识别位置

实践：制作DNA配置文件

我们使用哪种限制酶？已知大量的甲壳酶，该酶在“识别位置”或“ knipplaats”上直接切断DNA。这些酶来自细菌。他们的功能是制作奇怪的DNA，例如，无害的攻击病毒。例如，在此实践中，使用酶EcoRI。这是从大肠杆菌细菌部落中分离出的第一个酶（i）。该酶在基础序列g i aattc（或cttaa i g出现在互补链中）的地方切割了DNA。在垂直线的位置被切割。仅切割病毒DNA。本身（细菌）DNA，有一种针对这种编织酶的屏蔽。ECO RI识别序列存在于5个不同位置的-DNA中。这种酶对 -DNA的影响后，会产生6种不同的DNA片段。在本次会议期间使用的第二种酶是Hind III酶。Hind-酶来自流感嗜血杆菌的细菌。尤其是经常使用该细菌II型限制酶和III型。这2种不同的酶对2种不同的病毒有效。它们也具有完全不同的切割频率。我们在此实践中使用III型。该酶以以下识别顺序切割DNA：A I AGCTT。此序列在 -faag基因组的7个位置中找到。因此，在印度酶限制后，将出现8个DNA片段。关于胶质孔的更多信息...黄色粒子用于研究和比较彼此获得的DNA片段的长度。为此，用粘酶处理的DNA样品涂在凝胶中。我们为此使用琼脂糖凝胶。琼脂糖是一种天然多糖，溶解在缓冲液中，在高温下是液体，冷却时变为凝胶形。当该凝胶上安装电场时，DNA由于其负电荷而迁移到正极。在此迁移过程中，DNA具有取决于分子大小的抗性。较小的DNA片段的阻力较小，因此通过凝胶迁移到另一侧。较大的片段迁移较慢，并且在同一持续时间内迁移较少。电动孔后，通过着色可视化不同片段的位置，并且可以比较获得的DNA模式。在这种实用性中，将2个切割的DNA样品（和未切割样品）与参考语言进行了比较。后者包含各种片段，其长度是完全已知的。所使用的参考钢由碎片组成，其长度为500个碱基对（500 1000 1500 2000 ... 11500 12000）。5000 bp的碎片在胶质孔后提供了一个清晰的轮胎。