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World File Search System质粒
ZymoPURE™ II 质粒大量制备试剂盒
2. 加入 150 ml ZymoPURE ™ P2（蓝色），立即轻轻颠倒试管 6 次混匀。不要涡旋！室温下放置 3-5 分钟 3。当溶液呈清澈、紫色且粘稠时，表示细胞完全裂解。 3. 加入 150 ml ZymoPURE ™ P3（黄色），轻轻颠倒试管但彻底混匀。不要涡旋！样品完全变黄后再颠倒试管 5 次。中和完成时，样品将变黄，并形成淡黄色沉淀。 4. 将 ZymoPURE ™ Giga Filter 放在 33 mm 或 45 mm 颈玻璃瓶上，并将裂解物装入 ZymoPURE ™ Giga Filter 中。确保 ZymoPURE ™ Giga Filter 牢固地放在玻璃瓶顶部，等待 10 分钟让沉淀浮到顶部。 5. 将 ZymoPURE ™ Giga 过滤器连接到真空源并打开真空 4 直到回收约 375 ml 澄清的裂解物。保存澄清的裂解物！从千兆过滤器中回收约 375 ml 的裂解物对于下一步至关重要。如果澄清的裂解物体积低于约 375 ml，请参阅附录第 10 页有关调整步骤 6 中使用的 ZymoPURE™ 结合缓冲液体积的信息。
非洲猪瘟病毒质粒库 - CGSpace
非洲猪瘟病毒 (ASFV) 是一种大型、复杂的 DNA 病毒，属于 Asfarviridae 科，可引起非洲猪瘟 (ASF)，这是一种影响家猪和野猪种群的高致命疾病，死亡率高达 100%。这种疾病最初在非洲和撒丁岛流行，现已蔓延至全球，造成重大经济损失。尽管进行了广泛的研究，但全球尚未有有效的 ASFV 商业疫苗，这促使人们继续努力了解该病毒的遗传和功能特性。质粒是一种小的环状 DNA 分子，通过实现克隆、基因表达和蛋白质生产，在研究中发挥着至关重要的作用。本报告介绍了 ASFV 质粒库和相应数据库的开发，以支持 ASF 疫苗开发、基因功能分析和蛋白质表征方面的研究工作。该库包含编码 161 个 ASFV 开放阅读框 (ORF) 的质粒，这些质粒在 CMV 启动子的控制下克隆。质粒库有助于抗原筛选和功能测定，质粒内的限制酶位点可用于克隆和表达研究，确保 ASFV 研究的多功能性和可重复性。该质粒库的开发是加速 ASF 疫苗研究和推进分子研究的重要资源。它还为其应用于其他微生物奠定了基础，增强了其在更广泛的传染病研究中的实用性。
分子生物学中的技术 - 质粒DNA的方法...
t eChniquers i n M Olecular b Iology - 用于P LASMID DNA I求解DNA分离的方法：分子生物学技术在复杂基因组分析中的应用取决于准备纯质粒DNA的能力。大多数质粒DNA隔离技术有两种口味，简单 - 低质量的DNA制剂，更复杂，耗时但高质量的DNA制剂。对于许多DNA操作，例如限制酶分析，亚克隆和琼脂糖凝胶电泳，简单的方法就足够了。大多数DNA测序，PCR操作，转换和其他技术都需要高质量的制剂。大多数方法都以大量细菌细胞开头，这些细菌细胞包含选择的质粒并离心至颗粒。然后，细胞在基本条件下通过洗涤剂钠硫酸盐（SDS）的混合物裂解，或添加蛋白酶（溶菌酶）以削弱和破坏宿主细胞壁。这两种方法的结果都导致紧凑型超螺旋质粒DNA分子释放到溶液中。下一个问题是将RNA，基因组DNA和其他细胞成分与细胞分开。如何完成此操作取决于所使用的方法。碱性裂解制剂是隔离少量质粒DNA的最常用方法，通常称为小型质子。此方法将SDS用作弱洗涤剂，以在NaOH存在的情况下使细胞变性，该清洁剂可将细胞壁和其他细胞分子水解起来。高pH值通过添加乙酸钾进行中和。这将质粒DNA和RNA留在溶液中。钾对样品有额外的影响。钾离子与SD相互作用，使其成为不溶性的洗涤剂。SD会很容易沉淀，并且可以通过离心分离。这样做的不溶性SDS会捕获较大的基因组DNA并将其从上清液中清除。通常通过添加RNASEA消化去除RNA。这仅留下溶液中的蛋白质，碳水化合物和RNA核苷单体。原发性醇（例如乙醇或丙醇）用于沉淀DNA。这是通过对水的重新排序来实现的，使DNA聚集体并变得不溶性。结果是一种纯净的DNA颗粒，可以重悬于温和缓冲的溶液或水中。建议使用大量培养物中煮沸的微型REIPREP来制备少量的质粒DNA。虽然此方法非常快，但产生的DNA质量低于碱性裂解小型培训的质量。在碱性裂解小型方法中，溶菌酶用于水解负责使细菌细胞壁具有其强度的广泛交联蛋白。然后将细胞煮沸以进一步使蛋白质结染并破坏细胞壁。然后用酒精沉淀质粒DNA。这两种方法都将仅产生几µg质粒DNA。对于纯度较高的较大数量，需要许多其他步骤。通过在非常高的重力力下在氯化丘密度梯度中离心，根据其密度分离其密度。氯化剖腹梯度产生的高质量质粒DNA不含大多数污染物，但使用溴化乙锭来识别DNA（潜在的诱变剂），并且需要长时间的超级离心运行以建立密度梯度。该方法是通过使用碱性裂解方法裂解细胞的，并在350,000 x g下离心14小时。首先，将CSCL梯度在小管中制成，并用溴化乙锭添加DNA。在旋转时，DNA将向下迁移，直到达到与质粒相同的CSCL的密度。因此，较大的DNA将与紧凑的质粒DNA分离。用紫外线可视化质粒带，用针切除，然后重复该过程。您可以看到，这是一种非常复杂且乏味的方法，用于隔离DNA，通常不经常在柱分离的出现中使用。现在存在一种更流行的方法，它利用了质粒DNA的物理特性和碱性裂解方法中发现的污染物的差异。核酸是负电荷的，因此可以使用阴离子交换
革兰氏阴性细菌的一组重组质粒
我们构建了一组质粒，可用于在某些革兰氏阴性细菌中表达重新组合功能，从而促进体内遗传操作。这些质粒包括复制的起源和噬菌体λ基因组的片段，该基因组在其天然控制下包含红色基因（EXO，BET和GAM）。这些构建体不需要通常需要的抗终止事件才能进行红色表达，从而使它们在不同物种中的应用更可能。一些质粒具有温度敏感的复制子来简化固化。在创建这些向量时，我们开发了两个有用的重组应用程序。仅使用质粒起源和靶同源性，可以通过GAP-REPAIR检索任何与药物标记相关的基因。复制的质粒起源可以通过靶向替换来更改为不同的来源，从而有可能更改其拷贝数和主机范围。这两种技术都将被证明可用于操纵体内质粒。大多数红色质粒构造在大肠杆菌中催化有效的重组，其背景重组水平较低。这些红色质粒已在沙门氏菌中成功进行了测试，我们预计它们将在其他相关的革兰氏阴性细菌中提供有效的重组。由Elsevier B.V.
genematrix质粒微型DNA纯化试剂盒
H302 + H332如果吞咽或吸入有害。H315引起皮肤刺激。H319引起严重的眼睛刺激。H334如果吸入，可能会导致过敏或哮喘症状或呼吸困难。H317可能引起过敏性皮肤反应。P280戴防护手套/防护服/眼部保护/面部保护。 p284 [如果通风不足，呼吸保护。 P301 + P312如果吞咽：如果您感到不适，请致电毒药中心/医生。 p304 + p340如果吸入：将人移至新鲜空气并保持呼吸舒适。 P305 + P351 + P338如果在眼睛中：用水谨慎冲洗几分钟。 删除隐形眼镜，如果有的话，易于执行。 继续冲洗。 p333 + p313如果出现皮肤刺激或皮疹：获取医疗建议/注意。P280戴防护手套/防护服/眼部保护/面部保护。p284 [如果通风不足，呼吸保护。P301 + P312如果吞咽：如果您感到不适，请致电毒药中心/医生。p304 + p340如果吸入：将人移至新鲜空气并保持呼吸舒适。P305 + P351 + P338如果在眼睛中：用水谨慎冲洗几分钟。删除隐形眼镜，如果有的话，易于执行。继续冲洗。p333 + p313如果出现皮肤刺激或皮疹：获取医疗建议/注意。
LRP1 CRISPR激活质粒（M）：SC-421464-ACT
定期间隔间隔的短篇小学重复序列（CRISPR）和CRISPR相关蛋白（CAS9）系统是Archea和细菌用于降解的一种自适应免疫反应防御机制。该机制可以用于其他功能，包括用于哺乳动物系统的基因组工程，例如基因敲除（KO）（1,2）（1,2）和基因激活（3-6）。cRISPR激活质粒产物通过利用D10A和N863A停用CAS9（DCAS9）核酸酶与VP64 acti vation域融合的核酸酶，与SGRNA（MS2）（MS2），目标特异性SGRNA构成SGRNA工程2-HS 2-HS 2-HS 2-HS 2-HS 2-HS 2-HS 2-HS 2-HS 2-HS 2-HS 2-HS 2-HSFF F.Sff FORINAIN 。 这种协同激活介质（SAM）转录激活系统提供了一个强大的系统，以最大程度地激活内源基因表达（6）。。这种协同激活介质（SAM）转录激活系统提供了一个强大的系统，以最大程度地激活内源基因表达（6）。
君主质粒小型套件T1010手册
产品名称：BSRGI-HF®目录编号：R3575S浓度：20,000 U/ml单位定义：一个单位定义为在50°C的总反应量中，在37°C的1小时内，在1小时内，在Rcutsmart的lambda DNA中消除1 µg lambda DNA所需的酶量。包装批号：10273566到期日期：09/2026储存温度：-20°C存储条件：10 mm Tris-HCl，50 mm NACL，1 mm DTT，0.1 mm EDTA，0.1 mm EDTA，50％甘油，50％甘油，50％甘油，200 µg/ml ralbumin（200 µg/ml ralbumin（ph 7.4 l @ 25°cy/l vy/ps）
将质粒DNA转换为微圆
在此方案中，我们描述了一种将质粒DNA转化为DNA微圆的新方法，该方法仅由转基因序列组成。这种方法利用了质粒的可伸缩性，同时使用标准分子生物学方法将体外转化率转化为微圆，从而规定了对特殊生产细菌菌株的需求。
