摘要 从埃及土壤和食物来源中分离出产生磷脂酶 C (PLC) 的细菌。通过 16S rRNA 测序,将一种强效假单胞菌分离物鉴定为 P. fluorescens MICAYA,并以基因登录号 (OQ231499) 记录在 GenBank 中。通过 Plackett Burman 和中心复合设计进行优化发现,豆粕、酵母提取物、NaCl 和蛋黄显著提高了磷脂酶 C 的产量。Michaelis-Menten 动力学确定了 K m 为 0.4 mg/ml 蛋黄,V max 为 287 U/ml。Box Behnken 设计确定了 395 U/ml 磷脂酶 C 产量的最佳 pH 值为 6.5、0.55 g/l CaCO 3、1.05% 蛋黄、48.5°C。该磷脂酶对人成纤维细胞表现出低细胞毒性。磷脂酶 C 浓度(0.2-1 ml)可有效脱胶芝麻、洋甘菊、西洋菜、荷荷巴油、橄榄、黑种草和蓖麻油。磷脂酶 C 浓度为 0.4-0.8 ml/L 时磷脂减少率最高。荧光假单胞菌磷脂酶 C 提供了一种可生物降解的化学脱胶替代方法。总之,统计优化成功提高了磷脂酶 C 的产量。表征发现该酶在碱性 pH、中等温度和蛋黄底物下效果最佳。已证明多种植物种子油具有生物脱胶能力。进一步固定化和蛋白质工程可以提高磷脂酶 C 的工业效用。关键词:磷脂酶 C;荧光假单胞菌;培养基优化;油脱胶;酶动力学。 _____________________________________________________________________________________________________________ 1. 简介 磷脂酶 (PLC) 水解磷脂骨架中的磷酸二酯键,根据所涉及的具体磷脂种类产生 1,2-二酰基甘油和磷酸单酯。微生物磷脂酶是催化磷脂水解的酶。由于其广泛的底物特异性、温和条件下的高活性以及易于大规模生产,它们具有广泛的工业应用 [1]。磷脂酶已被用于修改磷脂结构以生产特定脂质、脱胶植物油、合成化妆品成分、改善面团的烘焙特性、产生风味和香气等 [2]。真菌、细菌和酵母等微生物来源的磷脂酶比植物和动物来源具有优势,因为它们可以通过发酵以高产量和纯度生产 [3]。最有效的真菌生产者是黑曲霉、环青霉和少根根霉。黑曲霉可产生高产量的磷脂酶 A1 和 A2 [4]。固定化黑曲霉磷脂酶 A2 对植物油的重复脱胶表现出良好的稳定性 [5]。最常见的细菌生产者是假单胞菌和芽孢杆菌。铜绿假单胞菌和蜡状芽孢杆菌产生胞外磷脂酶 C [6,7]。枯草芽孢杆菌分泌磷脂酶 A2,并且已经通过基因改造以提高产量。在稳定期,荧光假单胞菌可以产生各种具有抗菌潜力的次级代谢物,例如氢氰酸 (HCN)、绿脓杆菌素 (Pit) 和 2,4-二乙酰间苯三酚 (Phi),以及铁螯合代谢物 [8]。绿脓杆菌素、水杨酸和绿脓杆菌素。蛋白酶、磷脂酶 C 和脂肪酶是从各种环境中分离的荧光假单胞菌菌株产生的三种细胞外酶的例子 [9]。在稳定生长期测定的磷脂分解活性水平最高,表明生长阶段依赖机制负责诱导这些酶。此外,酵母生产者是隐球菌,它被固定化并用于大豆油脱胶。 Candida rugosa 是一种脂肪酶和磷脂酶生产者,固定化 C. rugosa 脂肪酶用于结构化脂质的生产 [10]。微生物磷脂酶,如磷脂酶 A1、A2、C 和 D,在脱胶、油脂酯交换、卵磷脂生物合成和废水处理应用中表现出良好的应用前景 [11]。它们的酶水解导致磷脂部分水解,使胶的分离更容易 [12]。响应面法 (RSM) 被有效地用于各种微生物产品的优化和建模 [13]。该方法结合了统计和数学技术,用于模型构建、评估几个独立变量的影响并获得变量的最优值。因此,本研究的目的是利用响应面法的统计方法优化荧光假单胞菌磷脂酶 C 的生产和表征,并研究其在某些植物油脱胶中的应用。油脂的酯交换、卵磷脂的生物合成和废水处理应用 [11]。它们的酶水解导致磷脂的部分水解,使胶的分离更容易 [12]。响应面法 (RSM) 被有效地用于各种微生物产品的优化和建模 [13]。该方法结合了统计和数学技术,用于模型构建、评估几个独立变量的影响并获得变量的最优值。因此,本研究的目的是利用响应面法的统计方法优化荧光假单胞菌磷脂酶 C 的生产和特性,并研究其在某些植物油脱胶中的应用。油脂的酯交换、卵磷脂的生物合成和废水处理应用 [11]。它们的酶水解导致磷脂的部分水解,使胶的分离更容易 [12]。响应面法 (RSM) 被有效地用于各种微生物产品的优化和建模 [13]。该方法结合了统计和数学技术,用于模型构建、评估几个独立变量的影响并获得变量的最优值。因此,本研究的目的是利用响应面法的统计方法优化荧光假单胞菌磷脂酶 C 的生产和特性,并研究其在某些植物油脱胶中的应用。
与年龄相关的形态学大脑变化在健康和疾病的衰老中是不同的。MRI扫描中的生物脑年龄估计是量化这种效果的一种常见方法,而生物和年代年龄之间的差异表示脱胶过程。直接可视化和分析图像空间中与形态年龄相关的变化的能力对于提高对脑衰老的理解至关重要。在这项工作中,我们提出了一种基于深度学习的新方法,以在单个一致的模型中统一生物脑年龄估计和年龄条件的模板创建。我们通过开发确定性的自动编码器来实现这一目标,该自动编码器成功地解散了与年龄相关的形态变化和主体特定的变化。这允许其用作脑年龄回归和生成性脑老化模型。提出的方法表明,当应用于2000多个受试者的数据库时,将年龄条件的脑模板和模拟年龄的大脑图像的现实产生以及模拟年龄的大脑图像进行了现实。关键字:大脑老化,深度学习,生成模型
在石墨烯中,与量子大厅(QH)方向上的自旋和山谷自由度相关的近似SU(4)对称性在石墨烯Landau水平(LLS)的四重脱胶中反映了。相互作用和Zeeman效应打破了这种近似对称性并提高LLS的相应堕落性。我们研究了近似SU(4)对称的破裂如何影响位于超导体附近的石墨烯QH边缘模式的性质。我们展示了四倍变性的提升是如何定性地修改QH-螺旋导体异质结的运输特性。对于零LL,通过将边缘模式放置在靠近超导体的位置,从原则上讲,在存在较小的Zeeman Field的情况下,可以实现支撑Majoranas的一维拓扑超导体。我们估计了这种拓扑超导体的拓扑间隙,并将其与QH-Superconductor界面的性质相关联。
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蛋白质聚集体的prion虫是大脑中神经原纤维病变传播的主要假设,包括与阿尔茨海默氏病有关的tau包含物的扩散。tau种子的细胞摄取机制和随后的胞质tau的成核聚合是该领域的主要问题,并且很少探索进入入口和成核机制之间的电位。我们发现,在原发性星形胶质细胞和神经元中,tau种子的内吞作用会导致它们在溶酶体中的积累。这反过来导致溶酶体肿胀,脱胶和募集ESCRT蛋白,但不能导致乳糖素-3到达溶酶体膜。这些观察结果与溶酶体膜的纳米级损伤一致。活细胞成像和暴风雨末分辨率显微镜进一步表明,在这些条件下,胞质tau的成核主要发生在溶酶体膜上。这些数据表明,tau种子通过纳米级损伤从溶酶体中逃脱而不是批发破裂,并且一旦Tau纤维末端从溶酶体膜出现,胞质Tau的成核就开始了。
摘要。冰川终止以气候系统不同组成部分的重组为特征。特别是,快速的冰盖瓦解会导致误解的反馈回路,这些反馈循环仍然很少了解。为了进一步研究这一方面,我们在这里使用了完全构成的北半球冰盖模型,以形成最后两个冰川终止的数值实验。我们表明,即使这两个终止的一阶气候轨迹相似,太阳日光差的差异也会导致冰原 - 气候系统的重要变化。在倒数第二次终止期间温度较高,与全新世的最后一次冰河间期间的海平面兼容。我们将最后一次对海平面上升约2 m的海平面上升的冰川绿地贡献。我们还模拟了南大洋的温暖地下,与南极冰盖的副作用兼容。,即使没有考虑冰盖融化而导致的海洋淡水浮游,这两个终止却散发出不同的大西洋推翻循环敏感性,这种循环在五次终止期间更容易占用。最后,在额外的灵敏度实验中,我们表明,对于这两个终止,即使还需要考虑植被变化以模拟整个脱胶裂解,北半球的灭绝也是冰盖重新治疗的主要驱动力。相反,即使它影响温度,温室气体的浓度也单独变化也不能解释冰盖撤退的幅度,而只能调节其时间安排。