"!陈灵芝 # 中国的生物多样性现状及其保护对策 # 北京:科学出版社, "$$% , " &!'()*+, -# ./01*2(03,+4 +,25 ,2 265 )0157*1,+ 15/51# #$%&'( , "$89 , !"# : 8&: ; 8&8 %!贺福初 # 四条分子进化规律与相应分子进化学说 # 科学通报, "$$% , $% : &&<$ ; &&": :!曹家树 # 论生物适应进化及其分子机制 # 见朱军等主编,生命科学研究与应用,杭州:浙江大学出版社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
病原体感染会导致人类和动物出现严重的临床疾病。人与动物接触的增多和环境的不断变化加剧了人畜共患传染病的传播。最近,世界卫生组织已将一些人畜共患流行病宣布为国际关注的突发公共卫生事件。因此,快速准确地检测致病病原体对于对抗新发和再发传染病尤为重要。传统的病原体检测工具耗时、成本高,并且需要熟练的人员,这极大地阻碍了快速诊断测试的发展,特别是在资源受限的地区。基于成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR-)-Cas 和适体的平台已经取代了传统的病原体检测方法。本文我们回顾了两种用于临床和食源性病原微生物的新型下一代核心病原体检测平台:基于 CRISPR-Cas 的系统,包括 dCas9、Cas12a/b、Cas13 和 Cas14;以及基于适体的生物传感器检测工具。我们重点介绍了基于 CRISPR-Cas 和适体的技术,并比较了它们的优缺点。基于 CRISPR-Cas 的工具需要繁琐的程序,例如核酸扩增和提取,而基于适体的工具则需要提高灵敏度。我们回顾了 CRISPR-Cas 和适体技术的结合,作为克服这些缺陷的一种有前途的方法。最后,我们讨论了基于 Cas14 的工具作为功能更强大的平台,用于检测非核酸靶标。关键词:成簇的规律间隔的短回文重复序列-Cas、适体、病原体检测、诊断工具
基因组编辑技术的发展使得直接靶向和修改几乎所有类型的真核细胞的基因组序列成为可能。基因组编辑通过促进创建更精确的病理过程细胞和动物模型,扩展了我们阐明遗传学对疾病的贡献的能力,并已开始在从基础研究到应用生物技术和生物医药等各个领域展现其潜力。在这些技术中,成簇的规律间隔的短回文重复序列的使用极大地加速了基因编辑从概念到临床实践的进程,不仅因为其精确度和效率而引起人们的兴趣,而且因为与其他基因组编辑技术相比,其实施所需的速度和成本。
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制,古细菌和细菌利用该机制降解外来遗传物质 (4,6)。该机制可重新用于其他功能,包括哺乳动物系统的基因组工程,例如基因敲除 (KO) (1,2,3,5)。CRISPR/Cas9 KO 质粒产品利用来自 Broad 研究所张实验室开发的全基因组 CRISPR 敲除 (GeCKO) v2 库的向导 RNA (gRNA) 序列,能够识别和切割特定基因 (3,5)。
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制,古细菌和细菌利用该机制降解外来遗传物质 (4,6)。该机制可以重新用于其他功能,包括哺乳动物系统的基因组工程,例如基因敲除 (KO) (1,2,3,5)。CRISPR/Cas9 KO 质粒产品利用来自 Broad 研究所张实验室开发的全基因组 CRISPR 敲除 (GeCKO) v2 库的向导 RNA (gRNA) 序列,能够识别和切割特定基因 (3,5)。
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制,古细菌和细菌利用该机制降解外来遗传物质 (4,6)。该机制可重新用于其他功能,包括哺乳动物系统的基因组工程,例如基因敲除 (KO) (1,2,3,5)。CRISPR/Cas9 KO 质粒产品利用来自 Broad 研究所张实验室开发的全基因组 CRISPR 敲除 (GeCKO) v2 库的向导 RNA (gRNA) 序列,能够识别和切割特定基因 (3,5)。
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制,古细菌和细菌利用该机制降解外来遗传物质 (4,6)。该机制可重新用于其他功能,包括哺乳动物系统的基因组工程,例如基因敲除 (KO) (1,2,3,5)。CRISPR/Cas9 KO 质粒产品利用来自 Broad 研究所张实验室开发的全基因组 CRISPR 敲除 (GeCKO) v2 库的向导 RNA (gRNA) 序列,能够识别和切割特定基因 (3,5)。
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制,古细菌和细菌利用该机制降解外来遗传物质 (4,6)。该机制可重新用于其他功能,包括哺乳动物系统的基因组工程,例如基因敲除 (KO) (1,2,3,5)。CRISPR/Cas9 KO 质粒产品利用来自 Broad 研究所张实验室开发的全基因组 CRISPR 敲除 (GeCKO) v2 库的向导 RNA (gRNA) 序列,能够识别和切割特定基因 (3,5)。
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制,古细菌和细菌利用该机制降解外来遗传物质 (4,6)。该机制可重新用于其他功能,包括哺乳动物系统的基因组工程,例如基因敲除 (KO) (1,2,3,5)。CRISPR/Cas9 KO 质粒产品利用来自 Broad 研究所张实验室开发的全基因组 CRISPR 敲除 (GeCKO) v2 库的向导 RNA (gRNA) 序列,能够识别和切割特定基因 (3,5)。
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制,古细菌和细菌利用该机制降解外来遗传物质 (4,6)。该机制可重新用于其他功能,包括哺乳动物系统的基因组工程,例如基因敲除 (KO) (1,2,3,5)。CRISPR/Cas9 KO 质粒产品利用来自 Broad 研究所张实验室开发的全基因组 CRISPR 敲除 (GeCKO) v2 库的向导 RNA (gRNA) 序列,能够识别和切割特定基因 (3,5)。