EvaGreen® 荧光 DNA 染色剂的浓度为 100 µM。使用前请彻底旋涡 EvaGreen® 荧光 DNA 染色剂。建议在最终测定中使用 1 - 1.5 µM 的 EvaGreen® 浓度。每次测定时,按照下表所示添加 EvaGreen® 荧光 DNA 染色剂。请注意,在定量 PCR 反应中,预混液的制备可能至关重要,以减少移液误差。在检测仪器上选择 EvaGreen®、SYBR® GREEN 或 FAM 的光学设置。
抽象神经元通过包装到突触囊泡(SVS)中的小分子神经递质的活动依赖性释放来传达。尽管许多分子已被鉴定为神经递质,但技术局限性排除了对SV含量的完整代谢组学分析。在这里,我们提出了一个快速分离SV的工作流程,并使用质谱法以高分辨率询问其代谢含量。我们使用靶向极性代谢组学验证了原代皮质神经元中谷氨酸的富集。从这些神经元中分离出的SV的无偏和广泛的全球分析表明,它们唯一可以检测到的极性代谢物是已建立的神经递质谷氨酸和GABA。此外,我们采用了直接从脑组织中快速捕获SV的方法,并以细胞类型的特异性方式确定了不同脑区域的神经递质谱。询问SV内容的方法的速度,鲁棒性和精度将促进对神经传递的化学基础的新见解。
结果:此方法为激活的C1的酶活性提供了线性定量范围,高达10 m mol mol mol -min -1 ml -1 -1和0.096 m mol·最小值·最小值·Ml -1·ml -1用于血清样品。该方法的恢复在90%〜110%的范围内。样品内分析的所有CV值和三个水平的分析均小于10%。与C1R酶,MASP1和MASP2的交叉反应速率小于0.5%。没有发现胆红素(0.2 mg ML -1),Chyle(2000 FTU)和血红蛋白(5 mg ML -1),但抗凝剂(EDTA,柠檬酸盐和肝素)抑制活性C1S的酶促能力。因此,该建立的方法可用于以0.096-10.000 m mol mol -1 ml -1 ml -1的浓度间隔确定人血清样品中的活性C1。
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NBD探针对环境敏感,对胺和硫醇高度反应。 这种环境敏感性提供了关键优势,可促进生物分子相互作用和缓冲系统内的自组装。 硝基群的强大电子撤回性质导致NBD衍生能够进行芳族替代(如果存在合适的离开组),从而帮助研究人员开发了各种不同的感应基序来为生物核粒子。 这些关键的化学特性导致荧光团易于化学修饰,并且可以连接到多种蛋白质以及其他生物分子上。 由于可以将NBD固定在生物分子上,因此它使NBD化合物在脂质膜研究,溶酶体脂质体分析和药物筛查中具有宝贵的资产。NBD探针对环境敏感,对胺和硫醇高度反应。这种环境敏感性提供了关键优势,可促进生物分子相互作用和缓冲系统内的自组装。硝基群的强大电子撤回性质导致NBD衍生能够进行芳族替代(如果存在合适的离开组),从而帮助研究人员开发了各种不同的感应基序来为生物核粒子。这些关键的化学特性导致荧光团易于化学修饰,并且可以连接到多种蛋白质以及其他生物分子上。由于可以将NBD固定在生物分子上,因此它使NBD化合物在脂质膜研究,溶酶体脂质体分析和药物筛查中具有宝贵的资产。
在活细胞中基因组基因局的标签为研究基因组空间组织和基因相互作用提供了视觉证据。CRISPR/DCAS9(群集定期间隔短的短倾向重复序列/停用CAS9)通过DCAS9/SGRNA/荧光蛋白复合物与靶基因组基因座中重复序列的结合来标记基因基因。但是,核中存在许多荧光蛋白通常会引起高背景荧光读数。本研究旨在通过重新设计由DCAS9-Suntag-NLS(目标模块)和SCFV-SFGFP-NLS(信号模块)组成的当前CRISPR/DCAS9- SUNTAG标签系统来限制进入核的荧光模块的数量。我们删除了信号模块的核位置序列(NLS),并将EGFP的两个副本插入信号模块中。核的荧光强度与细胞质的荧光强度(N/C比)降低了71%,信号与背景(S/B比)的比率增加了1.6倍。该系统可以稳定地标记随机选择的基因组基因局基因局基因组基因座,少于9个重复序列。
非线性PAH及其独特的化学结构与PAH的致癌性密切相关。5的PHE衍生物是具有显着性致癌性的PAH,PHE已成为PAHS研究中的代表化合物。6土壤作为一种重要介质,负责超过90%的PHE环境负荷,这很难降低土壤,并且随着时间的积累,其毒性变得越来越强大。7 - 9土壤中PHE造成的污染不仅会阻碍其正常功能,还会导致农作物的产量降低和农业产品安全问题,最终将通过食物链对人体造成极大的严重伤害。10 - 12世界卫生组织的国际癌症研究所宣布了一类致癌物,已证明其在人体中的存在会导致单调细胞的损害,从而通过高浓度的自由基浓度,甚至会损害损害。13 - 15鉴于PHE造成的人类健康和土壤环境的巨大威胁,研究对土壤生态系统污染的PHE污染的监测非常重要。13 - 15鉴于PHE造成的人类健康和土壤环境的巨大威胁,研究对土壤生态系统污染的PHE污染的监测非常重要。
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