖于DGTP的三磷酶氢化酶，将脱氧核苷Tri磷酸盐（DNTPS）转换为组成型脱氧核苷和甲磷酸甲磷酸盐。SAMHD1缺乏会导致内部lular DNTP池失衡，导致基因组不稳定性（Kretschmer等，