摘要:提出并评估了一种超低水平光检测模块——时间相关光子计数器,用于荧光分析。时间相关光子计数器采用硅光电倍增管作为光子计数传感器,结合泊松统计算法和双时间窗技术,可以准确计数光子数。时间相关光子计数器与时间相关单光子计数技术兼容,可以记录非常微弱的光信号的到达时间。利用这种低成本、紧凑的仪器分析了异硫氰酸荧光素的强度和寿命,获得了16 pg/ml的检测限,线性动态范围从2.86 pg/ml到0.5 µ g/ml,测得异硫氰酸荧光素的寿命为3.758 ns,与先进的商用荧光分析仪的结果一致。时间相关的光子计数器可能在即时诊断等应用中很有用。
叶绿素荧光发射是由吸收的光能引起的,这些光能不会以热量的形式消散,也不会用于植物的光合作用反应。光合作用分为两个不同的部分,即光反应和二氧化碳 (CO 2 ) 固定。在光反应中,光能被用来生成氧化蛋白质复合物,该复合物能够在光系统 II (PSII) 中从水中提取电子,同时重新激发提取的电子以还原光系统 I (PSI) 中的 NADP +。这些“光收集”反应导致 ATP 和还原力(还原铁氧还蛋白和 NADPH)的形成,随后通过卡尔文 - 本森 - 巴沙姆循环进行 CO 2 固定。叶绿素 a 荧光分析可以确定直接用于光化学的吸收光能量,并估计生物或非生物胁迫下的光合作用效率 ( Moustakas 等人,2021 年;Moustakas,2022 年)。叶绿素 a 荧光信号可以根据光合作用活性进行解释,以获得有关光合作用机构状态的信息,尤其是光系统 II (PSII) 的状态信息 ( Murchie 和 Lawson,2013 年;Moustakas 等人,2021 年)。叶绿素荧光测量已广泛用于探测光合作用机制的功能和筛选不同作物以耐受各种压力和营养需求(Guidi 和 Calatayud,2014 年;Kalaji 等人,2016 年;Sperdouli 等人,2021 年;Moustakas 等人,2022a 年)。使用脉冲幅度调制 (PAM) 方法可以主要计算引导至 PSII 进行光化学反应的吸收光能量,这些能量通过非光化学猝灭 (NPQ) 机制以热量形式耗散或通过不太明确的非辐射荧光过程耗散,分别标记为 F PSII 、F NPQ 和 F NO ,它们的总和等于 1(Kramer 等人,2004 年)。在本研究中,我们总结了本期特刊中的文章,为读者更新了该主题,并讨论了叶绿素荧光的当前应用
1德国波恩大学医院波恩大学医院眼科科,德国波恩的生命与医学科学研究所3.萨尔茨堡癌症研究所免疫学和分子癌研究(SCRI-LIMCR);奥地利萨尔茨堡的帕拉塞尔斯医科大学,奥地利的癌症集群4 Helmholtz中心慕尼黑 - 德国环境健康研究中心,计算生物学研究所,德国Neuherberg,德国Neuherberg 5眼科和视觉科学系,约翰·A·莫兰眼中中心,犹他州犹他州犹他州和犹他州梅雷克尔河畔犹他州的摩尔群岛,斯特拉斯91,巴塞尔,瑞士1德国波恩大学医院波恩大学医院眼科科,德国波恩的生命与医学科学研究所3.萨尔茨堡癌症研究所免疫学和分子癌研究(SCRI-LIMCR);奥地利萨尔茨堡的帕拉塞尔斯医科大学,奥地利的癌症集群4 Helmholtz中心慕尼黑 - 德国环境健康研究中心,计算生物学研究所,德国Neuherberg,德国Neuherberg 5眼科和视觉科学系,约翰·A·莫兰眼中中心,犹他州犹他州犹他州和犹他州梅雷克尔河畔犹他州的摩尔群岛,斯特拉斯91,巴塞尔,瑞士
研究设计,大小,持续时间:在小鼠模型中首先优化了CRISPR-CAS9对诱导靶向基因突变的效率。在B6D2F1菌株中比较了两种CRISPR-CAS9递送方法:S期注射(Zygote阶段)(N¼135)ver- SUS Sus-Sus II期(M相)注射(卵母细胞阶段)(卵母细胞阶段)(N¼23)。包括四个对照组:未注射的培养基控制Zygotes(N¼43)/卵母细胞(N¼48);伪造的Zygotes(n¼45)/卵母细胞(n¼47); Cas9-蛋白注射的Zygotes(n¼23);和CAS9蛋白和加扰引导RNA(GRNA)注射的Zygotes(n¼27)。在POU5F1靶向的Zygotes(N¼37),培养基控制Zygotes(N¼19)和假注射的Zygotes(n¼15)中进行了免疫荧光分析(N¼19)(n¼15)。评估POU5F1 -NULL胚胎进一步发展体外的能力,将其他组的POU5F1靶标合子(N¼29)和培养基对照合子(N¼30)培养为种植体后植入阶段(8.5 dpf)。旨在确定归因于菌株变化的POU5F1 null胚胎的发育能力差异,第二个小鼠菌株的Zygotes -B6CBA(n¼52)的目标是针对的。总体而言,在IVM(中期II期)(n¼101)之后,在人卵母细胞中应用了优化的方法。对照组由注射的精子(ICSI)IVM卵母细胞(N¼33)组成。在注入人类CRISPR(n¼10)和培养基对照(n¼9)人类胚胎中进行免疫荧光分析。
• 我们在此描述了离子交换色谱和内在荧光分析方法的开发,以帮助表征 RNP 复合体 • 在 gRNA:Cas 比率 ≥ 1 时,单体和二聚体 apo-gRNA 中未复合蛋白质的量达到不同的平台期。动力学建模表明二聚化影响平台期的水平,但可能不能完全解释观察到的平台期行为 • 内在蛋白质荧光光谱可以以无标记的方式探测 gRNA 复合体,并显示单体和二聚体 gRNA 之间的区别 • 了解这些非共价 RNP 复合物的结构和功能之间的关系是优化细胞编辑过程以及将这些化合物表征为治疗剂的关键
颜色可以唤起我们对童年、大自然的壮丽、文化根源或人类辉煌的回忆。自史前时代以来,人类就着迷于将颜色应用于日常物品,为它们赋予坚实的文化和象征意义。如今,颜色可以统一和划分、象征和物化、编码和简化,所有这一切都归功于颜料、具有无机或有机成分、天然或合成的材料,这些材料在科学研究和实际应用中引起了极大的兴趣。对颜料的化学和物理行为及其所经历的修改、改变和相互作用的了解基于使用最常见技术进行的研究和调查的结果,这些技术是通过侵入性或非侵入性分析进行的,这些分析是在现场或实验室环境中应用的,例如光谱学、比色法、X 射线衍射法、荧光分析、扫描电子显微镜 (SEM)、透射电子显微镜 (TEM)、基于质谱的技术,但也通过专门开发的创新技术。
图2用于循环肿瘤细胞(CTC)基于液体活检的基于液滴的微流体。(a)使用交叉芯片进行CTC隔离的实验设置。根据CC的条款通过许可证复制。67版权所有2019,Ribeiro -Samy等。67(b)单个细胞水平上点突变分析的流动。经许可复制。68版权2021,Elsevier。 (c)方案说明显示了基于声学液滴定位技术的多功能酶 - 响应性GNP芯片,用于捕获和释放单个CTC的需求。 经许可复制。 69版权所有2019,美国化学学会。 (d)数字WGS平台的设计和操作。 根据CC的条款复制了NC许可证。 70版权所有2019,Ruan等。 70(e)数字 - rna -seq的示意图。 经许可复制。 77版权2020,美国化学学会。 (f)基于大小的纯化和细胞的封装(SPEC),然后进行酶分泌的荧光分析。 根据PANS许可条款复制。 80版权所有2018,Dhar等。 80(g)基于虚拟液滴的SCPS平台的总体工作原理。 经许可复制。 81版权2020,Elsevier。 (H)基于配对芯片的单个细胞免疫测定的工作原理。 经许可复制。 85版权2022,美国化学学会。 根据CC的条款复制了NC许可证。68版权2021,Elsevier。(c)方案说明显示了基于声学液滴定位技术的多功能酶 - 响应性GNP芯片,用于捕获和释放单个CTC的需求。经许可复制。69版权所有2019,美国化学学会。 (d)数字WGS平台的设计和操作。 根据CC的条款复制了NC许可证。 70版权所有2019,Ruan等。 70(e)数字 - rna -seq的示意图。 经许可复制。 77版权2020,美国化学学会。 (f)基于大小的纯化和细胞的封装(SPEC),然后进行酶分泌的荧光分析。 根据PANS许可条款复制。 80版权所有2018,Dhar等。 80(g)基于虚拟液滴的SCPS平台的总体工作原理。 经许可复制。 81版权2020,Elsevier。 (H)基于配对芯片的单个细胞免疫测定的工作原理。 经许可复制。 85版权2022,美国化学学会。 根据CC的条款复制了NC许可证。69版权所有2019,美国化学学会。(d)数字WGS平台的设计和操作。根据CC的条款复制了NC许可证。70版权所有2019,Ruan等。70(e)数字 - rna -seq的示意图。经许可复制。77版权2020,美国化学学会。(f)基于大小的纯化和细胞的封装(SPEC),然后进行酶分泌的荧光分析。根据PANS许可条款复制。80版权所有2018,Dhar等。80(g)基于虚拟液滴的SCPS平台的总体工作原理。经许可复制。81版权2020,Elsevier。(H)基于配对芯片的单个细胞免疫测定的工作原理。经许可复制。85版权2022,美国化学学会。根据CC的条款复制了NC许可证。(i)使用MA芯片从患者液体活检中分离出代谢活性细胞的实验工作流程。87版权2020,Rivello等。87(j)使用滴剂 - 需求喷墨打印技术和MALDI MS的开放空间平台中基于代谢的捕获和分析肿瘤细胞的插图。经许可复制。88版权2021,美国化学学会。
摘要:天然衍生物(例如精油)被作为经典杀菌剂的替代品来治疗生物殖民化。因此,评估了一些天然衍生物对两个天然生物膜在同一花岗岩壁上的生长的清洁和杀菌潜力,并评估了不同的微生物组成。为此,将三种精油(EOS)(来自Origanum vulgare,thymus dulgaris和calamintha nepeta)及其主要的活性原理(APS)(Carvacrol,Thymol和r-(+) - Pulegone分别分别为eos和acters norts contriant contersive in Comption,均与EOS和aps的不同组合进行了序列,以相同的效果和序列进行序列。出于比较目的,还使用了纯水凝胶和一种机械方法(刷牙)。比色测量和叶绿素进行了荧光分析,以评估处理在生物膜上的清洁作用。总体而言,水凝胶中存在的EOS和AP被证明是可靠的治疗方法,可以限制自然的生物殖民化,而O. vulgare是最有效的治疗方法之一,由于Carvacrol的大多数存在。此外,不同治疗方法的影响严格取决于所讨论的生物膜,以及其遵守底物的能力。
结果:Prelp − / − 小鼠表现出神经炎症和神经血管完整性降低,导致小脑和皮质中 IgG 和葡聚糖渗漏。Prelp − / − 小鼠的组织学分析显示血脑屏障的细胞间完整性降低,周细胞和星形胶质细胞末端的毛细血管附着降低。RNA 测序分析发现 Prelp − / − 小鼠的细胞间粘附和炎症受到影响,基因本体分析以及基因集富集分析表明炎症相关过程和粘附相关过程(如上皮-间质转化和顶端连接)受到显著影响,表明 PRELP 是细胞间粘附的调节剂。免疫荧光分析表明,Prelp − / − 小鼠神经血管中钙粘蛋白、claudin-5 和 ZO-1 的粘附连接蛋白表达水平受到抑制。此外,体外研究表明,PRELP 应用于内皮细胞可增强细胞间完整性,诱导间充质-内皮转化并抑制 TGF-β 介导的细胞间粘附损伤。