该套件包含一个正对照模板,该模板将在FAM和CY5通道中放大。每次使用套件时,运行中必须至少包括一个阳性对照反应。一个阳性结果表明在该特定实验情况下检测靶基因的引物和探针正常工作。如果获得了负结果,则测试结果无效,必须重复。应注意确保阳性对照不会污染任何其他套件组件,从而导致假阳性结果。这可以通过在PCR后环境中处理该组件来实现。还应注意在将阳性对照添加到运行中时避免其他样品的交叉污染。可以通过密封所有其他样品和负面对照来避免这种情况,然后将阳性对照置于正面对照中。
图3。集成的工作流解决方案,以支持过程开发和GMP环境。Resdnaseq定量HEK293 DNA试剂盒是生物制药制造过程中杂质和污染物测试的集成工作流程的一部分。使用Thermo Scientific™Pharma thema Flex™Flex 96深孔磁性粒子处理器与Applied Biosystems™PrepSeq™残留DNA样品制备套件有助于确保HEK293残留DNA的高恢复能力减少,而误差减少。Pharma Fisher Flex 96深孔磁性颗粒处理器可以一式三份处理多达24个样品,而使用手动方法一式三份的三个样本。RESDNASEQ试剂盒已在Applied Biosystems™7500快速实时PCR系统和QuantStudio™5实时PCR系统上进行了验证。使用Applied Biosystems™Accuseq™实时PCR检测软件简化了数据分析,该软件提供了准确的定量和安全性,审核和电子签名功能,以帮助启用21 CFR Part 11 Comporiance。
预期的使用Panamax™血液DNA提取试剂盒仅用于研究用途,结合使用Panamax™16或48仪器,使用二氧化硅-Magnetic Bead Technology的自动化系统,用于分离和纯化基因组DNA与人类全血的基因组DNA。该产品旨在由专业用户(例如技术人员和医生)使用,他们接受了用于研究使用目的的分子生物学技术培训;它旨在用于手动样本准备目的,并且不给出定性或定量的测试结果。原理和概述Panamax™血液DNA提取试剂盒用于人类全血的基因组DNA的自动核酸纯化。它使用良好的二氧化硅涂层磁珠技术来纯化小样品或大小的基因组DNA。该过程包括4个步骤(裂解,结合,洗涤和洗脱),并使用二氧化硅涂层的磁磁珠的选择性结合特性进行。套件含量•48 PANAMAX™血液DNA墨盒•12个磁性盖•2 x 1.2 ml蛋白酶K•1.2 ml peb•2 x 8.0 mL用户提供的围围设备和材料•Panamax™16或48个仪表和48个仪表和管子的•诸如Prefocessi ng ng ng的启动型材料•手套,保护礼服等警告和预防措施•仅用于研究。•请仔细阅读指令,并在使用前熟悉套件的所有组件。•可应要求提供材料安全数据表(MSD)。•到期日期后不要使用套件。试剂存储和处理•将套件存储在15 -30 o C中。该套件是稳定的,直到标记的到期日期为止。•处理任何试剂时,要戴眼外衣和一次性手套。避免将这些材料与皮肤,眼睛或粘膜接触。•请勿从不同的套件或批次中汇总试剂。•所有样本应像使用良好的实验室程序一样进行传染性处理。•建议使用无菌一次性移液器,无DNase的移液器尖端或无DNase配件,以降低污染的可能性。•小心,避免通过剧烈摇动试剂在溶液中形成气泡。•小心地将密封片剥去,使所有塑料都带到墨盒的顶部。•不要将墨盒带有密封纤维剥落的空气。长时间暴露于空气,导致溶液蒸发和溶液的变化pH值,可能会影响纯粹的效率。•所有解决方案均应无色和清晰。如果更改颜色或不透明的解决方案,请勿使用解决方案。
图1:测定原理的例证。底物是内部淬火的荧光底物。蛋白水解从淬灭剂中释放高荧光MCA。荧光强度与蛋白酶的活性成比例地增加。背景组织蛋白酶D是肽酶A1家族的溶酶体天冬氨酸蛋白酶。它参与溶酶体蛋白质降解和蛋白质的激活,这些蛋白质被合成为前体,例如激素和生长因子。其活性会影响细胞死亡和炎症。组织蛋白酶D功能障碍与乳腺癌和胃癌,阿尔茨海默氏病(AD)和神经胶质脂肪促脂肪肌动症(NCL)有关。过表达会导致VEGF-C(血管内皮生长因子-C)和VEGF-D以及转移和血管生成的激活。组织蛋白酶D是一个有希望的新治疗靶标。已经表明,针对组织蛋白酶D的抗体能够抑制三阴性乳腺癌细胞的生长。组织蛋白酶D抑制也是组合处理的一种有希望的方法。应用在高吞吐量筛选(HTS)应用中筛选小分子抑制剂。
商标:Qiagen®,样本到Insight®,Dneasy®(Qiagen Group)。注册名称,商标等。在本文档中使用的,即使没有明确标记,法律也不被认为不受保护。
[1]建议如果需要过夜孵化。[2]如果您遇到了低核酸恢复,请遵循精液工作流程(第21页)。[3]如果您遇到了珠子凝结或与全血样品聚集,请遵循整个血液工作流程(第18页)。[4]如果不需要同时分离病毒核酸和细菌DNA,请使用消化工作流。
描述Thermo Scientific™First Strand cDNA合成试剂盒是一个完整的系统,用于有效合成mRNA或总RNA模板的第一链cDNA。该试剂盒使用M-Mulv逆转录酶,与AMW逆转录酶相比,RNase H活性较低。酶在37°C下保持活性,适合于9 kb的cDNA合成。套件提供的重组Thermo Scientific™Ribolock™RNase抑制剂可有效保护RNA在高达55°C的温度下免于降解。该套件均配有寡核(DT)18和随机己酯引物。随机六聚体引物与非特异性结合,并用于合成总RNA种群中所有RNA的cDNA。寡(DT)18底漆选择性地向poly(a)RNA的3末端退火,仅从poly(a)尾mRNA中合成cDNA。基因特异性底漆也可以与试剂盒一起使用,以从指定序列中进行质合。与该系统合成的第一链cDNA可以直接用作PCR或实时PCR中的模板。它也是第二链cDNA合成或线性RNA扩增的理想选择。可以将放射性和非放射性标记的核苷酸纳入第一个链cDNA,以用作包括微阵列在内的杂交实验的探针。
ꞏ接触:ꞏ准备日期/上次修订02/15/2024ꞏ缩写和首字母缩写:ADR:ADR:协议RELATIF AU TRANSSIF INTERKANTIF INTERNATION DES MARTHANDISS DANGERES DANGERES DANGERES DANGERSES PAR PAR(涉及有关道路国际危险商品的国际运输危险商品的协议) ELINCS:欧洲通知化学物质CAS的清单:化学摘要服务(美国化学学会部)NFPA:国家消防协会(美国)VOC:VOC:挥发性有机化合物(美国,EU)PBT:持久,生物蓄能,有毒的VPVB:非常持久和非常持久和非常生物的安全性:国民卫生机构:占用率: PEL:允许的暴露限制REL:建议暴露限制皮肤刺激2:皮肤腐蚀/刺激 - 类别2眼睛刺激2A:严重的眼睛伤害/眼睛刺激 - 类别2A
在吸附柱中部加入50~200μLElution Buffer或无菌水,室温放置2~5分钟,12000rpm离心1分钟。收集 DNA 溶液并将 DNA 储存于 -20°C。注:1)若后续实验对pH或EDTA敏感,可用无菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响。若用水作为洗脱液,则pH应为7.0~8.5(可用NaOH调节水的pH值至此范围),pH值低于7.0洗脱效率不会高。 2) 将洗脱缓冲液放入65-70°C水浴中预热。离心前在室温下孵育 5 分钟以提高产量;用另外50-200 μL洗脱缓冲液或无菌水洗脱可能会增加产量。 3) 如果想提高DNA最终浓度,可以将所得溶液加入到吸附柱中,室温下放置2-5分钟,12000 rpm 离心1分钟;如果洗脱体积少于200 μL,可能会增加最终的DNA浓度,但可能会降低总产量。如果DNA量少于1μg,建议用50μL洗脱缓冲液或无菌水洗脱。 4) 由于保存在水中的DNA会受到酸性水解的影响,如果需要长期保存,建议用Elution Buffer洗脱后保存于-20℃。
图 1. DNA 质量。使用 SPINeasy DNA Pro 土壤试剂盒和/或竞争对手试剂盒 (Q pro) 处理具有不同生物量/污染物含量(每种 250 毫克)的土壤样品。中等生物量组包括在 -20°C 下储存 12-24 个月的样品,这可能会对分离的 DNA 的产量和完整性产生负面影响。当样品在检测范围内时,使用分光光度计重复四次评估 DNA 产量和纯度(A260/A280 和 A260/A230 比率)。图中的每个点代表一次提取。水平条表示中值。使用 DNA 凝胶评估 DNA 完整性。对于低生物量样品,加载了相似比例的 DNA 洗脱液,以比较 SPINeasy DNA Pro 土壤试剂盒和竞争对手试剂盒的性能。