背景:基因操作在微生物中有着广泛的应用。通过基因操作和基因编辑,可以构建多功能菌株,同时生产包括酶在内的多种工业生物材料。目的:根据纤维素酶在包括食品工业在内的各个行业中的重要性,本研究旨在通过基因操作在土著蜡状芽孢杆菌EG296菌株中生产纤维素酶。材料与方法:采用SOEing PCR扩增位于蜡状芽孢杆菌蛋白酶基因(aprE)调控上游和下游区域之间的枯草芽孢杆菌168纤维素酶基因,并通过自然转化转化为蜡状芽孢杆菌EG296。在筛选出具有纤维素酶活性的菌株后,通过同源重组从转化子的基因组中删除scoC基因(aprE基因的负转录调控因子),以同时提高纤维素酶和蛋白酶活性。结果:蜡状芽孢杆菌基因组中引入纤维素酶基因,纤维素酶活力约为0.61 u.mL -1 。通过scoC基因缺失,蛋白酶活力由230 u.mL -1 提高到363.14 u.mL -1 ,同时,在蛋白酶启动子调控下的纤维素酶活力也由0.61 u.mL -1 提高到0.78 u.mL -1 。蜡状芽孢杆菌表达的纤维素酶和蛋白酶的不稳定性指数分别为26.16和20.18,远低于40的阈值,因此两种酶均比较稳定。结论:获得了1株能够生产和分泌两种重要工业胞外酶(纤维素酶和蛋白酶)的基因工程菌株,且后续纯化工艺简单。
Dacheng Wang, 1 Lirong Wei, 1 Jinbiao Ma, 1 Yingqiao Wan, 1 Keyi Huang, 1 Yiqiong Sun, 1 Huili Wen, 4 Zhipeng Chen, 4 Zijie Li, 1 Dongli Yu, 2 Haitao Cui, 3 Jingni Wu, 1 Yufeng Wu, 4 Sun Tae Kim, 5 Jing Zhao, 1 Jane E. Parker,6 Kenichi Tsuda,7岁, * Chunhao Jiang,1, *和Yiming Wang 1,8, * 1植物病理学系,农作物疾病综合管理和害虫综合管理的主要实验室,Nanjing农业大学教育部Nanjing 210095,NANJING 210095 02115, USA 3 Department of Plant Pathology, College of Plant Protection, Shandong Agricultural University, Tai'an, Shandong 271018, China 4 State Key Laboratory for Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Jiangsu Key Laboratory for Information Agriculture, Bioinformatics Center, Academy for Advanced Interdisciplinary Studies, Nanjing Agricultural University, Nanjing, China 5 Department of Plant Bioscience, Life and Industry Convergence Research Institute, Pusan National University, Miryang 50463, Republic of Korea 6 Department of Plant-Microbe Interactions, Max Planck Institute for Plant Breeding Research, 50829 Cologne, Germany 7 State Key Laboratory of Agricultural Microbiology, College of Plant Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China 8 Lead contact *Correspondence: tsuda@mail.hzau.edu.cn(K.T.),chjiang@njau.edu.cn(C.J.),ymwang@njau.edu.cn(y.w。)https://doi.org/10.1016/j.celrep.2024.113985
蜡状细菌在牛奶和乳制品中的发生归因于卫生方案不足,因此导致了两种胃肠道疾病:肠毒素触发的罕见催眠症和腹泻疾病。目前的研究旨在克服通过在聚合酶链反应(PCR)中掺入未改性金纳米颗粒(GNP)来检测低细菌浓度的局限性。Bacillus cereus,与常规PCR和SYBRGREEN QPCR相比,以检测NHE基因。基因是一个关键的毒力因子,它编码与非溶血性肠毒素产生有关的蛋白质。结果表明,将GNP添加到PCR反应中增强了DNA的产量,并使检测到10 2份Cereus DNA的副本,而使用标准PCR的10 3。GNPS辅助PCR以10 2 CFU/ml的尖刺样品检测到蜡状芽孢杆菌,而常规PCR则需要10 3 CFU/mL。sybrgreen qpcr也可以在10 2 DNA拷贝和10 2 CFU/ml的峰值牛奶中进行检测。GNPS辅助PCR特异性扩增了蜡状芽孢杆菌,而不是其他细菌,例如枯草芽孢杆菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,单核细胞增生李斯特氏菌和沙门氏菌,表现出分析特异性。总体而言,GNP提高了蜡状芽孢杆菌检测的PCR敏感性。关键字: - 肠毒素;蜡状芽孢杆菌;牛奶; pcr;金纳米颗粒; sybrgreen。
本文旨在确定食物和手拭子样品中蜡状芽孢杆菌的普遍性及其与马来西亚北部夜间市场中食品供应商的知识,态度和实践(KAP)的关系。在这项研究中,总共收集了140种煮熟的食物和手拭子样品。用B. cereus检测到约28%(n = 83)的食物和42%(n = 57)的手。食品处理程序的KAP结果显示出(平均±SD)中等知识评分(73.96±15.79%),良好的态度得分(91.61±7.48%)和高实践得分(81.70±11.94%)。进一步的分析表明,供应商的态度独立影响了他们的实践。此外,发现知识和实践评分与蜡状芽孢杆菌手运输显着相关。因此,这项研究的发现是当局提高对食品安全的认识并强调良好态度和卫生习惯的重要性,尤其是在小型食品供应商中的重要性。
一般信息Corteva Agrisciencion开发了使用CRISPR-CAS9技术编辑的玉米组,以靶向蜡质基因(WX1)的靶向缺失,从而将淀粉中链氨基蛋白酶的比例提高到近100%。在传统玉米中,淀粉通常为75%的链托蛋白和25%的果胶。除了食品工业外,纺织品和造纸工业还使用淀粉蛋白。日本卫生,劳动和福利部(MHLW)以及农业,林业和渔业部(MAFF)要求所有基因组编辑的产品在日本商业化之前进行咨询和通知过程,请参阅JA20202020202020-0184,以获取更多详细信息。 3月20日,MHLW和两个MAFF监管机构将蜡状玉米添加到了不受日本GE食品,饲料和生物多样性法规的基因组编辑产品列表中。 For more on the MHLW and MAFF decisions, see below (Japanese only): MHLW – Food Safety MAFF – Feed Safety MAFF – Biodiversity As of March 2023, MHLW and MAFF have added four types of products to their lists of genome edited products that are not subject to Japan's GE food, feed, and biodiversity regulations, including a high GABA tomato , high-yield seabream, fast growing tiger pufferfish,和蜡质玉米。日本卫生,劳动和福利部(MHLW)以及农业,林业和渔业部(MAFF)要求所有基因组编辑的产品在日本商业化之前进行咨询和通知过程,请参阅JA20202020202020-0184,以获取更多详细信息。3月20日,MHLW和两个MAFF监管机构将蜡状玉米添加到了不受日本GE食品,饲料和生物多样性法规的基因组编辑产品列表中。For more on the MHLW and MAFF decisions, see below (Japanese only): MHLW – Food Safety MAFF – Feed Safety MAFF – Biodiversity As of March 2023, MHLW and MAFF have added four types of products to their lists of genome edited products that are not subject to Japan's GE food, feed, and biodiversity regulations, including a high GABA tomato , high-yield seabream, fast growing tiger pufferfish,和蜡质玉米。
蜡状芽孢杆菌是一种常见的食源性病原体,是人类食物中毒的重要原因。蜡状芽孢杆菌引起的疾病通常表现出两种主要症状,即呕吐或腹泻,具体取决于产生的毒素。据推测,在摄入受污染的蔬菜或加工食品后,产肠毒素的蜡状芽孢杆菌孢子会到达肠道,在那里发芽并产生导致食物中毒的肠毒素。在我们的研究中,我们观察到,孢子形成是蜡状芽孢杆菌在叶子中生存所必需的,但在即食蔬菜(如菊苣)中是可有可无的。我们证明,最初在孢子形成方面受损但在生物膜形成方面没有受损的蜡状芽孢杆菌营养细胞能够到达肠道并在小鼠模型中引起严重疾病。此外,我们的研究结果