塑料污染已升级为全球环境危机,数百万吨合成聚合物在生态系统中积累,对生物多样性和人类健康构成重大威胁。传统的塑料废物管理方法,如机械和化学回收,在可持续性方面表现出局限性,特别是对于聚乙烯 (PE) 和聚苯乙烯 (PS) 等聚合物,它们表现出明显的抗降解性。利用微生物酶和合成生物学的生物技术方法为解决这一紧迫问题提供了一种有希望的替代方案。促进聚对苯二甲酸乙二醇酯 (PET) 降解的酶(如 PETase 和 MHETase)与针对更难降解塑料的漆酶和脂肪酶结合,在分子水平上分解塑料方面表现出了巨大的潜力。尽管取得了这些进展,但在降解效率方面仍然存在挑战,尤其是对于非 PET 塑料,以及扩大这些生物技术工艺的经济可行性。此外,温度、pH 值和氧气水平等环境参数显著影响酶的功能,而监管和社会障碍阻碍了转基因生物 (GMO) 的利用。尽管如此,蛋白质工程、基于 CRISPR 的基因编辑等新兴技术以及生物反应器等工业应用为克服这些挑战提供了途径。本文探讨了生物技术塑料降解的当前形势、挑战和前景,强调了其对实现全球循环经济目标和加强可持续废物管理战略的潜在贡献。
全球有机废物是由水果,蔬菜及其果皮产生的。它主要是在垃圾填埋场或堆肥方法中分解的。食品加工行业,蔬菜市场和餐馆每天生产大量有机废物,通常在环境或堆肥中处置。从有机厨房废物中生产出生态酶是用于家庭废物污染的创新解决方案。这是一种从含有有机酸,酶和矿物质盐的有机废物物质获得的酶溶液。它是通过进行简单的批处理发酵而产生的,该发酵涉及红糖,水果或蔬菜废物的混合物以及1:3:10的水。通过使用蔬菜和果皮发酵工艺产生两种类型的生态酶,约90天涉及酿酒酵母。获得的最终液体或酶为棕色。来自(Cucurbita Maxima)的生态酶1含有水解酶,例如淀粉酶和脂肪酶。观察到微生物的多样性,像耶尔森氏菌,芽孢杆菌和真菌一样的细菌(如trichoderma sp。和penicillium sp。在生态酶2(Citron)中观察到没有酶和微生物。Eco-enzyme 1具有50%稀释的生态酶1可有效降低各种参数,例如dra剂,COD,TDS,硝酸盐,硝酸盐,硝酸盐和铵。此外,与对照相比,它在10天内促进了植物的生长。因此,本研究概述了如何使用生态酶来治疗成本效益和环境友好的工业废水。
简介:肥胖可能导致相关的高风险疾病,例如心血管疾病,糖尿病,高血压,中风和癌症。肥胖是由于饮食过多而导致的。胰腺脂肪酶(PL)是一种酶,在将脂肪水解为单酰甘油和脂肪酸中起主要作用,可以吸收到小肠中。治疗肥胖症的一种策略之一是通过PL抑制减少脂肪的吸收。本研究旨在寻找能够减少脂肪吸收的选定马来西亚植物的潜在PL抑制剂。方法:使用Autodock Vina实际上筛选了潜在的PL抑制剂,以针对五种选定的柑橘类植物的植物化学化合物,即c。c.aurantifolia(C。aurantifolia),C。Grandis,C。Grandis,C。Medica,C。Medica,C。Hystrix和C. hystrix和C. microcarpa。结果:根据结合到三组的自由能进行分类:高,中和低抑制作用。八种化合物对PL表现出很高的活性。柑橘大的贡献最多的化合物,其次是C. Medica,C。Microcarpa,C。aurantifolia和C. hystrix。为了验证这些发现,对这些柑橘植物各个部分的15种甲醇提取物进行了体外生物测定。值得注意的是,C. medica的果实提取物在62.59%的情况下表现出最有效的PL抑制作用,这可能是由于存在二胺-6-C-葡萄糖苷。结论:总而言之,源自选定的柑橘类植物的小分子的虚拟筛选提供了对分子对接的有价值的见解,而C. medica则作为潜在的抗肥胖植物出现。
简介:长期非编码RNA(LNCRNA)在脑缺血再灌注(CI/R)损伤中起关键作用。当前研究的目的是研究CI/R损伤中LNCRNA人白细胞抗原复合物11(HCG11)的调节作用,并探索其潜在机制。材料和方法:建立大鼠中大脑中动脉闭塞(MCAO)模型以模拟体内CI/R损伤。通过定量逆转录PCR(RT-QPCR)检测到HCG11,microRNA(miR)-381-3p,肿瘤蛋白p53和神经炎症因子的mRNA水平。Bederson评分和LONGA评分评估了神经功能障碍。三苯基四唑氯化物(TTC)染色用于检查脑梗塞体积。更重要的是,商业试剂盒还评估了氧化应激。最后,通过双脂肪酶报告基因测定法测定了HCG11,miR-381-3p和p53之间的关系。结果:MCAO大鼠的HCG11升高。及其有竞争力地绑定miR-381-3p,并下调了p53的表现。抑制HCG11抑制了MCAO大鼠的脑梗死体积和神经功能缺陷,并抑制了神经炎症的分泌和氧化应激的过度激活,从而产生了CI/R损伤的保护作用。然而,大鼠中miR-381-3p的抑制显着削弱了MCAO大鼠HCG11抑郁症的保护作用,从而导致脑梗塞量增加和神经系统缺陷增加,神经炎症分泌升高,氧化应激激活。结论:本研究表明,LNCRNA HCG11沉默可以通过miR-381-3p预防脑缺血/再灌注损伤以调节p53。
缩写:%,百分比; 4E-BP1,真核翻译起始因子4E结合蛋白; Akt,蛋白激酶B; B-CHP,胶原蛋白杂交肽; CD31,分化簇31; CER,神经酰胺;蛤,哥伦布仪器综合实验室动物监测系统; CM,文化媒体; Col-IV,胶原蛋白IV; CSA,横截面区域; dag,二甘油二酸酯; DAPI,4',6-Diamidino-2-苯基吲哚; ERK1/2,细胞外信号调节的激酶1/2; E-WAT,附子脂肪垫; FBXO32,F-box蛋白32; foxo3a,叉子盒O3; GTT,葡萄糖耐量测试; H,小时; H&E,苏木精和曙红; HOMA-IR,胰岛素抵抗的稳态模型评估; HSL,激素敏感脂肪酶;如果,免疫荧光; IL-6,白介素6; i-wat,腹股沟脂肪垫;最小,分钟; MTOR,雷帕霉素的机械靶标; Musa1,F-box蛋白30; MyHC,肌球蛋白重链; NMR,核磁共振; OCT,最佳切割温度化合物; p/t,磷酸化; PAX7,配对盒蛋白PAX-7; PGC-1α,过氧化物酶体增殖物激活的受体 - 伽马共振剂1α; QPCR,实时聚合酶链反应; RER,呼吸道交换比; RNA,核糖酸; RPS6K,核糖体结合蛋白S6激酶B1;标签,甘油三酸酯; TRAF6,肿瘤坏死因子受体相关因子6; USP,美国药品; VCO 2,二氧化碳生产; VO 2,消耗氧。
古老的益生菌饮料康普茶(KT)的普及部分原因是其所谓的健康益处,其中包括防止代谢性疾病的保护;但是,这些主张尚未经过严格测试,并且尚不清楚宿主对益生菌的基础机制。在这里,我们建立了一种可再现的方法来维护c。秀丽隐杆线虫专门由康普茶相关的微生物(KTM)组成,它反映了发酵文化中发现的微生物群落。kt微生物可靠地定居KTM喂养的动物的肠道,并赋予正常发育和繁殖力。有趣的是,消耗KTM的动物在总脂质储存和脂质液滴尺寸中显示出明显的减少。我们发现,减少的脂肪积累表型不是由于营养吸收受损而导致的,而是由于宿主的肠道中编程的代谢反应而维持的。ktm消耗触发了核心脂质代谢途径内的广泛转录变化,包括上调在脂肪噬菌期间诱导的一组溶菌丝脂酶基因。升高的溶酶体脂肪酶活性,再加上脂质液滴生物发生的降低,是宿主脂质含量降低所必需的。我们提出,KTM消耗刺激了C中的类似禁食的响应。秀丽隐杆线肠道通过重新启动转录程序来促进脂质利用。我们的结果提供了有关康普茶茶中的益生菌如何改造宿主代谢以及这种流行饮料如何影响人类新陈代谢的机械见解。
CRISPR/Cas9 已实现多种组织中的可诱导基因敲除;然而,尚未有其在棕色脂肪组织 (BAT) 中的应用报道。在此,我们开发了棕色脂肪细胞 CRISPR (BAd-CRISPR) 方法来快速检测一个或多个基因的功能。使用 BAd-CRISPR,将表达单向导 RNA (sgRNA) 的腺相关病毒 (AAV8) 直接施用于在棕色脂肪细胞中表达 Cas9 的小鼠的 BAT。我们表明,将 AAV8-sgRNA 局部施用于成年小鼠的肩胛间 BAT 可强有力地转导棕色脂肪细胞,并使脂联素、脂肪甘油三酯脂肪酶、脂肪酸合酶、周脂素 1 或硬脂酰辅酶 A 去饱和酶 1 的表达降低 90% 以上。施用多个 AAV8 sgRNA 可同时敲除多达三个基因。 BAd-CRISPR 诱导移码突变并抑制靶基因 mRNA 表达,但不会导致 BAT 中脱靶突变的大量积累。我们利用 BAd-CRISPR 创建了可诱导的解偶联蛋白 1 (Ucp1) 敲除小鼠,以评估 UCP1 缺失对成年小鼠适应性产热的影响。可诱导的 Ucp1 敲除不会改变核心体温;然而,BAd-CRISPR Ucp1 小鼠的成纤维细胞生长因子 21 循环浓度升高,并且 BAT 基因表达发生变化,与通过增加过氧化物酶体脂质氧化而产生的热量一致。其他分子适应性预示着额外的细胞效率低下,蛋白质合成和周转增加,线粒体对线粒体编码基因表达的依赖降低,核编码线粒体基因表达增加。这些数据表明 BAd-CRISPR 是一种加速脂肪组织生物学发现的有效工具。
摘要 从埃及土壤和食物来源中分离出产生磷脂酶 C (PLC) 的细菌。通过 16S rRNA 测序,将一种强效假单胞菌分离物鉴定为 P. fluorescens MICAYA,并以基因登录号 (OQ231499) 记录在 GenBank 中。通过 Plackett Burman 和中心复合设计进行优化发现,豆粕、酵母提取物、NaCl 和蛋黄显著提高了磷脂酶 C 的产量。Michaelis-Menten 动力学确定了 K m 为 0.4 mg/ml 蛋黄,V max 为 287 U/ml。Box Behnken 设计确定了 395 U/ml 磷脂酶 C 产量的最佳 pH 值为 6.5、0.55 g/l CaCO 3、1.05% 蛋黄、48.5°C。该磷脂酶对人成纤维细胞表现出低细胞毒性。磷脂酶 C 浓度(0.2-1 ml)可有效脱胶芝麻、洋甘菊、西洋菜、荷荷巴油、橄榄、黑种草和蓖麻油。磷脂酶 C 浓度为 0.4-0.8 ml/L 时磷脂减少率最高。荧光假单胞菌磷脂酶 C 提供了一种可生物降解的化学脱胶替代方法。总之,统计优化成功提高了磷脂酶 C 的产量。表征发现该酶在碱性 pH、中等温度和蛋黄底物下效果最佳。已证明多种植物种子油具有生物脱胶能力。进一步固定化和蛋白质工程可以提高磷脂酶 C 的工业效用。关键词:磷脂酶 C;荧光假单胞菌;培养基优化;油脱胶;酶动力学。 _____________________________________________________________________________________________________________ 1. 简介 磷脂酶 (PLC) 水解磷脂骨架中的磷酸二酯键,根据所涉及的具体磷脂种类产生 1,2-二酰基甘油和磷酸单酯。微生物磷脂酶是催化磷脂水解的酶。由于其广泛的底物特异性、温和条件下的高活性以及易于大规模生产,它们具有广泛的工业应用 [1]。磷脂酶已被用于修改磷脂结构以生产特定脂质、脱胶植物油、合成化妆品成分、改善面团的烘焙特性、产生风味和香气等 [2]。真菌、细菌和酵母等微生物来源的磷脂酶比植物和动物来源具有优势,因为它们可以通过发酵以高产量和纯度生产 [3]。最有效的真菌生产者是黑曲霉、环青霉和少根根霉。黑曲霉可产生高产量的磷脂酶 A1 和 A2 [4]。固定化黑曲霉磷脂酶 A2 对植物油的重复脱胶表现出良好的稳定性 [5]。最常见的细菌生产者是假单胞菌和芽孢杆菌。铜绿假单胞菌和蜡状芽孢杆菌产生胞外磷脂酶 C [6,7]。枯草芽孢杆菌分泌磷脂酶 A2,并且已经通过基因改造以提高产量。在稳定期,荧光假单胞菌可以产生各种具有抗菌潜力的次级代谢物,例如氢氰酸 (HCN)、绿脓杆菌素 (Pit) 和 2,4-二乙酰间苯三酚 (Phi),以及铁螯合代谢物 [8]。绿脓杆菌素、水杨酸和绿脓杆菌素。蛋白酶、磷脂酶 C 和脂肪酶是从各种环境中分离的荧光假单胞菌菌株产生的三种细胞外酶的例子 [9]。在稳定生长期测定的磷脂分解活性水平最高,表明生长阶段依赖机制负责诱导这些酶。此外,酵母生产者是隐球菌,它被固定化并用于大豆油脱胶。 Candida rugosa 是一种脂肪酶和磷脂酶生产者,固定化 C. rugosa 脂肪酶用于结构化脂质的生产 [10]。微生物磷脂酶,如磷脂酶 A1、A2、C 和 D,在脱胶、油脂酯交换、卵磷脂生物合成和废水处理应用中表现出良好的应用前景 [11]。它们的酶水解导致磷脂部分水解,使胶的分离更容易 [12]。响应面法 (RSM) 被有效地用于各种微生物产品的优化和建模 [13]。该方法结合了统计和数学技术,用于模型构建、评估几个独立变量的影响并获得变量的最优值。因此,本研究的目的是利用响应面法的统计方法优化荧光假单胞菌磷脂酶 C 的生产和表征,并研究其在某些植物油脱胶中的应用。油脂的酯交换、卵磷脂的生物合成和废水处理应用 [11]。它们的酶水解导致磷脂的部分水解,使胶的分离更容易 [12]。响应面法 (RSM) 被有效地用于各种微生物产品的优化和建模 [13]。该方法结合了统计和数学技术,用于模型构建、评估几个独立变量的影响并获得变量的最优值。因此,本研究的目的是利用响应面法的统计方法优化荧光假单胞菌磷脂酶 C 的生产和特性,并研究其在某些植物油脱胶中的应用。油脂的酯交换、卵磷脂的生物合成和废水处理应用 [11]。它们的酶水解导致磷脂的部分水解,使胶的分离更容易 [12]。响应面法 (RSM) 被有效地用于各种微生物产品的优化和建模 [13]。该方法结合了统计和数学技术,用于模型构建、评估几个独立变量的影响并获得变量的最优值。因此,本研究的目的是利用响应面法的统计方法优化荧光假单胞菌磷脂酶 C 的生产和特性,并研究其在某些植物油脱胶中的应用。
在这项研究中,研究了叶黄素和富马酸亚铁对黄河鲤鱼(Cyprinus carpio)的影响,旨在评估皮肤色素沉着,肠道消化酶,肠道微生物多样性和生长性能。设计了三种实验饮食,包括对照组,一组150mg/kg叶黄素)以及叶黄素和富马酸铁蛋白酶混合物(150mg/kg叶黄素和100mg/kg富马酸铁酸铁酸铁酸酯)。用实验饮食喂食42天的鲤鱼(n = 135; 25.0±2.0g)。结果表明,与对照组相比,与对照组(P <0.05相比,与蓝色(b*),颜色差异(δe)和Chroma(δe)和乳头较高的值相比,蛋白质的无关指数(ISI)和内脏指数(ISI)和内脏指数(VSI)增加,伴随着蓝色(B*),色差(δe)和Chroma(CH*)的较高价值(与对照组相比(P <0.05)相比,身体颜色的显着变化。同时,在混合物组中观察到淀粉酶,脂肪酶和胰蛋白酶的较高活性(p <0.05)。高通量测序和维恩图表明,叶黄酸或亚铁富马酸盐对鲤鱼的肠道微生物群具有明显的影响。与对照组相比,与混合物组相比,用混合物组的鲤鱼中的静脉细菌和黄杆菌的丰度显着增加。总而言之,在饲料中添加叶黄素和富马酸亚铁可以改变黄河鲤鱼的皮肤色素沉着和肠道微生物组成,从而增强鱼类的着色效果和消化功能。这些发现为优化饲料配方和水产养殖管理提供了宝贵的见解,这可以有助于提高黄河鲤鱼的质量和农业效率。
患者1:2021年1月,一名具有肥胖史的16岁女性(BMI = 46.1),代谢综合征和最近的Covid-19感染(2个月前),急诊科(ED)伴有糖尿病性酮症酸酸(ED),患有糖尿病性酮症酸病(DKA)和高渗透性超乳清性高血糖综合症(HHS)。她在3小时后的GCS = 10后变得无反应。在演示文稿中,实验室值为淀粉酶1231 U/L,脂肪酶4274 U/L,葡萄糖> 2000 mg/dl,pH 7.080,HCO3 9 mmol/L,AST 20 U/L,Alt 27 U/L,Alt 27 U/L,BUN 45 mg/dl,CR 6.1 mg/dl,Cr 6.1 mg/dl,和Hba 1 12.3%。腹部和骨盆的CT扫描显示出急性坏死性胰腺炎。尽管流体的维持率为1.5倍,肌酐仍在继续增加(6.1至7.2 mg/dl),并且尿量最小(<50 mL)。患者需要插管和机械通气,这是由于低血压(80-90/50)和呼吸衰竭而导致的。连续肾脏替代疗法(CCRT)是由于肾衰竭和电解质紊乱而开始的。她在过渡到每周3倍的透析时间表之前,接受了持续的低效率透析(雪橇)8天。在她46天住院的过程中,肾功能逐渐改善,并通过适当的尿量和电解质的标准化;因此,透析在23天后停止。她在氨氯地平,加巴喷丁和胰岛素方案上出院。出院四个月后,她被诊断出患有本质高血压,并开始使用赖诺普利(Lisinopril)。她之后是儿科肾脏病和内分泌学来管理她的慢性疾病。她的血糖继续保持升高,患者报告偶尔不遵守药物。