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World File Search System胰蛋白酶
大豆中 CRISPR/Cas9 介导诱变产生的 Kunitz 胰蛋白酶抑制剂突变体等位基因的分子标记开发
（未经同行评审认证）是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者此版本于 2022 年 8 月 23 日发布。；https://doi.org/10.1101/2022.08.22.504807 doi：bioRxiv preprint
在太平洋白虾（Litopenaeus vanamei）饲料中评估蛋白质消化率，皂苷和胰蛋白酶抑制剂含量，用菠萝废物中的溴提取物消化了。
摘要：目前的研究旨在研究菠萝中不同浓度的溴化剂提取物对太平洋白虾饲料中蛋白质消化率和皂苷量的百分比以及胰蛋白酶抑制剂的影响。在深绿色成熟阶段，从菠萝（Bhattavia菌株）的牙冠和果皮中提取溴烯。试验分为两个实验。第一个实验确定了太平洋白虾饲料的体外蛋白质消化率的最佳条件，该饲料含有38％的粗蛋白。在不同的pH（6-9），水解时间（5、10和30分钟）和温度（25和30°C）的情况下，溴提取物在不同的pH（6-9），水解时间（25和30°C）消化。第二个实验研究了白虾饲料中的皂苷和胰蛋白酶抑制剂（Ti）在0、90、170和250 ppt的不同浓度的5、10和30分钟下在30°C消化时，在0、90、170和250 ppt中进行了不同。结果表明，用溴烯蛋白消化的最佳条件在25°C下为5和30分钟，蛋白质消化的百分比为63.15和70.66％（p <0.05）。此外，饮食中的皂苷含量在溴烯水平和水解时间后变化，在170和250 ppt的消化饮食中发现了最高水平的皂苷水平，持续30分钟和250 ppt，持续30分钟（1.84和1.84和1.88 mg/g饲料），在90 ppt中发现了最低的皂苷（1.84和1.84和1.88 mg/g饲料），而最低的皂苷则在90和170 ppt中占5分钟。（0.94和0.99 mg/g进料）（p <0.05）。这项研究表明，用溴烯蛋白消化的最佳状态在25°C下为5和30分钟，溴烯酰胺和水解时间的合适水平使虾蛋白和胰蛋白酶抑制剂在5分钟时为250 ppt。在5 - 分钟长的长度下，溴烯烯水平的水平相反，最低的Ti水平在250 ppt（0.008 mg/g fef）的消化饲料中显示（p <0.05）（p <0.05）（p <0.05）（p <0.05）（bromelain）在10和30-分钟的leng leng级别上显示0.0（00）0.0（00）0.0（0.0 00）（0.0米）（0.0米）（0.0米）（0.0米）。饲料）（p <0.05）。在5 - 分钟长的长度下，溴烯烯水平的水平相反，最低的Ti水平在250 ppt（0.008 mg/g fef）的消化饲料中显示（p <0.05）（p <0.05）（p <0.05）（p <0.05）（bromelain）在10和30-分钟的leng leng级别上显示0.0（00）0.0（00）0.0（0.0 00）（0.0米）（0.0米）（0.0米）（0.0米）。饲料）（p <0.05）。
TS 176 - RPF补充剂（纤维蛋白原胰蛋白酶抑制剂
通过加入10毫升无菌蒸馏水来补充1个小瓶的含量。将小瓶倒置慢慢地慢慢地避免了两到三次避免起泡。或者，可以用无菌玻璃棒或搅拌器轻轻搅拌1-2分钟来溶解内容物。未获得立即溶解。保持其站立1-2个小时以更好地溶解。轻微的颗粒物，不会影响补充剂的性能参数。无菌添加90毫升无菌的补充剂，熔融TM 358 -Baird Parker琼脂碱基 / TMV 358- Baird Parker琼脂基地（VEG。）< / div>/ TM 1579-贝尔德·帕克琼脂基地（RPF）（ISO 6888-1＆2＆2：1999） / TM 2300 -RPF琼脂基地（ISO 6888-2：1999）冷却至48°C。与烧瓶同时轻轻旋转烧瓶，从烧瓶的侧面缓慢加入补充剂，以均匀地混合补充剂。倒入无菌培养皿中，立即使用。
用胰蛋白酶和脱氧核糖核酸酶将吸水泡顶部表皮分离成
皮肤自显影。对 6 例疱疹的整个疱顶表皮和表皮细胞悬液进行了放射自显影分析。将两个完整的表皮和分离成细胞悬浮液的另外 22 个表皮在 1 ml 含有 2 µCi ["H]TdR 的 Hanks 溶液中在 37°C 下孵育 60 分钟。用 Hanks 溶液清洗两次后，将水泡表皮固定在 4% 福尔马林中，进行处理，并切成 4 µm 的切片。从表皮细胞悬浮液中制成细胞离心制剂。用剥离膜（Kodak AR-IO）覆盖制剂，暴露 7 天，并用 Harris 苏木精染色。通过计数每个样本中的 5 000 个细胞并将计数表示为标记细胞与所有未标记表皮细胞 XI 00 的比例来确定表皮细胞的标记指数。
新型的口服卵子聚合物纳米颗粒，用于递送针对小肠的胰蛋白酶
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利用 CRISPR-Cas9 多重编辑 α-淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂基因以减少硬粒小麦中的过敏原蛋白
小麦及其衍生食品分布广泛，是全球主要食物来源之一。在过去几十年中，与小麦有关的疾病发病率已成为人类面临的全球性问题，这可能与小麦衍生食品的传播有关。已确定结构和代谢蛋白，如 α-淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂 (ATI)，与小麦过敏（面包师哮喘）和非腹腔性小麦敏感症 (NCWS) 的发病有关。ATI 是一组外源性蛋白酶抑制剂，由分散在硬粒小麦和面包小麦的几条染色体上的多基因家族编码。WTAI-CM3 和 WTAI-CM16 亚基被认为是与面包师哮喘和可能的 NCWS 发病有关的主要蛋白质。使用 CRISPR-Cas9 多路复用策略编辑意大利硬粒小麦品种 Svevo 的谷粒中的 ATI 亚基 WTAI-CM3 和 WTAI-CM16，目的是生产出具有减少不良反应中潜在过敏原数量的小麦品系。使用无标记基因方法，即在不使用选择剂的情况下再生植物，直接从 T 0 代获得没有 CRISPR 载体的纯合突变植物。与传统育种计划相比，这项研究证明了 CRISPR 技术能够在更短的时间内敲除免疫原性蛋白质。在分子（测序和基因表达研究）或生化（免疫学测试）水平上确认了对两个目标基因的编辑。值得注意的是，作为一种多效性效应，编辑品系中的 ATI 0.28 假基因被激活。
胰蛋白酶抑制剂，粉末
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