1林申大学科学技术研究生院农业部,8304 Minami-Minowa,Kami-Ina,Nagano,Nagano 399-4598,日本; 19as101k@shinshu-u.ac.jp(M.I.); shimot@shinshu-u.ac.jp(T.S.)2个蜂窝和分子生物技术研究所,美国国家先进工业科学技术研究所,中部5-41,1-1-1 Higashi,Tsukuba,Tsukuba 305-8565,日本伊巴拉基; y-nihashi@aist.go.jp 3 Shizuoka大学药学学院分子医学系,日本Shizuoka 422-8526,Suruga-Ku 52-1 Yada,52-1 Yada; y.sunagawa@u-shizuoka-ken.ac.jp(y.s.); morimoto@u-shizuoka-ken.ac.jp(t.m。)4农业学院农业和生命科学系,新月大学,8304 Minami-Minowa,Kami-Ina,Nagano,Nagano 399-4598,日本; koume@shinshu-u.ac.jp(k.u. ); kagami@shinshu-u.ac.jp(H.K.) 5生物医学科学研究所生物分子创新系,新月大学8304 Minami-Minowa,Kami-Ina,Nagano,Nagano 399-4598,日本 *通信:4农业学院农业和生命科学系,新月大学,8304 Minami-Minowa,Kami-Ina,Nagano,Nagano 399-4598,日本; koume@shinshu-u.ac.jp(k.u.); kagami@shinshu-u.ac.jp(H.K.)5生物医学科学研究所生物分子创新系,新月大学8304 Minami-Minowa,Kami-Ina,Nagano,Nagano 399-4598,日本 *通信:
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1,Hyashi K,Ohta H,Kurimoto K,Saitou M(2011111111 11通过多能干细胞在培养中对小鼠生殖细胞指定途径的重构。单元格,146,519 -2, Gafni O, Weinberger L, Mansour AA, Manor YS, Chom- sky E, Ben-Yosef D, Kalma Y, Viukov S, Maza I, Zviran A, Rais Y, Shipony Z, Mukamel Z, Krupalnik V, Zerbib M, Geula S, Caspi I, Schneir D, Shwartz T, Gilad S, Amann-Zalcenstein D,Benjamin S,Amit I,Tanay A,More-S-RWA R,Novershtern N,Hanna JH(2013年,新型人类基态幼稚的多能干细胞的脱颖而出。 自然,504,282 - 3,Irie N,Weinberger L,Tang WWC,Kobayashi T,Viukov S,Manor YS,Dietmann S,Hanna JH,Surani MA(2015 17是人类原始LOM LOM细胞脂肪的关键特征。 单元格,160,253 - 4, Sasaki k, yokayashi s, namurara t, okamoto i, yabot y, kurimoto k, ohta H, moritoki y, iwatani C, tsuciya h, nakura s, sekiguchi k, sakuma t, yamomomomomoto t, t, yamamoto s, yamamoto m, yamamoto m。 M((2015年)在体外耐心诱导人类生殖细胞脂肪中的人类生殖细胞脂肪。 细胞干细胞,17,178 - 5,Kobayashi T,Zhang H,Tang WWC,Irie N,Withey S,Klipsch D,Syrirna,Dietmann S,Contreras,Webb R,Erlelegio R,Ellelegio R,Soup MA (2 自然,546,416 - 6,Tang WWC,Castillo-Venzor A,Gruhn WH,Kobayashi T,Penfold CA,Morgan MD,Sun D,Irie N,Surani MA (20222222222222222,Sequeential Enlancer State reamoulines Remoulines remoulines hu-man enferine hu-man enterline能力和指定。 nat Cell Biol,24,448 -2, Gafni O, Weinberger L, Mansour AA, Manor YS, Chom- sky E, Ben-Yosef D, Kalma Y, Viukov S, Maza I, Zviran A, Rais Y, Shipony Z, Mukamel Z, Krupalnik V, Zerbib M, Geula S, Caspi I, Schneir D, Shwartz T, Gilad S, Amann-Zalcenstein D,Benjamin S,Amit I,Tanay A,More-S-RWA R,Novershtern N,Hanna JH(2013年,新型人类基态幼稚的多能干细胞的脱颖而出。自然,504,282 -3,Irie N,Weinberger L,Tang WWC,Kobayashi T,Viukov S,Manor YS,Dietmann S,Hanna JH,Surani MA(2015 17是人类原始LOM LOM细胞脂肪的关键特征。 单元格,160,253 - 4, Sasaki k, yokayashi s, namurara t, okamoto i, yabot y, kurimoto k, ohta H, moritoki y, iwatani C, tsuciya h, nakura s, sekiguchi k, sakuma t, yamomomomomoto t, t, yamamoto s, yamamoto m, yamamoto m。 M((2015年)在体外耐心诱导人类生殖细胞脂肪中的人类生殖细胞脂肪。 细胞干细胞,17,178 - 5,Kobayashi T,Zhang H,Tang WWC,Irie N,Withey S,Klipsch D,Syrirna,Dietmann S,Contreras,Webb R,Erlelegio R,Ellelegio R,Soup MA (2 自然,546,416 - 6,Tang WWC,Castillo-Venzor A,Gruhn WH,Kobayashi T,Penfold CA,Morgan MD,Sun D,Irie N,Surani MA (20222222222222222,Sequeential Enlancer State reamoulines Remoulines remoulines hu-man enferine hu-man enterline能力和指定。 nat Cell Biol,24,448 -3,Irie N,Weinberger L,Tang WWC,Kobayashi T,Viukov S,Manor YS,Dietmann S,Hanna JH,Surani MA(2015 17是人类原始LOM LOM细胞脂肪的关键特征。单元格,160,253 -4, Sasaki k, yokayashi s, namurara t, okamoto i, yabot y, kurimoto k, ohta H, moritoki y, iwatani C, tsuciya h, nakura s, sekiguchi k, sakuma t, yamomomomomoto t, t, yamamoto s, yamamoto m, yamamoto m。 M((2015年)在体外耐心诱导人类生殖细胞脂肪中的人类生殖细胞脂肪。 细胞干细胞,17,178 - 5,Kobayashi T,Zhang H,Tang WWC,Irie N,Withey S,Klipsch D,Syrirna,Dietmann S,Contreras,Webb R,Erlelegio R,Ellelegio R,Soup MA (2 自然,546,416 - 6,Tang WWC,Castillo-Venzor A,Gruhn WH,Kobayashi T,Penfold CA,Morgan MD,Sun D,Irie N,Surani MA (20222222222222222,Sequeential Enlancer State reamoulines Remoulines remoulines hu-man enferine hu-man enterline能力和指定。 nat Cell Biol,24,448 -4, Sasaki k, yokayashi s, namurara t, okamoto i, yabot y, kurimoto k, ohta H, moritoki y, iwatani C, tsuciya h, nakura s, sekiguchi k, sakuma t, yamomomomomoto t, t, yamamoto s, yamamoto m, yamamoto m。 M((2015年)在体外耐心诱导人类生殖细胞脂肪中的人类生殖细胞脂肪。细胞干细胞,17,178 -5,Kobayashi T,Zhang H,Tang WWC,Irie N,Withey S,Klipsch D,Syrirna,Dietmann S,Contreras,Webb R,Erlelegio R,Ellelegio R,Soup MA (2自然,546,416 -6,Tang WWC,Castillo-Venzor A,Gruhn WH,Kobayashi T,Penfold CA,Morgan MD,Sun D,Irie N,Surani MA (20222222222222222,Sequeential Enlancer State reamoulines Remoulines remoulines hu-man enferine hu-man enterline能力和指定。nat Cell Biol,24,448 -7,Yamashiro C,Sasaki K,Yabuta Y,Kojima Y,成熟T,Okamoto I,Yokayashi S,Murase Y,Shirara Y,Shirane K,Sasaki K,Sasaki H,Sasaki H,Yamamoto T,Yamamoto T,Saitou M( 201818年)Pluripot pluripot pluripot pluripot celped pluripot pluripot cel celed pluripot pluripot celed pluripot celed细胞的pluripot卷成pluripot。科学,362,356 -8,Hwang YS,Suzuki S,Seita Y,ITTO J,Sa Sato Y,Dog Y,Sato K,Sato K,Hermann BP,Sasaki K (2020020020重建了繁荣症状的spefiification in Verrom,该spefiification in Verrom a Verrom受到了诱发的PACECACE PAMAPOPOTENT SPOS SPOS细胞。nat commun,11,Kobayashi T,Kobayashi H,Goto T,Takashima T,Oakawa M,Ikeda H,Terada R,Yoshida F,Sanbo M,Ukida H,Kurrimoto K,Hirabayashi M (2020 U 2020 U型生殖器开发Kobayashi T,Kobayashi H,Goto T,Takashima T,Oakawa M,Ikeda H,Terada R,Yoshida F,Sanbo M,Ukida H,Kurrimoto K,Hirabayashi M (2020 U 2020 U型生殖器开发
摘要:可编程核酸酶在基因编辑中的应用极大地改变了当前基础生物学和临床转化的研究。人类多能干细胞 (PSC)(包括胚胎干细胞 (ESC) 和诱导多能干细胞 (iPSC))中的基因编辑与临床细胞治疗高度相关,因此应特别谨慎地进行研究。首先,由于 PSC 中的所有突变都会传递给其所有后代,因此编辑器的脱靶编辑将被放大。其次,由于 PSC 对 DNA 损伤的高度敏感性,基因编辑造成的双链断裂 (DSB) 可能导致编辑效率低下和基因组保护缺陷的细胞群富集。在这方面,DSB 独立的基因编辑工具(如碱基编辑器和主要编辑器)因其避免这些后果的性质而受到青睐。随着对微生物世界的了解越来越多,Cas 相关核酸酶、转座子和重组酶等新系统也正在扩大基因编辑工具箱。在这篇综述中,我们讨论了可编程核酸酶在 PSC 中用于基因编辑的当前应用、研究人员为优化这些系统所做的努力,以及可能用于分化建模和治疗应用的新工具。
a 转化神经科学,卢森堡大学系统生物医学中心 (LCSB),卢森堡,卢森堡 b 牛津大学生理学、解剖学和遗传学系,英国 c 牛津大学 Kavli 纳米科学发现研究所,英国 d 土耳其巴勒克埃西尔大学医学院医学生物学系 e 发育和细胞生物学,卢森堡大学系统生物医学中心 (LCSB),卢森堡,卢森堡 f 转化神经变性科“Albrecht-Kossel”,罗斯托克大学医学中心神经病学系,罗斯托克,德国 g 分子和功能神经生物学,卢森堡大学系统生物医学中心 (LCSB),卢森堡,卢森堡 h 吕贝克大学神经遗传学研究所,吕贝克,德国 i 卢森堡医院中心,卢森堡 j 横向转化医学,卢森堡健康研究所 (LIH),卢森堡
摘要:背景:镰状细胞病 (SCD) 是一种由 HBB 基因点突变引起的高度流行的遗传性疾病,可导致慢性溶血性贫血和血管闭塞事件。患者来源的诱导性多能干细胞 (iPSC) 有望为开发具有抗镰状细胞活性的药物筛选新预测方法带来希望。在本研究中,我们评估并比较了使用健康对照和 SCD-iPSC 的 2D 和 3D 红细胞分化方案的效率。方法:对 iPSC 进行造血祖细胞 (HSPC) 诱导、红细胞祖细胞诱导和终末红细胞成熟。通过流式细胞术分析、菌落形成单位 (CFU) 测定、形态学分析和基于 qPCR 的 HBB 和 HBG2 基因表达分析来确认分化效率。结果:2D 和 3D 分化方案均诱导了 CD34 + /CD43 + HSPC。3D 方案对 HSPC 诱导表现出良好的效率 (>50%) 和高生产率 (45 倍),并增加了 BFU-E、CFU-E、CFU-GM 和 CFU-GEMM 集落的频率。我们还产生了 CD71 + /CD235a + 细胞 (>65%),与 3D 方案开始时相比,细胞扩增了 630 倍。红细胞成熟后,我们观察到 95% 的 CD235a + /DRAQ5- 去核细胞、正染色性红细胞,以及与成人 HBB 相比胎儿 HBG2 表达增加。结论:使用 SCD-iPSC 和比较分析确定了一种用于红细胞分化的稳健 3D 方案;然而,成熟步骤仍然具有挑战性,需要进一步开发。
©作者2023。开放访问。本文是根据Creative Commons归因4.0国际许可证的许可,该许可允许以任何媒介或格式的使用,共享,适应,分发和复制,只要您适当地归功于原始作者和来源,就可以提供与Creative Commons许可证的链接,并指出是否进行了更改。本文中的图像或其他第三方材料包含在文章的创意共享许可中,除非在信用额度中另有说明。如果本文的创意共享许可中未包含材料,并且您的预期用途不受法定法规的允许或超过允许的用途,则您需要直接从版权所有者那里获得许可。要查看此许可证的副本,请访问http:// creativecommons.org/licenses/4.0/。
大脑可以说是人体最复杂的部分形式和功能。对调节其正常生理和病理生理的分子机制尚不清楚。缺乏知识在很大程度上源于人脑的无法访问的本质以及动物模型的局限性。因此,脑部疾病很难理解,甚至更难治疗。产生人类多能干细胞(HPSC)衍生的二维(2D)和3维(3D)神经培养的最新进展提供了一个可访问的系统来模拟人脑。基因编辑技术(例如CRISPR/CAS9)的突破将HPSC进一步提升到了可遗传障碍的实验系统中。强大的遗传筛选,以前保留用于模型生物和转化的细胞系,现在可以在人神经细胞中进行。结合了快速扩展的单细胞基因组学工具包,这些技术进步最终创造了使用功能基因组学研究人脑前所未有的机会。本综述将总结在HPSCS衍生的2D神经培养物和3D脑器官中应用基于CRISPR的遗传筛查的目前进展。我们还将评估所涉及的关键技术,并讨论其相关的实验考虑和未来应用。
贫穷。最近,由于气候破坏,旋风,干旱和洪水的形式受到气候破坏影响,这种情况正在恶化。可持续使用资源已成为每个食品供应链领域的一个问题。人们经常遭受粮食短缺的困扰:有些是由自然灾害造成的,而另一些则是由于存储设施不佳而导致收获后过多的损失。因此,通过保护技术减少收获后的损失是达到结束饥饿(SDG 2)并确保可持续消费和生产模式的重要一步(SDG 12)。因此,需要廉价和疗养的食物的实用方法。可以通过使用太阳能等可再生能源来大幅度降低农产品的收获后损失。本文提出了使用太阳能干燥的审查和可能性,重点是莫桑比克的小型农民的技术需求。在这项研究中,可以得出结论,太阳能干燥是保护农产品的最有效,最具可再生和可持续技术的最有效,可再生和可持续的技术之一。然而,在莫桑比克使用的太阳能干燥机仅在太阳辐射的存在下才有用,在夜晚或阴天中无用。为了实现炎热干燥,必须集成热量。这样,它可以引发减轻贫困,体面工作机会,经济增长和减少不平等的希望。关键字:气候变化;环境;保留;太阳烘干机;太阳能。RESUMO
组氨酸生物合成的步骤(Sissler等,1999)。 与AS-A相反,HISZ仅在细菌156 中发现组氨酸生物合成的步骤(Sissler等,1999)。与AS-A相反,HISZ仅在细菌156