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World File Search System绵羊
优化用于检测绵羊的聚合酶链反应
SPV的抽象准确和快速诊断对于控制利比亚疾病的快速传播至关重要。本研究旨在优化和开发利比亚阿尔扎维耶市绵羊农场绵羊病毒鉴定的PCR分析。总共收集了120个口头拭子样品，如下：临床怀疑的绵羊痘（n = 67），临床怀疑具有传染性的外生体（n = 18）和健康的绵羊（n = 35）。对收集的样品进行DNA提取，然后进行针对p32基因的聚合酶链反应，该反应用特定的引物。所有67个临床怀疑的绵羊痘样品的SPV呈阳性，并产生预期的扩增子大小为390 bp。所有临床上怀疑的传染性胚膜（CE）样品和健康样品均为阴性。当前基于p32基因的PCR分析的结果表现出良好的敏感性和特异性，可用于分子诊断绵羊痘病毒疾病。关键字。绵羊痘病毒，p32 Gene，PCR，Alzawiyah City，Libya。引言绵羊病是绵羊中最严重，最感染的病毒疾病[1]。在临床上，Sheepox病毒（SPV）可以通过发烧，厌食症，抑郁症，肺部病变发展，无羊毛区域的痘病变的出现以及表面淋巴结肿胀来识别。[2]。SPV是严重的绵羊皮肤病。SPV属于Poxviridae家族的Capripoxvirus（CAPV）属。该属的成员，还包括引起皮肤肿块和山羊痘的病毒，感染绵羊，山羊和牛，并引起经济上重要的疾病（LSDV）[3,4]。绵羊痘病毒是动物的最重要的蛇毒，在OIE的A组疾病中列出[5]。由于对绵羊的羊毛和皮革损害，牛奶产量降低，堕胎率降低，体重增加和高死亡率降低，可能会造成严重的生产损失[6-8]。即使在许多国家中消除了这种疾病，但仍有从北非，中东，西亚，印度和中国在内的世界各地据报道[8,9]。在利比亚，该疾病通常具有enzootic外观。它威胁着农业部门的发展，造成了与羔羊死亡率有关的经济损失，成人的繁殖和生产下降[10]。SPV的诊断通常基于高度特征的临床体征，病毒的分离，中和 - 中和血清学测定[11,12]和聚合酶链反应（PCR）分析[13,11]。用于识别SPV的常规病毒学和血清学测定是耗时，费力的，大多数的特异性低[14]。但是，包括PCR分析在内的分子方法是潜在的工具，可以用作传统实验室技术检测SPV的替代或互补测试。被证明是可靠，敏感，快速和特定的方法，这些方法通常用于世界上许多病毒的检测和表征，包括卡皮托病毒[15,16,12]。[17]。这项研究的目的是创建一种快速，敏感的方法，用于在短时间内检测现场样本中的SPV，从而实用和高效。此外，对于识别SPV的识别，需要进行快速，特异性和敏感测试，因为在现场样品中及时检测SPV对于成功的SPV控制至关重要，并且降低了可能由流行病引起的潜在严重经济损害。方法样本该研究是在利比亚黎波里的利比亚生物技术研究中心（BTRC）的基因工程系进行的。当前的研究总共收集了120件口腔拭子，从可疑的绵羊痘病例中获得了67件，从可疑的绵羊传染性ecthyma（CE）中获得了18例，以及各种羊群中的健康绵羊（阴性对照）的35例。在2013年5月至2014年4月之间，标本是从利比亚阿尔扎维亚市的绵羊群中收集的。使用由英国的公司Isohelix提供的颊拭子管进行了口服拭子样品。随后将这些样品运输到基因工程
在两个紧密相关的物种（绵羊和山羊）中局部适应的多种基因组溶液面对相同的气候约束
fi g u r e 3绵羊和山羊之间的相对差异，用于外围基因组区域（∆GR）的数量（∆GR）和XP-CLR/ F ST（∆GX）和SAMßADA（∆GS）检测到的基因。这三个索引被计算为绵羊和山羊中的区域/基因数量除以区域/基因的总数。它们在-1和 + 1之间变化：仅在山羊或绵羊中与环境参数相关的区域/基因。有关环境参数的代码，请参见表2。由于环境变量在每个物种上都不同（χ2测试，df = 9，p <.001），基因组区域和基因的数量在选择性下被选择。有关基因列表，请参见表S3。
通过 CRISPR 辅助 ssODN 介导的同源定向修复对绵羊进行 Otoferlin 基因编辑
OTOF 基因编码耳蜗内毛细胞中表达的耳蜗蛋白，其不同突变会诱发一种耳聋，而耳聋是人类无综合征隐性听觉神经病谱系障碍的主要原因。我们报告了使用与不同 Cas9 成分（mRNA 或蛋白质）相关的 CRISPR 系统，在单链寡脱氧核苷酸 (ssODN) 辅助下诱导同源定向修复 (HDR)，生成了第一个 OTOF 突变大型动物模型。使用不同浓度的两个靶向外显子 5 和 6 的 sgRNA 与 Cas9 mRNA 或蛋白质 (RNP) 结合，并与靶向外显子 5 中 HDR 的 ssODN 模板混合，该模板包含两个 STOP 序列。共出生 73 只羔羊，其中 13 只出现插入/缺失突变（17.8%），其中 8 只（61.5%）通过 HDR 发生敲入突变。较高浓度的 Cas9-RNP 能更有效地诱导靶向突变，但对胚胎存活率和妊娠率有负面影响。本研究首次报道了 OTOF 破坏绵羊的产生，这可能有助于更好地理解和开发与遗传疾病相关的人类耳聋的新疗法。这些结果支持使用 ssODN 辅助的 CRISPR/Cas 系统作为牲畜基因编辑的有效工具。
最佳BET甲烷消除饲料对埃塞俄比亚本地Menz Breed绵羊的饲料摄入量，消化率，活体重变化和甲烷排放的影响
这项研究继续对埃塞俄比亚的最佳营养成分和低甲烷（CH 4）生产进行本地可用的反刍动物饲料的体外筛查。在体外研究中获得的最好的BET饲料（以下称为测试饲料）包括尼罗拉（Acacia nilotica），Ziiphus spina-christi和Brewery Evener Green Grains（BSG）的干燥叶片。该研究涉及四种治疗方法：对照，相思，BSG和Ziiphus；每种治疗都提供了相同的粗蛋白，并使用建模和激光CH 4检测器（LMD）估计肠肠排放。该实验被设计为一个随机完整的块，使用初始重量作为21岁cast割的Menz绵羊的阻滞因子。这项研究跨越了90天，在喂养试验一个月后进行了消化率试验。对照组与具有较高摄入量的测试饲料组相比，干物质摄入量（p <0.001）显着（p <0.001），尤其是在Ziiziphus组中。然而，Ziiphus组的CP消化率显着（P <0.01），比其他组低。测试饮食还显着增加了体重增加（p <0.001）。值得注意的是，Ziiphus组在体重变化（BWC），最终体重（FBW）和平均每日增益（ADG）方面表现出卓越的表现。相似的结果。测试饲料组的CH 4发射强度明显低于对照组。对照组排放了808.7和825.3 g Ch 4，而Ziiphus组分别使用建模和LMD方法分别排放了220和265.3 g Ch 4 ADG。这项研究表明LMD可以为绵羊产生生物学上合理的数据。尽管Ziiphus组的样本量较小是对这项研究的限制，但Ziiphus spina-christi和nilotica的叶子粉富含浓缩的单宁（CTS），它们的体重增加和增强的饲料效率可观，从而使这些叶子成为可爱的饲料和可持续的饲料，以供卑鄙的饲料和可持续的饲料。
全基因组的关联研究对绵羊菌群中菌群的抗体反应
摘要。病例淋巴结炎（CLA）是一种慢性且高度传染性的疾病，在绵羊和山羊中广泛影响，对动物福利和生产产生不利影响。这项研究旨在揭示宿主地球杆菌对二氧杆菌抗体抗体水平的影响，作为疾病易感性或抗性的指标，从而有可能识别与这些性状相关的遗传标记。从四个大捷克羊群的321只羊中收集了血液样本。萨福克品种的动物年龄从2至8岁不等，每年定期采样4年。基于两种不同的商业酶连接的免疫吸附测定（ELISA）血清学抗原测试，将绵羊分为健康和患病的组。基因组DNA与Geneseek®基因组pro-firer™卵子50 K进行基因分型，并将41 301个标记用于全基因组关联分析（GWAS）。进行了一种病例 - 对比GWA，包括143种血清阳性和178羊绵羊，以评估使用GCTA软件的绵羊基因组和对磷酸梭菌的磷脂酶D抗原的抗体反应之间的关系。这项研究揭示了染色体11和20上的两个暗示性SNP（单核苷酸多态性），在Trim16的第一个外显子（含三方 - 含量的16）基因中，具有最显着的SNP。通过分析阳性动物和阴性动物之间的基因组改变及其背景，包括对暗示性SNP±500 Kb区域内基因的基因分析（GO）分析，我们鉴定了基因以及与免疫相关的过程以及潜在地影响CLA敏感性的过程和途径。这些包括通过主要的组织相容性复合物（MHC）I和II，Th17粘膜细胞分化，细胞自噬和与吞噬相关的机制的抗原加工和外基肽的呈现。这项研究提供了对抗二链球菌抗体反应的遗传基础的见解，确定了暗示性的关联和潜在的生物学机制，可以指导未来的繁殖和遗传策略，以提高对绵羊CLA的耐药性。
通过腺嘌呤碱基编辑高效生成具有明确 FecBB 突变的绵羊
摘要 碱基编辑有可能改善农业中的重要经济性状，并且可以精确地将 DNA 或 RNA 序列中的单个核苷酸转换为最小的双链 DNA 断裂 (DSB)。腺嘌呤碱基编辑器 (ABE) 是最近出现的用于将目标 A:T 转换为 G:C 的碱基编辑工具，但尚未在绵羊身上使用。ABEmax 是 ABE 的最新版本之一，它由催化受损的核酸酶和实验室进化的 DNA 腺苷脱氨酶组成。骨形态发生蛋白受体 1B (BMPR1B) 基因中的 Booroola 繁殖力 (FecB B) 突变 (g.A746G, p.Q249R) 会影响许多绵羊品种的繁殖力。在本研究中，通过使用 ABEmax，我们成功获得了具有确定点突变的羔羊，这些突变导致氨基酸替换 (p.Gln249Arg)。在新生羔羊中，定义的点突变效率为 75%，因为六只羔羊在 FecB B 突变位点 (g.A746G, p.Q249R) 处为杂合子，两只羔羊为野生型。我们在八只经过编辑的羔羊中未检测到脱靶突变。在此，我们报告了由 ABE 生成的首只基因编辑绵羊的验证，并强调了其改善牲畜经济重要性状的潜力。
全基因组对中国土著绵羊的重新陈述提供了对遗传基础气候适应的洞察力
抽象背景中国土著绵羊是具有独特特征和特征的宝贵资源。它们分布在中国大陆的气候不同的地区；但是，很少有报道根据其基因组分析了绵羊的环境适应性。我们研究了适应于对极端湿度，高度和温度条件的选择的变体和特征，这些绵羊基因组中的41种表型和地理位置代表性的中国土著绵羊繁殖以表征这些种群中的遗传基础环境适应的遗传基础。基于人口结构分析的结果，我们推断中国土著绵羊分为四类：哈萨克（KAZ），蒙古人（MON），藏族（Tib）（Tib）和Yunnan（Yun）。我们还检测了一组与适应极端环境条件相关的罐头基因，例如易于干旱的区域（TBXT，TG，TG和HOXA1），高蓝色区域（DYSF，EPAS1，JAZF1，JAZF1，PDGFD，PDGFD和NF1和NF1和NF1）和温暖的区域（Tshr，tshr，abcD4）和ABCD4和ABCD4和ABCD4，在所有这些候选基因中，八个ABCD4，CNTN4，DOCK10，LOC105608545，LOC121816479，SEM3A，SVIL和TSHR在极端环境条件之间重叠。TSHR基因在温暖组中显示出强烈的签名，并在染色体上置于90,600,001和90,650,001之间的单个核苷酸聚合物（SNP）错义突变，这会导致TSHR蛋白质结构的变化，并影响其稳定性。对选择与环境适应性有关的选择基因和TSHR基因中SNP错义突变的结论分析，该基因影响蛋白质结构和稳定性。它还提供了有关中国土著绵羊种群植物地理结构演变的信息。这些结果为未来的繁殖研究提供了重要的遗传资源，以及有关动物如何适应气候变化的新观点。
搜索与tick相关的，像bronnoya一样的病毒溢出到绵羊
摘要：tick传播疾病是欧洲许多媒介传播疾病的原因。最近，在许多壁虱物种中发现了属于Bunyavirales的新病毒家族的新型病毒。在这项研究中，我们使用元文字组学来检测与从罗马尼亚和法国收集的ixodes相关的新病毒，包括新的病毒。在这些区域第一次鉴定出与野马病毒相关的类似Bunyavirus的病毒。它提供了高水平的氨基酸保护，并在挪威和克罗地亚的I. ricinus tick中鉴定出与野马相关的病毒以及2014年从日本的tick细胞系中分离出的ixodes capapularis bunyvarus。系统发育分析表明，Bronnoya病毒的子层与几个Bunyavirales家族不同，这表明它可以在该顺序内构成一个新的家族。为了确定Bronnoya病毒是否可以构成新型的tick传播arboviruse，这是一种用于检测罗马尼亚野马病毒病毒糖蛋白中抗体的荧光素酶免疫沉淀测定法，用于从暴露于滴答滴答的小反刍动物中筛选出血清中的血清。未检测到阳性血清，表明该病毒可能无法感染小型反刍动物。这项研究代表了对哺乳动物感染的首次血清学研究，这是bronnoya样病毒的第一步，也是鉴定出tick传播arbovirus的潜在新出现的第一步。
抗兔疫苗接种后绵羊的免疫力检测
目的：狂犬病是一种致命但可预防的疾病，具有适当的暴露前抗野合Vac Cination（ARV）。作为家庭宠物和流浪者，狗是放松的水库和矢量，在过去的几年中，斯里兰卡的人类狂犬病病例一直与狗叮咬有关。但是，其他与人类频繁接触的易感物种可能是感染的根源。这样的物种就是绵羊，ARV之后的免疫力从未在斯里兰卡饲养的绵羊中进行测试。材料和方法：我们已经测试了来自动物中心饲养的绵羊，斯里兰卡医学研究所的血清样品，用于ARV后存在抗野兽抗体。绵羊血清样品，在斯里兰卡首次使用的抗体试剂盒进行了测试，我们的结果通过细胞的血清核化方法进行了验证（Fluorescent抗体病毒中性测试，FAVN TEST，FLAVN TESTIPARTIAL，FAVN TESTERMIADIAD，FLAVN ANTICELED，FLAVN ANTICEL ANTICE ANTICY ORMAGISTER WORMATER WORMATER ARMYSTION和WORMETH WOLL WORMATHISS。结果：绵羊每年接受ARV，并在其血清中保持高中和抗体滴度。在6个月大的羔羊中未检测到孕产妇抗体。ELISA和FAVN测试之间的一致性，即系数一致性为83.87％。结论：通过测量抗兔抗体反应的测量，绵羊的年度疫苗接种对维持对狂犬病的充分保护有效。羔羊需要在6个月大的时间内进行淡化，以实现其血清中和中和抗体的保护水平。在斯里兰卡引入此ELISA将是确定动物血清样品中抗兔抗体水平的好机会。
Halogeton和Grease Wood在牛和绵羊中毒
摘要摘要Halogeton（Halogeton glomeratus）是一种快速增长的植物，而Greasewood（Sarcobatus vermiculatus）是西方国家的多年生灌木。草酸盐是卤素和润滑脂中的有毒原理。当允许饥饿的动物在卤素和润滑脂的重型林木林中放牧时，大多数损失会发生。Halogeton和Greasewood总是很危险，随着生长季节的发展而变得更具毒性。在这里，我们报告了牛和绵羊中的两个卤素和油脂中毒的临床病例。在组织学上，在牛的肾脏中观察到草酸盐晶体，绵羊与草酸盐中毒一致。使用气相色谱型电离检测（GC-FID）在瘤胃含量中检测到草酸盐。最后，使用DNA metabarcoding在中毒的牛和绵羊的瘤胃中检测到卤素和润滑脂。总而言之，在这些情况下，使用了多种证实证据来诊断草酸盐中毒的诊断。