•对感兴趣的基因产物进行抗血清•从表达基因的细胞系中使cDNA表达文库•将基因的c cDNA表达文库转染至细胞系,该细胞系通常不会表达基因产物•通过抗体结合表达产物的选择细胞•恢复cDNA表达载体•重复。恢复。序列。胜利!
我们正在应用功能性基因组和遗传研究来填补有关卵巢癌可起作突变的临床知识的空白。我们应用了基于CRISPR/CAS9的基因组规模筛选,以鉴定卵巢癌对PAPR抑制剂敏感性的遗传决定因素。我们还从耐药性的患者中产生了肿瘤衍生的cDNA表达文库,并且我们正在应用功能性遗传筛选来识别促进癌症进展和治疗耐药性的驱动基因。我们还生成了几个TP53诱变文库,以表征对TP53靶向疗法有反应的突变体。该项目最近由国防部卵巢癌研究计划资助。
生物电是存在于所有细胞中的一种基本生物物理现象,通过调节神经信号传导、模式形成和癌症抑制等过程,在胚胎发生过程中发挥着至关重要的作用。精确监测生物电信号及其在整个发育过程中的动态变化对于增进我们对高等生物的了解至关重要。然而,缺乏适合在早期发育过程中绘制生物电信号的技术,极大地限制了我们解释这些机制的能力。为了应对这一挑战,我们在斑马鱼中开发了一个 Ace2N-mNeon 表达文库,该文库在受精后 4 小时到受精后至少 5 天内表现出膜定位,并在整个发育过程中在多种细胞类型中广泛表达。我们验证了该文库用于研究生物电变化的用途,通过电压成像记录不同发育阶段的神经元和心肌细胞中的信号。通过这种方法,我们发现了早期胚胎发生过程中同步神经元活动的证据,并观察到随着发育的进展,心肌细胞中的电压动态更快。我们的结果表明,Ace2N-mNeon 库是发育生物电研究的宝贵工具,支持电压成像和荧光寿命成像 (FLIM) 等先进技术。这些方法能够在整个发育过程中对不同细胞类型的生物电信号进行非侵入性、动态监测,大大超越了当前电生理技术的能力。