NORGEN的纯化技术纯化基于自旋色谱柱色谱法。优先从其他细胞成分(例如基因组DNA和RNA)中纯化质粒DNA。该过程涉及首先颗粒的隔夜细菌培养物具有质粒DNA(请参阅第3页的流程图)。然后,使用提供的重悬溶液AZ重悬细菌颗粒,并使用裂解缓冲液N进行细菌。然后添加缓冲液。然后添加缓冲液TN,从而导致溶液中存在的基因组DNA和蛋白质。然后通过离心阐明裂解物,以去除含有质粒DNA的裂解物中的沉淀蛋白和基因组DNA。然后将澄清的裂解物加载到自旋柱上。Norgen的柱以取决于离子浓度的方式结合DNA,因此,只有质粒DNA才能与柱结合,而大多数消化的RNA和蛋白质将在流动中除去或保留在柱床的顶部。然后用提供的洗涤溶液J洗涤结合的DNA,以去除剩余的杂质。最后,无内毒素纯化的质粒DNA用洗脱缓冲液洗脱。纯化的DNA是最高质量的,可用于许多下游应用,包括测序,克隆和转染。
a。离心技术:原理,差异离心,密度梯度离心,超中心及其在生物系统中的应用。b。色谱技术:色谱技术的原理类型,例如色谱柱,薄层,纸张,吸附,分区,气体液体,离子交换,亲和力,高性能及其应用。c。光度法和色彩法的原理和技术:啤酒和兰伯特法律,可见和超劣酸酯分光光度计,光谱荧光测定法,荧光法,磷光,磷光,化学发光,涡轮纤维化肾上腺仪,火焰光量原子量原子量原子原子原子吸收量及其应用。d。核磁共振,电子自旋谐振晶体学,质谱法,串联质谱,纳米技术和微结构,研究体内代谢中的技术,NMR,SPECT,PET,PET扫描:原理,仪器,仪器,技术,技术和应用,e。放射性原理:性质和类型,衰减速率放射性衰减,放射性单位,检测和测量,无线电活动,辐射危害及其在生物系统中无线电活动和无线电同位素的预防应用。f。电泳,原理,类型及其在生物系统中的应用。
摘要:已经开发了一种高分辨率传输电子显微镜(HR-TEM)和高分辨率扫描传输电子显微镜(HR-STEM)图像的互惠空间处理方法。命名为“绝对应变”(Abstrain),它可以通过用户定义的Bravais晶格对平面间距离和角度,移位场以及应变张量组件进行定量和映射,并从特定于HR-TEM和HR-STEM成像的图像扭曲中进行校正。我们提供相应的数学形式主义。抽象超出了对现有方法的限制,即通过对感兴趣区域进行直接分析,而无需在同一视野上具有相似晶体结构的参考晶格边缘。此外,对于由两种或多种原子组成的晶体,每个原子都有其自身的子结构约束,我们开发了一种名为“相对位移”的方法,用于提取与一种原子类型的亚晶状体和测量原子色谱柱相关的子晶状体,并与与Bravais lattice lattice lattice lattice或另一个子结构相关的原子柱相关。证明了抽象和相对位移在功能性氧化物铁电异质结构的HR-STEM图像中的成功应用。
摘要。我们探讨了模型的对流层羟基(OH)浓度趋势的敏感性,对陨石和近期气候锻炼(NTCFS),即甲烷(CH 4)氮氧化物(no x = no x = no x = no 2 + no 2 + no)碳二碳(CO),非甲氧化型和异源性有机型(NM)。 (ODS),使用地球物理动力学实验室(GFDL)的大气化学 - 气候模型,由第六次耦合模型对比计划(CMIP6)开发的排放清单(CMIP6)驱动的大气模型4.1版(AM4.1),并由经过的经验的Sater Surpery Project (AMIP)模拟。我们发现,从1980年到2014年,全球模型的对流层空气加权平均值[OH]增加了约5%。我们发现,没有X排放和CH 4浓度主导着建模的全球趋势,而CO排放和流星学对于推动区域趋势也很重要。对流层NO 2色谱柱趋势在很大程度上与从臭氧监测仪器(OMI)卫星中检索的趋势一致,但是模拟的CO列趋势通常高估了从对流层(Mo-Pitt)卫星中污染测量的测量结果,可能会反射出偏见,尤其是派出了派出了越来越多的派出了众多的派出量,尤其是派出了派出了派出的派出。
药理学化合物中的有机,无机和残留溶剂杂质来源已被国际协调理事会分为类别。药物部门面临调节障碍,因为有机污染物可能是基因毒素。检测和方法开发也验证了teriflunomide色谱分离过程中产生的有机污染物的验证是这项工作的主要目标。使用二极管阵列检测器和反相高性能液相色谱进行杂质研究。在25°C的色谱柱温度下,通过梯度分离成功实现了C18 ymc-pack ODS柱。用作流动相,乙腈和0.015 M磷酸钾磷酸钾,pH为3.5。采用了210 nm检测器波长和1.0 mL/分钟的流量。使用经过验证的分析方法成功分离了六种相关的杂质,分辨率和保留时间在35分钟以下。teriflunomide,Teriflunomide阶段1和杂质D已建立了分析技术,范围分别为0.066–3.262、0.035–1.880和0.025-1.255 µg/ml。teriflunomide,Teriflunomide阶段1和杂质-D具有不同的检测限制,定量值的限制为0.0037和0.0096、0.0016和0.0016和0.0051,以及0.0011和0.0033 µg/ml。确认的分析方法可以有效地识别任何制造过程杂质。
更深入地了解色谱吸附剂的纳米级和中观级结构以及介质中蛋白质的分布,对于从机制上理解使用这些材料的分离过程至关重要。使用传统技术来表征这种规模的介质结构和其中的蛋白质吸附具有挑战性。在本研究中,我们提出了一种新颖的树脂表征技术,该技术能够在典型的色谱条件下原位测量树脂内吸附蛋白质层的结构。设计并制造了一个石英流通池,用于小角度中子散射 (SANS),以便在单克隆抗体吸附过程中测量二氧化硅基蛋白质 A 色谱树脂的纳米级到中观级结构。我们能够使用对比匹配方法实时检查不同蛋白质负载和洗涤缓冲液下树脂的孔间(˜ 133 nm)和孔径(˜ 63 nm)相关性以及平面吸附抗体分子(˜ 4.2 nm)相关性。当将 0.03 M 磷酸钠与 1 M 尿素和 10% 异丙醇缓冲液(pH 8)作为洗涤缓冲液引入系统时,它会破坏系统的秩序,导致吸附抗体部分展开,这可以通过平面蛋白质相关性的丧失来证明。该方法为研究色谱树脂内的纳米级结构和配体固定提供了新方法;也许最重要的是了解在复制色谱柱的样品环境中,在不同流动相条件下吸附蛋白质在介质中的原位行为。
摘要目的:我们正在进行的研究旨在建立一种经过验证的方法,用于测量使用UPLC MS/MS的等离子体中的Empagliflozin。材料和方法:钠葡萄糖CO转运蛋白抑制剂(SGLTI),一种新型的糖尿病药物。非胰岛素依赖性糖尿病和成年糖尿病是2型糖尿病的先前名称。empagliflozin是第一个SGLT2抑制剂一种药物,它降低了心血管风险2型糖尿病和先前存在的心血管疾病的风险。empagliflozin D4作为内部溶液(IS)。液态萃取用于在Synergi上分离2.5µ融合 - 反向相100A(100 mm×2.0 mm),2.5 µm色谱柱。甲醇的混合物:作为流动相,使用75:25体积比的0.2%甲酸。流速设置为0.3µL/min。校准曲线是线性和绘制的。结果:开发的方法是从人血浆溶液中确定雌激素的准确,精确,灵敏的方法。HPLC级中乙酸乙酸乙酯和水是雌激素的首选溶剂。用离心机和LV氮蒸发剂用乙酸乙酯和水进行LLE提取。乙酸乙酯用作非极性溶剂,水用作极性溶剂进行液体液体提取。lle是一个低成本提取过程,与固体液体提取相比。报告的方法适用于生物等效性和药代动力学研究。
已经开发出一种新的、精确的、准确的、特定的、耐用的和灵敏的等度 RP-HPLC 稳定性指示方法,随后根据 ICH 指南对其进行了验证,用于测定 API 和药物剂型中的瑞莫格列净和二甲双胍。在反相 Zorbax C18(250 mm x 4.6 mm)5µm 粒度色谱柱作为固定相和流动相、甲醇:磷酸盐缓冲液 pH-4.2(80:20 v/v)上实现分离,优化的其他条件为:流速(1.0 ml/分钟)、波长(250 nm),运行时间保持在七分钟。发现瑞莫格列净和二甲双胍的保留时间分别为 2.46 分钟和 4.32 分钟。通过研究药物在酸性、碱性、过氧化物、中性、热和紫外线条件下的降解来确定药物的稳定性。经发现,所开发的方法在 20-100µg/ml 范围内具有线性,在 40-120µg/ml 范围内具有线性,相关系数 (r 2 ) 为 0.999。经发现,雷莫格列净依碳酸盐和二甲双胍的回收率在 98-102% 范围内,证实了该方法的准确性。经发现,雷莫格列净依碳酸盐和二甲双胍的药物剂型纯度百分比为 99.87%。经发现,雷莫格列净依碳酸盐的检测限和定量限分别为 0.75µg/ml 和 3.30µg/ml,二甲双胍的检测限和定量限分别为 1.56µg/ml 和 6.28µg/ml。按照 ICH 指南对所开发方法的灵敏度、准确度、范围、精确度、稳健性、耐用性、稳定性、特异性、检测限、定量限和系统适用性参数进行了验证。
11. 测试方法摘要 11.1 碳在氧气流中燃烧转化为二氧化碳。 11.1.1 热导率测试方法——二氧化碳被适当等级的沸石吸收,通过加热沸石释放,并被氦气或氧气吹入色谱柱。洗脱后,在热敏电阻型电导池中测量二氧化碳的量。参考图 1。 11.1.2 红外线 (IR) 吸收,测试方法 A——二氧化碳的量通过红外线 (IR) 吸收来测量。二氧化碳 (CO 2 ) 吸收红外光谱中精确波长的红外能量。当气体通过传输红外能量的池体时,此波长的能量被吸收。所有其他红外能量都被精确的波长滤波器消除,不会到达检测器。因此,红外能量的吸收只能归因于 CO 2 ,其浓度通过检测器上的能量变化来测量。一个电池既用作参比室,又用作测量室。在一段时间内,对总碳(以 CO 2 表示)进行监测和测量。参见图 2。11.1.3 红外 (IR) 吸收,测试方法 B — 检测器由一个 IR 能量源、一个独立的测量室和参比室,以及一个用作平行板电容器一个板的隔膜组成。在样品燃烧过程中,CO 2 及其氧气载体流过测量室,而只有氧气流过参比室。来自 IR 源的能量穿过两个室,同时到达隔膜(电容器板)。部分 IR 能量被测量室中的 CO 2 吸收,而穿过参比室时则不会被吸收。这会造成到达隔膜的 IR 能量不平衡,从而使隔膜变形。这种变形会改变固定电容,产生电信号变化,该变化被放大以用于测量 CO 2 。在一段时间内,对总碳(以 CO 2 表示)进行监测和测量。参考图 3。
理论,原理和可见光谱,红外光谱,光谱 - 粉末法,火焰e m i s s s i s s i s i s i s i s p e c t r o s c o p y a n a n a t a t a t a t a t a t a t a t a t o m i c a b i c a b i c a b s o i c a b s o r p t i o n光谱,NMR光谱,质量光谱;色谱:纸色谱,薄层色谱,离子交换色谱,色谱柱色谱,气相色谱,HPLC和电泳:纸电泳,凝胶电泳,毛细管电泳和区域电泳,X射线晶体学;免疫学测定:RIA,ELISA单元2。制药行业中的监管事务文件,产品批准的监管要求,批准后监管事务,非临床药物开发,临床试验;质量系统和审核在药品制造环境中的作用;供应商和生产部门的审核,微生物实验室的审核;质量保证和工程部门的审核3.药物输送系统持续释放(SR)和受控释放(CR)配方:费率控制的药物输送系统:胃遗传药物输送系统,眼药输送系统:透皮药物输送系统,蛋白质和肽递送,疫苗输送系统4.Modern Pharmaceutics: - Pre formulation Studies, Drug Stability, Validation, cGMP & Industrial Management, Study of consolidation parameters : Diffusion parameters, Dissolution parameters and pharmacokinetic parameters, Heckel plots, Similarity factors – f2 and f1, Higuchi and Peppas plot, Linearity concept of significance, Standard deviation, Chi square test, students T-test, ANOVA test.单元5。高级药物分析