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Taq DNA 聚合酶的 PCR 方案
聚合酶链式反应 (PCR) 是一种功能强大且灵敏的 DNA 扩增技术 (1)。Taq DNA 聚合酶是一种广泛用于 PCR 的酶 (2)。以下指南旨在确保使用 NEB 的 Taq DNA 进行 PCR 成功
Titanium®TAQDNA聚合酶分析证书
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Taq DNA 聚合酶的 PCR 方案
聚合酶链式反应 (PCR) 是一种功能强大且灵敏的 DNA 扩增技术 (1)。Taq DNA 聚合酶是一种广泛用于 PCR 的酶 (2)。以下指南旨在确保使用 NEB 的 Taq DNA 进行 PCR 成功
PHI29 DNA聚合酶-ABO div>
成分体积底物DNA 10 - 50 ng PHI29 DNA聚合酶反应缓冲液（10x）5 µl DNTPS 0.5 mm抗性的随机六聚体引物5 µM PHI29 DNA聚合酶1 µL（10 U）noclease nuclease nuclease free H 2 O（CAT。编号mb11101）最多50 µL 2。轻轻混合和脉冲。3。在30°C下孵育90分钟。4。在65°C下使酶灭活10分钟。5。继续下游应用程序，例如pCR（用TE缓冲液稀释10-20倍，使用1-3μL稀释的DNA或DNA标记。或者，将放大的DNA存储在-20°C下。避免重复的冻结循环
纯化的小鼠抗DNA聚合酶Δ
描述DNA序列中的误差是由环境因素引起的，或在复制过程中由DNA聚合酶造成的。如果未检查，这些错误可能会累积遗传损害，以使细胞无法再起作用。因此，DNA修复过程涉及切除受损序列的机制以及适当序列的重新合成和连接。在哺乳动物细胞中，该校对功能在50kDa亚基的异二聚体（POL）δδ二个亚基的DNA聚合酶（POL）δ中取决于，在PCNA（增殖细胞核抗原）和125KDA催化亚基的存在下刺激POLδ活性。催化亚基具有3'至5'的核酸外切酶活性，将polδ与polα和polβ区分开。 polδ也是DNA复制的核心，在复制叉处的铅链合成中起作用。该催化亚基被G1依赖性激酶 - 周期蛋白复合物磷酸化，并通过其N末端249氨基酸与CDK2相互作用。但是，磷酸化对POLδ活性几乎没有影响。因此，DNA聚合酶ä对于DNA复制至关重要，并且在DNA切除修复过程中替换受损序列的能力是独一无二的。
通过DNA聚合酶辅助的终端标记
在彗星测定中的摘要中，如果细胞被X X倍化为Genoto XIC剂，则在单细胞凝胶电泳后形成尾巴。these尾巴包括DNA单链断裂（SSB）和双链断裂（DSB）的混合物。ho w e v er，这些两种类型的链断裂无法使用具有Con V en ventionDNA染色的彗星测定方案来区分。由于DSB对单元格是有问题的，因此如果可以在同一彗星中差异化SSB和DSB，则将很有用。为了能够区分SSB和DSB，我们为聚合酶辅助的DNA损伤分析（PADDA）设计了一种协议，可与Flash Comet协议或固定单元格结合使用。通过使用DNA聚合酶I将SSB和末端脱氧核苷酸转移酶标记为具有荧光团标记的核苷酸的DSB。在此，TK6细胞或HACAT细胞暴露于过氧化氢（H 2 O 2），电离辐射（X射线）或DNA切割酶，然后遵循彗星方案，以实施彗星方案。p adda提供了更广泛的检测范围，未发现的DNA链断裂的未发现的未发现。
kapa3g热点DNA聚合酶 - 为IVD
KAPA3G热门DNA聚合酶是一种茶产生DNA聚合酶，可以显示出一致的结果，并具有浑浊的生产率，而无需进行任何准备和短期反应时间。Roche CustomBiotech通过通过ISO 13485认证的生产设施中的广泛测试生产KAPA3G HOTSTART DNA聚合酶，并且可以伴随客户的需求。很容易冻结冻结期，因此非常适合需要有效或以各种形式设计的额外体外。
EP0402 TAQ DNA聚合酶（rec。）
图3。准备和使用病毒载体在靶细胞中重组蛋白表达。（1）包装细胞（例如HEK293）用编码感兴趣基因和必要病毒蛋白的三个或四个质粒转染。（2）将病毒组装在包装细胞中，然后收获和纯化。（3）该病毒用于转导靶细胞，释放感兴趣的基因。（4）在此示例中，将慢病毒载体的RNA反向转录为DNA，将DNA整合到宿主基因组中以进行重组蛋白表达。
Pfu DNA 聚合酶综合综述
Pfu DNA 聚合酶是一种源自超嗜热古菌 Pyrococcus furiosus 的耐热酶，因其高保真度和强大的加工性而广受认可。它的 3'-5' 核酸外切酶活性使其成为正确扩增短链和复杂 DNA 链不可或缺的酶。Pfu DNA 聚合酶的这些生化特性促进了其提取和生产方法的重大进步。本综述涵盖了一些传统的纯化方法，包括蛋白质纯化和亲和层析，以及重组基因表达、自动化生产系统和基于膜的技术的最新进展。最近开发了新的酶工程方法，例如 CRISPR-Cas9 介导的基因优化，这提高了提取效率的标准以满足新兴需求。曾经具有挑战性的 Pfu DNA 聚合酶生产已通过在实验室和商业规模的大肠杆菌中重组表达得到了显着简化。涉及 IPTG 浓度和响应面方法的优化技术已将产量提高了 30%。自诱导意味着可以实现更高的生物量输出。如今，Pfu DNA 聚合酶的应用范围从标准 PCR 到分子生物学、法医分析、临床微生物学和生物技术领域的高级临床诊断。