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World File Search System质粒
forprepreptm质粒提取MIDI套件用户手册
7。加入8毫升冰冷的PM3缓冲液，并通过将管反转10到15次中和裂解物，立即混合。（不要涡旋！）- 注：•确保培养细胞的密度最佳，缓冲液体积（PM1，PM2，PM3）应与培养体积成比例地增加。（ex。培养体积，60〜120 ml：PM1，8 ml; PM2，8毫升; PM3，8 ml培养体积，120〜240 ml：PM1，16 ml; PM2，16毫升； PM3，16毫升）•处理120〜240 ml细菌时，需要额外的PM1，PM2和PM3的缓冲液体积时，可以单独购买缓冲液。•确保将细胞颗粒完全悬浮在缓冲液PM1中。•添加缓冲液PM2和缓冲液PM3后，完全混合样品混合物。通过离心8。在4°C下以≥5,000xg的距离离心20分钟。（最好在4°C下以15,000〜20,000 xg离心15分钟）。- 如果上清液仍包含悬浮物，则将上清液转移到干净的离心管上，然后重复此离心步骤。质粒的结合9。将上清液从步骤8传递到平衡的PM MIDI列。让其通过重力流动到PM MIDI柱并丢弃滤液。WASH PM MIDI第10列。通过施加12.5 mL PW缓冲液洗涤PM MIDI柱。允许PW缓冲液通过重力流量流经PM MIDI柱并丢弃滤液。
INSL5 CRISPR 激活质粒 (h): sc-417448-ACT
成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 和 CRISPR 相关蛋白 (Cas9) 系统是一种适应性免疫反应防御机制，古细菌和细菌利用该机制来降解外来遗传物质。该机制可以重新用于其他功能，包括哺乳动物系统的基因组工程，例如基因敲除 (KO) (1,2) 和基因激活 (3-6)。CRISPR 激活质粒产品利用与 VP64 激活域融合的 D10A 和 N863A 失活 Cas9 (dCas9) 核酸酶与 sgRNA (MS2) 结合，从而实现特定基因的识别和上调，sgRNA (MS2) 是一种靶向特异性 sgRNA，经过设计可结合 MS2-P65-HSF1 融合蛋白 (6)。这种协同激活介质 (SAM) 转录激活系统提供了一个强大的系统，可最大限度地激活内源性基因表达 (6)。
质粒DNA maxiprep套件产品插件
NORGEN的纯化技术纯化基于自旋色谱柱色谱法。优先从其他细胞成分（例如基因组DNA和RNA）中纯化质粒DNA。该过程涉及首先颗粒的隔夜细菌培养物具有质粒DNA（请参阅第3页的流程图）。然后，使用提供的重悬溶液AZ重悬细菌颗粒，并使用裂解缓冲液N进行细菌。然后添加缓冲液。然后添加缓冲液TN，从而导致溶液中存在的基因组DNA和蛋白质。然后通过离心阐明裂解物，以去除含有质粒DNA的裂解物中的沉淀蛋白和基因组DNA。然后将澄清的裂解物加载到自旋柱上。Norgen的柱以取决于离子浓度的方式结合DNA，因此，只有质粒DNA才能与柱结合，而大多数消化的RNA和蛋白质将在流动中除去或保留在柱床的顶部。然后用提供的洗涤溶液J洗涤结合的DNA，以去除剩余的杂质。最后，无内毒素纯化的质粒DNA用洗脱缓冲液洗脱。纯化的DNA是最高质量的，可用于许多下游应用，包括测序，克隆和转染。
质粒DNA - 每个应用程序的正确质量
Northx Biologics提供了一项全面的PDNA服务，从R＆D等级到由EMA批准的顶级现代设施生产的GMP质粒。为了确保在阶段之间平稳地传递过程和测试，尽管灵活，但在质量等级之间保持一致。
AAV质粒制备的有效且高保真的方法
腺相关病毒（AAV）是基因治疗的强大载体；但是，使用AAV向量可能具有挑战性。每个构建体包含两个反向末端重复（ITR）序列，通常长145 bp，是感兴趣基因的侧面（图1）。ITR形成高度稳定的T形发夹，这对于病毒DNA 1的复制和封装至关重要。这些结构特征也会对传统克隆工作流造成严重破坏。自发缺失转移质粒的鼠疫DNA制剂，以及二级结构的形成确认性测序。因此，研究人员被双重打击：容易截断的AAV矢量，这些突变很难检测到。在这里，我们讨论了传播和验证AAV质粒的挑战，并展示了对工作流程的优化方法。
用Nanodrop One/ ... div>分析超螺旋质粒
3。Kysik，J.，Furtak，K.，Szymczak，G.，Skowroski，J.，Panusz，H。，＆Bartnik，E。（1979）。 分子克隆的限制片段源自小牛卫星I DNA的双ECORI/PSTI消化及其限制分析。 Zeitschrift Fur Naturforschung- C节生物科学杂志，34（12），1151–1155。 scopus。 https://doi.org/10.1515/ZNC-1979-1212Kysik，J.，Furtak，K.，Szymczak，G.，Skowroski，J.，Panusz，H。，＆Bartnik，E。（1979）。分子克隆的限制片段源自小牛卫星I DNA的双ECORI/PSTI消化及其限制分析。Zeitschrift Fur Naturforschung- C节生物科学杂志，34（12），1151–1155。scopus。https://doi.org/10.1515/ZNC-1979-1212
质粒 DNA 的自动分离和质量控制
图 1. 质粒 QC 工作流程说明。从过夜细菌培养物开始，可使用 KingFisher 系统纯化 DNA。为了精确测定数量，在进行后续步骤之前，通过限制性消化将纯化的 DNA 线性化。对于无液滴数字 PCR (dPCR) 定量，将线性化的 DNA 与 Applied Biosystems ™ TaqMan ™ 检测试剂混合，装入 Applied Biosystems ™ QuantStudio ™ Absolute Q ™ MAP16 板中，并在 QuantStudio Absolute Q 数字 PCR 系统上运行。为了验证质粒序列，使用 Applied Biosystems ™ BigDye ™ Terminator 循环测序试剂盒对线性化的 DNA 进行循环测序。然后在 CE 和分析之前使用 Applied Biosystems ™ BigDye XTerminator ™ 纯化试剂盒清理反应物。或者，使用 Applied Biosystems ™ BigDye ™ 直接循环测序试剂盒对 DNA 进行扩增和测序。在 CE 和分析之前，使用 BigDye XTerminator 纯化试剂盒清理这些反应。
新闻稿-Kaneka Eurogentec-1 公斤质粒 DNA-...
业务活动目前涵盖塑料、EPS 树脂、化学品和食品、药品、医疗器械、电气和电子材料以及合成纤维等广泛市场。生命科学相关活动目前是 Kaneka 具有战略意义的重要领域之一。该公司一直是生命科学领域的先驱。
宿主范围质粒RSF1010 DNA复制
广泛的宿主质粒RSF1010包含两个相反的启动信号SSIA和SSIB，用于DNA合成，取决于营养DNA复制的起源（ORIV）。如果已删除或倒置SSIA或SSIB，则在低拷贝数中保持了含有工程Orivs的RSF1010微型弹药，将其作为二聚体异常复制，并积聚了在Escherichia coil collewe preats fessefcef101010-Repcepcepcepcepcepc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc'repc''和Repc'repc'repc''''repc''和Repc。有趣的是，SOG原始酶（质粒Collb-P9的SOG基因产物）的附加细胞内供应与上述所有三个方面相反，这些微播的复制缺乏。对于RSF1010的微型杂粒也是如此，其中SSIA或SSIB被原始体组装位点（PAS）或G4型SSI信号（G位点）代替。此外，对两个相对定向的SSI信号对RSF1010的DNA复制的功能贡献的比较分析表明，无论其类型如何，SSI信号引起了DNA链伸出的启动，从而使Iterons远离Iteron的启动比在ITEREN中的功能更重要。我们认为该功能差异反映了RSF11O DNA复制的启动机械机械的固有特性。
ßA1-晶体蛋白 HDR 质粒 (m): sc-419822-HDR
含有由 CRISPR/Cas9 系统产生的双链断裂 (DSB) 的 DNA 可以通过非同源末端连接 (NHEJ) 或同源定向修复 (HDR) 途径进行修复 (1,2,3)。NHEJ 修复途径在切割位点引入非特异性插入或缺失，而 HDR 途径允许在 DSB 位点进行精确的基因编辑 (1,2,3)。靶向特异性 HDR 质粒为 DSB 提供 DNA 修复模板，当与 CRISPR/Cas9 KO 质粒共转染时，能够在发生 Cas9 诱导的 DNA 切割的位置插入特定的选择标记 (1,2)。HDR 质粒可以整合红色荧光蛋白 (RFP) 基因以直观地确认转染，并整合抗生素抗性基因 (嘌呤霉素) 以选择含有成功 CRISPR/Cas9 双链断裂的细胞。嘌呤霉素抗性和 RFP 编码基因两侧是两个 LoxP 位点，这些位点可被 Cre 载体识别，之后可利用该位点从基因组 DNA 中去除这些选择标记 (4,5)。