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比较定量LC – MS/ ... div>的衍生试剂
摘要本研究系统地比较了化学衍生化后多种维生素D代谢产物分析的灵敏度和选择性，使用不同的试剂进行液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）。通常，化学衍生化应用于维生素D代谢物以提高电离效率，这对于非常低的丰富代谢物至关重要。衍生化还可以提高LC分离的选择性。近年来，已经报道了各种各样的衍生化试剂，但是关于其相对性能和对不同维生素D代谢产物的相对性能和适用性的信息在文献中没有可用。为了填补这一空白，我们研究了维生素D 3，3β-25-羟基维生素D 3（3β-25（OH）D 3），3α-25-羟基维胺D 3（3α-25（OH）D 3），1,25-二羟基vitamin D 3（OH） 24,25-二羟基维生素D 3（24,25（OH）2 D 3），并比较了与几种重要试剂衍生后的响应因子和选择性，包括四种二烯基试剂（4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,3,5-二酮（PTAD），，（PTAD），，，，3-4-苯基1,2,4-苯基试剂， 4- [2-（2-（6,7-二甲氧基-4-甲基-3-氧-3,4-二羟基苯基）乙基）乙基] -1,2,4-唑啉-3,5-二酮（DMEQ-TAD）（DMEQ-TAD）（DMEQ-TAD），AmplifeX，2-硝基丙吡啶（Pyrno）以及两个靶标： （INC）和2-氟-1-甲基吡啶基-P-甲苯磺酸盐（FMP-TS）。此外，还检查了二磷和羟基试剂的组合。使用流动相的不同组成部分，用于LC分离，反相C-18和混合模式五氟苯基HPLC柱。在检测灵敏度方面，多种代谢产物分析的最佳衍生化试剂是Amplifex。尽管如此，FMP-TS，INC，PTAD或PTAD与乙酰化反应相结合，对所选代谢物显示出很好的性能。这些试剂组合根据化合物提供了3至295倍的信号增强。使用任何衍生化反应很容易实现二羟基化维生素D 3种的色谱分离，而对于25（OH）D 3型号，只有Pyrno，FMP，Inc和PTAD与乙酰化支持完全分离。总而言之，我们认为这项研究可以作为维生素D实验室的有用参考，以帮助分析和临床科学家确定要选择哪种衍生化试剂。
丙酮作为锂离子电池电极 PVDF 回收和分层的试剂
已经开发出一种基于丙酮的从锂离子电池电极中回收聚偏氟乙烯 (PVDF) 的工艺。首先使用丙酮溶解 PVDF 粘合剂，然后将电极材料在丙酮中搅拌以使其与集电器分层。电极分离成电极材料、PVDF 粘合剂和集电器。测量了 PVDF 在丙酮中的溶解度与温度的关系，发现溶解度随温度升高而增加，在 150 ◦ C 左右达到最大值。测量了纯态和电极中 PVDF 的溶解速率与温度的关系。前者比后者快得多。对 PVDF 从电极中扩散的情况进行了数学建模，以预测材料回收的时间。该研究表明，通过从锂离子电池中回收 PVDF、电极材料和集电器，可以建立直接回收工艺。
合成 CRISPR/Cas9 试剂促进基因组编辑...
CRISPR/Cas9 已成为斑马鱼基因组编辑的有力工具，它允许使用 DNA 模板和同源定向修复 (HDR) 快速产生功能丧失突变和特定等位基因的敲入。我们检查了合成的、化学修饰的 gRNA 的效率，并证明与重组 Cas9 蛋白结合可诱导插入缺失和大型基因组缺失。我们开发了一种体内遗传检测方法来测量 HDR 效率，并利用该检测方法来测试改变模板设计对 HDR 的影响。利用合成的 gRNA 和线性 dsDNA 模板，我们成功地在多个基因组位点进行了荧光团的敲入，并证明了以高效率通过种系传递。我们证明合成的 HDR 模板可用于敲入细菌硝基还原酶 (ntr)，以促进特定细胞类型的谱系消融。总的来说，我们的数据证明了结合合成 gRNA 和 dsDNA 模板在体内进行同源定向修复和基因组编辑的实用性。
基于铂纳米结构和多吡咯层的组合的无试剂葡萄糖生物传感器
摘要：开发了基于石墨杆（GR）电极的两种类型的低成本试剂电化学生物传感器。用电化学合成的铂纳米结构（PTNS），1,10-苯磺氨酸-5,6-二酮（PD），葡萄糖氧化酶（GOX），没有息肉（PPY）层 - （PPY）层 - （I）GR/PTNS/PD/PD/PT/PT/PT/PT，分别准备和测试。Glucose biosensors based on GR/PtNS/PD/GOx and GR/PtNS/PD/GOx/Ppy electrodes were characterized by the sensitivity of 10.1 and 5.31 µ A/(mM cm 2 ), linear range (LR) up to 16.5 and 39.0 mM, limit of detection (LOD) of 0.198 and 0.561 mM, good reproducibility, and storage 稳定。基于GR/PTN/PD/GOX/PPY电极的开发的葡萄糖生物传感器对干扰化合物的耐药性具有非凡的耐药性，并证明对测定血清中葡萄糖水平的测定非常有效。
用于将核酸转移到 ATCC 细胞中的转染试剂
阳离子脂质有助于将核酸递送到真核细胞中。它们的基本结构由带正电的头部基团和一条或两条烃链组成。带电的头部基团介导脂质与核酸带负电的磷酸骨架之间的相互作用。据推测，这些相互作用导致核酸-脂质体复合物的形成，该复合物随后可能与靶细胞的质膜接触并通过内吞作用被吸入。或者，核酸-脂质体复合物可能与质膜融合并混合，将核酸沉积到细胞质中。
使用 CRISPR 试剂对人类 B 细胞系进行电穿孔
图 1. 最佳条件基于细胞存活率和靶向敲除率。根据上述方案，每次电穿孔用含有靶向人 CD19 的 crRNA 的 RNP（从针对不同 B 细胞系中细胞内和细胞外标志物的 30 多种 crRNA 筛选中选择）转染 100 万个 Ramos 细胞。（A）电穿孔后的第二天，用 2.5 μg/mL 碘化丙啶（BioLegend，产品目录号 421301）对部分细胞染色，并通过流式细胞术进行分析。（B）电穿孔五天后，用 2.5 μg/mL Alexa Fluor ® 647 抗人 CD19（BioLegend，产品目录号 302220，克隆 HIB19）加碘化丙啶对部分细胞染色，并通过流式细胞术进行分析。对照 = 未经电穿孔的细胞：RNP 混合物。数据由德国弗莱堡大学的 Marco Cavallari 博士提供。
显示鉴定的抗TIM3和抗试剂新抗体
抗体发现是一个漫长而劳动密集型的过程，需要大量的实验室工作，以确保抗体证明其在人类患者中用作治疗剂所必需的适当效率，生产和安全特征。传统上，此过程始于噬菌体显示或B细胞隔离运动，在该活动中，该活动是主要的选择标准。然而，通过这种方法识别的初始引线在开发性和表位定义方面缺乏足够的表征，通常在后期进行。在这项研究中，我们提出了一条管道，该管道将早期噬菌体展示筛选与基于AI的表征相结合，从而在整个选择过程中实现了更明智的决策。使用免疫检查点Tim3和Tigit作为目标，我们识别出具有相似结合特性的五个初始铅。由于表面物理化学特性不利，这些引线中的两个被预测具有较差的开发性纤维。生成了2：T4（反对Tigit）和6E9（针对TIM3），生成了及其各自目标的复合物的结构模型。预测的表位使我们能够预期与Tim3和Tigit结合伙伴进行竞争，并推断这些抗体预期的拮抗功能。这项研究奠定了从高吞吐量分析中得出的多维AI驱动的铅候选者的基础。
核酸染色试剂 Clear Stain Blue - CLEAR STAIN Blue
*1 本产品含有沉淀物。搅拌均匀，添加沉淀物，制备染色溶液。 *2 染色溶液可以在几天到一个星期内重复使用几次。请根据使用频率和染色程度使用。 *3 若染色时间增加，脱色所需时间也会增加。如果脱色过夜，将染色时间延长约 45 至 60 分钟将使您获得更清晰的电泳图像。 *4 如果将其放置于室温水中 2 小时，或放置于冰箱中过夜，您将获得清晰且无背景的图像。