免疫抑制分子程序性细胞死亡配体 1 (PD-L1) 已被证明在自身免疫、感染和癌症等病理中发挥作用。PD-L1 不仅在癌细胞上表达,而且在未转化宿主细胞上的表达也与癌症进展有关。小鼠系统中 PD-L1 缺陷的产生使我们能够专门研究 PD-L1 在生理过程和疾病中的作用。最通用且最易于使用的位点特异性基因编辑工具之一是 CRISPR/Cas9 系统,它基于 RNA 引导的核酸酶系统。与其前身锌指核酸酶或转录激活因子样效应核酸酶 (TALEN) 类似,CRISPR/Cas9 催化双链 DNA 断裂,这可能导致由于非同源末端连接 (NHEJ) 的随机核苷酸插入或缺失而导致的移码突变。此外,尽管不太常见,但 CRISPR/Cas9 可以在存在合适模板的情况下通过同源定向修复 (HDR) 导致插入确定的序列。在这里,我们描述了使用 CRISPR/Cas9 在小鼠 C57BL/6 背景下敲除 PD-L1 的方案。外显子 3 的靶向结合 HindIII 限制位点的插入会导致过早终止密码子和功能丧失表型。我们描述了靶向策略以及创始者筛选、基因分型和表型。与基于 NHEJ 的策略相比,所提出的方法可产生具有与 NHEJ 相当的效率和时间线的确定终止密码子,生成方便的创始者筛选和基因分型选项,并且可以快速适应其他目标。
人口快速增长和气候变化对马拉维湖等主要水体鱼类生产的影响,导致当地市场鱼类供应量下降,严重影响了马拉维人对鱼类蛋白质的吸收。城市和农村人口的快速增长增加了对鱼类产品的需求,但该国的鱼类生产商却无法提供相应的数量。因此,马拉维市场充斥着来自邻国的鱼类产品。大型公司对鱼类生产的投资有限,导致鱼类营销和分销格局主要由资源有限的微型、小型和中型企业 (MSME) 主导,这些企业主要依靠当地渔民提供供应。水产养殖仍然是该国增加鱼类产量和供应的最可持续途径。然而,水产养殖仍处于发展初期,大多数农民缺乏商业化养鱼所需的专业知识和资源。小农户还缺乏水产养殖技术知识,资源有限,无力购买优质鱼种和鱼饲料,从而影响了其养殖场捕捞鱼的质量和数量。这些小农户还在当地社区市场以低价出售鱼,从而影响了盈利能力。这些因素共同影响了小农户从事水产养殖的商业可行性。因此,大量农民倾向于放弃他们的鱼塘,恩科塔科塔区就是这种情况,据报道,该区约 400 个鱼塘中只有不到一半在运营。为了利用现有的鱼市机会,恩科塔青年坚定合作组织(NS4Y)开发了一种全面的商业模式,该模式旨在解决基本的水产养殖生产限制,从而创建一个涉及小农户的商业可持续、结构化的企业。
与Safitri等人的押韵。(2020),他说学生在学习方面并没有表现出伟大的主动性,因为他们更喜欢做老师要求他们的事情。学习的不受挑战的过程会影响学生在说话中的表现。在这种情况下,教师为课堂上的EFL学生提供了各种学习策略。打算增加额外的努力来提高学生的口语技能,这是基于学生在课堂上被动的因素而缺乏信心,因为学生害怕犯错,这与Octarina等人一致。(2021)表示,学生说话仍然很低,因为学生害怕在语法和发音中犯错误。基于影响学生在课堂上缺乏口语技能的因素,研究人员将使用Venn图方法在学习过程中进行集思广益会议,以提高学生的口语技能。
海军航空系统司令部主计长 Lowien 先生担任海军航空系统司令部 (NAVAIR) 的主计长。他直接向 NAVAIR 执行董事汇报,并负责向 NAVAIR 指挥官提供财务咨询。作为财务管理界的高级领导,Lowien 先生负责 NAVAIR 的所有预算制定、预算执行、会计和审计相关活动。他领导八个主要站点的财务管理人员,支持 NAVAIR 和项目执行办公室 (PEO) 对所有海军航空资产的开发、生产和维护的要求。Lowien 先生在主计长、企业财务管理和项目管理领域拥有丰富的经验。自 2010 年以来,Lowien 先生一直担任 NAVAIR 主计长领导层成员,担任预算官和副主计长。在此之前,Lowien 先生曾担任主计长分析师、企业财务经理和项目经理,直接支持 PEO 项目 15 年。他曾参与过多个飞机项目,包括 MQ-4C、V-22、H-1、F/A-18 和 F-14 雄猫。最值得注意的是,他以一级集成产品团队负责人的身份领导 MQ-4C 项目从 MS-B 阶段通过关键设计评审。当 V-22 项目获得全速生产决策时,他还是该项目的首席业务财务经理。Lowien 先生获得了斯托本维尔方济各大学工商管理学士和硕士学位。他毕业于海军部弥合差距计划。他拥有国防采购劳动力改进法案 (DAIWA) 项目管理和业务财务管理三级认证。他还拥有 OSD 主计官颁发的财务管理三级认证。自 2004 年以来,他一直是采购专业队的成员。