细胞质动力蛋白-1(动力蛋白)电动机在细胞组织中起着关键作用,通过将各种细胞成分转移到微管的负末端。然而,关于电动机的生物合成,组装和功能多样性如何精心策划的知之甚少。为了解决这个问题,我们使用动力蛋白连接的过氧化物酶体和早期内体作为读数进行了阵列CRISPR功能丧失屏幕。从靶向18,253个基因的指南RNA文库中,回收了195个经过验证的命中,并将其解析为影响多个动力蛋白货物的人,以及效果仅限于一部分货物的那些货物。由多重图像产生的高维表型指纹的聚类揭示了与许多细胞过程有关的共同功能基因,包括几个候选核心动力蛋白功能的新型调节剂。对这些蛋白之一的机械分析,即RNA结合蛋白SUGP1,提供了证据,证明它通过维持动力蛋白激活剂LIS1的功能表达来促进货物运输。我们的数据集代表了用于研究基于微管的运输的新假设的丰富来源,以及通过我们的高内容成像捕获的蜂窝组织的其他几个方面。
睾丸负责精子产生和雄激素合成。睾丸发育和功能的异常导致性发展和男性不育症的疾病。当前,没有用于对睾丸进行建模的体外系统。在这里,我们使用Transwell插入物从新生小鼠初级睾丸细胞中产生睾丸类器官,并表明这些类型器可以生成类似小管的结构和类似于体内睾丸的细胞组织。基因表达分析表明了一种概括体内睾丸中观察到的特征。胚胎睾丸细胞,但没有成年睾丸细胞也能够形成器官。这些类器官可以在培养物中维持8-9周,并显示出进入减数分裂的迹象。我们进一步开发了定义的培养基组成,这些培养基组成促进了未成熟的Sertoli细胞和Leydig细胞状态,从而在体外实现了器官成熟。这些睾丸类器官是一种有前途的模型系统,用于睾丸发育和功能的基础研究,并在阐明和治疗发育性疾病和不育的情况下进行了翻译应用。
Gleason等级)来自RP标本。构成解密分类器的生物标志物包括细胞周期。prolaris™是一种基于RNA的测定法,测量了31个细胞周期进展(CCP)基因的表达和15个“家政”基因,可作为每个患者样本中内部对照和标准化标准的表达。该测定是对福尔马林固定石蜡填充(FFPE)前列腺癌块进行的。分析结果报告为数值得分以及随附的解释信息。该测试产生风险评分,以帮助预测患有局部前列腺癌男性疾病进展的可能性。ONCOTYPEDX®前列腺癌测定法是前列腺活检的17基因RT-PCR分析,代表四个分子途径(雄激素信号传导,细胞组织,基质反应和增殖),可提供对癌症侵略性的生物学测量。该测定法针对被认为是主动监视的候选者(患有NCCN®非常低风险和低风险前列腺癌)的男性。该测定旨在为AS和立即治疗之间的决定提供信息。II。 标准:CWQI HCS-0225II。标准:CWQI HCS-0225
要安装能够控制或消除疾病的有效抗肿瘤免疫反应,必须募集足够数量的淋巴细胞来进行恶性组织并允许维持其效应子功能。的确,肿瘤组织中T和B细胞的纤维化较高,通常称为“热肿瘤”,是患者生存的预后,并且可以预测几乎所有癌症类型中对免疫疗法的反应。实体瘤中三级淋巴结构(TLS)的组织是热肿瘤的一个独特例子,在该肿瘤中,T和B淋巴细胞与抗原存在的细胞和高内皮细胞聚集,并反映在淋巴机构中观察到的细胞组织。许多小组报告说,肿瘤中存在先前存在的TLS与适应性免疫反应,对免疫疗法的反应以及对没有TLS的人的生存改善有关。因此,了解TLS如何以及为什么组织的机制有显着的兴趣,以便在很少或没有TLS的患者中对它们进行治疗。不幸的是,最常用的癌症小鼠模型不会自发形成TLS,因此显着限制了我们对TLS生物学的理解。此简短审查将总结我们当前对TLS新生成的知识状态,并解决该场中的当前差距。
摘要:基因表达的转录后调节在心脏发育和疾病中起重要作用。心脏特异性替代剪接,协调对心肌细胞组织和收缩至关重要的蛋白质的同工型切换。RNA结合蛋白的功能障碍会损害心脏发育并引起心肌病的主要类型,这代表了一个异常的异常群体,严重影响心脏的结构和功能。尤其是RBM20和RBFOX2的突变与扩张的心肌病,肥厚性心肌病或低塑性左心脏综合征有关。在不同动物模型中的功能分析还提出了其他RNA结合蛋白在心肌病中的可能作用,因为它们参与了组织心脏基因编程。最近的研究为RNA结合蛋白与心血管疾病之间的因果关系提供了重大见解。它们还显示了纠正RNA结合蛋白中致病突变以营救心肌病或促进心脏再生的潜力。因此,RNA结合蛋白已成为心脏疾病功能障碍治疗干预措施的有希望的靶标。挑战仍然是破译它们如何协同调节靶基因的时间和空间表达以确保心脏功能和稳态。本综述讨论了了解心肌病中几种良好表征的RNA结合蛋白的含义的最新进展,目的是确定研究差距以促进该领域的进一步研究。
摘要:基因表达的转录后调节在心脏发育和疾病中起重要作用。心脏特异性替代剪接,协调对心肌细胞组织和收缩至关重要的蛋白质的同工型切换。RNA结合蛋白的功能障碍会损害心脏发育并引起心肌病的主要类型,这代表了一个异常的异常群体,严重影响心脏的结构和功能。尤其是RBM20和RBFOX2的突变与扩张的心肌病,肥厚性心肌病或低塑性左心脏综合征有关。在不同动物模型中的功能分析还提出了其他RNA结合蛋白在心肌病中的可能作用,因为它们参与了组织心脏基因编程。最近的研究为RNA结合蛋白与心血管疾病之间的因果关系提供了重大见解。它们还显示了纠正RNA结合蛋白中致病突变以营救心肌病或促进心脏再生的潜力。因此,RNA结合蛋白已成为心脏疾病功能障碍治疗干预措施的有希望的靶标。挑战仍然是破译它们如何协同调节靶基因的时间和空间表达以确保心脏功能和稳态。本综述讨论了了解心肌病中几种良好表征的RNA结合蛋白的含义的最新进展,目的是确定研究差距以促进该领域的进一步研究。
摘要背景对于肝细胞癌(HCC)中对检查点免疫疗法的反应的决定因素仍然很了解。预计肿瘤微环境(TME)中免疫反应的组织有望控制免疫疗法的结局,但空间免疫型仍然很差。目的我们假设空间免疫网络体系结构的反卷积可以鉴定HCC中临床相关的免疫型。设计,我们对101例患者的HCC组织进行了高度多重的成像质量细胞仪。我们在发现和验证队列中进行了深入的空间单细胞分析,以否定HCC免疫结构异质性的决定因素,并开发了用于预测免疫检查点抑制剂(ICI)疗法的空间免疫分类。结果生物信息学分析确定了HCC TME中的23个主要免疫,基质,实质和肿瘤细胞类型。无监督的邻域检测确定了三个免疫结构,具有不同的免疫细胞参与和以CD8 T细胞,髓样免疫细胞或B和CD4 T细胞为主的免疫检查点。我们使用这些定义了三种主要的空间HCC免疫型,这些免疫型反映了更高水平的肿瘤内免疫细胞组织:耗尽,分隔和富集。在ICI治疗下的无进展生存期在空间免疫类型之间显着差异,富集患者的存活率提高。在肿瘤内异质性患者中,一个富集区域的存在控制了长期生存。
摘要背景对于肝细胞癌(HCC)中对检查点免疫疗法的反应的决定因素仍然很了解。预计肿瘤微环境(TME)中免疫反应的组织有望控制免疫疗法的结局,但空间免疫型仍然很差。目的我们假设空间免疫网络体系结构的反卷积可以鉴定HCC中临床相关的免疫型。设计,我们对101例患者的HCC组织进行了高度多重的成像质量细胞仪。我们在发现和验证队列中进行了深入的空间单细胞分析,以否定HCC免疫结构异质性的决定因素,并开发了用于预测免疫检查点抑制剂(ICI)疗法的空间免疫分类。结果生物信息学分析确定了HCC TME中的23个主要免疫,基质,实质和肿瘤细胞类型。无监督的邻域检测确定了三个免疫结构,具有不同的免疫细胞参与和以CD8 T细胞,髓样免疫细胞或B和CD4 T细胞为主的免疫检查点。我们使用这些定义了三种主要的空间HCC免疫型,这些免疫型反映了更高水平的肿瘤内免疫细胞组织:耗尽,分隔和富集。在ICI治疗下的无进展生存期在空间免疫类型之间显着差异,富集患者的存活率提高。在肿瘤内异质性患者中,一个富集区域的存在控制了长期生存。
慢性淋巴细胞白血病 (CLL) 细胞扩散到支持性组织微环境中。为了研究白血病细胞组织保留的机制,我们开发了一个三维骨髓 (BM) 微环境,可在生物反应器内的支架内重现 CLL 和 BM 基质细胞之间的相互作用。我们的系统可以并行分析支架内保留的 CLL 细胞以及在有/无药剂的情况下释放的 CLL 细胞,分别模拟组织和循环细胞区室。只有在存在微环境元素的情况下,CLL 细胞才能保留在支架内,这些微环境元素通过直接接触下调 CLL 细胞中 HS1 细胞骨架蛋白的表达。与此一致,从患者 BM 中获得的 CLL 细胞中 HS1 的表达低于外周血中循环的 CLL 细胞。此外,我们证明,尽管存在依鲁替尼,但 HS1 失活、细胞骨架活性受损和表型更具侵袭性的 CLL 细胞更有可能保留在支架内,而依鲁替尼的动员作用主要作用于具有活性 HS1 的细胞,从而产生动态的细胞骨架活性。这种差异效应在传统的二维系统中是无法评估的,可能是单个 CLL 克隆产生独特耐药性的原因。值得注意的是,在依鲁替尼治疗期间在患者外周血中动员的 CLL 细胞表现出活化的 HS1,强调我们的模型能够可靠地反映体内情况。本文描述的三维模型适用于重现和识别关键的 CLL-BM 相互作用,为病理生理学研究和以个体化方式评估新型靶向疗法开辟了道路。
总小时:45个学分:3单元1微生物学的发展历史小时:10个微生物学作为学科,自发的生成与。生物发生。Anton von Leeuwenhoek,Louis Pasteur,Robert Koch,Joseph Lister,亚历山大·弗莱明(Alexander Fleming A.Waksman通过Paul Ehrlich,Elie Metchnikoff,Edward Jenner Unit 2分类系统的工作来建立医学微生物学和免疫学领域。 小时:05二项式命名法,惠特克(Whittaker)的五个王国和卡尔·沃斯(Carl Woese)的三个王国分类系统及其效用。 原核生物和真核微生物的差异和分类,系统和分类学原理,物种的概念,分类群,菌株;多方细菌分类法,进化天元计,rRNA寡核苷酸测序,签名序列和蛋白质序列的常规,分子和最新方法。 Eubacteria和Archaebacterial Unit 3细胞组织编号之间的差异 小时:15个细胞的大小,形状和排列,糖卵形,胶囊,鞭毛,flagella,fimbriae和pili。 细胞壁:革兰氏阳性和革兰氏阴性细胞壁的组成和详细结构,古细菌细胞壁,革兰氏和酸性染色机制,脂多糖(LPS),球体,原生质体,原生质体和L形式。 抗生素和酶对细胞壁的影响。Anton von Leeuwenhoek,Louis Pasteur,Robert Koch,Joseph Lister,亚历山大·弗莱明(Alexander Fleming A.Waksman通过Paul Ehrlich,Elie Metchnikoff,Edward Jenner Unit 2分类系统的工作来建立医学微生物学和免疫学领域。小时:05二项式命名法,惠特克(Whittaker)的五个王国和卡尔·沃斯(Carl Woese)的三个王国分类系统及其效用。原核生物和真核微生物的差异和分类,系统和分类学原理,物种的概念,分类群,菌株;多方细菌分类法,进化天元计,rRNA寡核苷酸测序,签名序列和蛋白质序列的常规,分子和最新方法。Eubacteria和Archaebacterial Unit 3细胞组织编号小时:15个细胞的大小,形状和排列,糖卵形,胶囊,鞭毛,flagella,fimbriae和pili。细胞壁:革兰氏阳性和革兰氏阴性细胞壁的组成和详细结构,古细菌细胞壁,革兰氏和酸性染色机制,脂多糖(LPS),球体,原生质体,原生质体和L形式。 抗生素和酶对细胞壁的影响。细胞壁:革兰氏阳性和革兰氏阴性细胞壁的组成和详细结构,古细菌细胞壁,革兰氏和酸性染色机制,脂多糖(LPS),球体,原生质体,原生质体和L形式。抗生素和酶对细胞壁的影响。抗生素和酶对细胞壁的影响。细胞膜:细菌和古细胞膜的结构,功能和化学组成。细胞质:核糖体,中介体,包含体,核苷和质粒(定义和类型),内孢子:结构,形成,孢子形成阶段。单元4染色方法小时:05染色和染料,酸性和碱性染料,染色,简单染色,革兰氏染色,阴性染色,酸快速染色,革兰氏染色的基本机制,内孢子和胶囊染色,乳酸苯酚 - cotton-cotton蓝色的基本机制小时:10个明亮的场显微镜,暗场显微镜,相位造影显微镜,荧光显微镜,共聚焦显微镜,扫描和透射电子显微镜DS-1P:显微生物学简介(实践)总小时时间:60个学分:60个学分:2 1。微生物学良好的实验室实践和安全措施。