lunula是一种单细胞生物化的恐龙。尽管在许多双重化的进化枝中都可以理解生物新蛋白质和荧光素酶合成的机理和基因,但在恐龙粉中,它仍然未知。我们利用了长时间和简短的读数,在这里介绍了P. Lunula转录组的从头大会。总共获得了9.75亿个过滤的配对读数,并将其组装成155,716个重叠群,该重叠群与功能上有功能上注释的普通成绩单相对应。该数据集对于提高我们对原生物学的理解并可以通过NCBI Bioproject(PRJNA727555)获得有价值。©2021作者。由Elsevier Inc.出版这是CC BY-NC-ND许可证(http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)下的开放访问文章
带有评论[PZ1]:也许从转录调节到重组的过渡更加顺利,您可以写出,这种“本地招聘”不仅导致了基因的转录,而且还会影响减数分裂的交叉形成
a)综合鼠HFPEF和HFREF(ANGII和MI)成纤维细胞研究的示意图。b+c)综合成纤维细胞的UMAP嵌入,疾病(HF,心力衰竭)与对照(B),研究(C)。d)综合成纤维细胞状态的顶部细胞状态标记表达的概述。e)UMAP嵌入,显示由细胞簇着色的集成的成纤维细胞地图集,即集成的成纤维细胞状态(IFS)。标签指示基于功能表征的可能的成纤维细胞分化。f)基于综合成纤维细胞状态中足迹基因的效果大小(AVG log2折叠变化)的估计途径活动。*后代z得分> 2。g)具有综合成纤维细胞状态标记的细胞外基质基因组的过度代表性分析。使用Benjamini Hochberg校正的超几何测试, *Q <0.05,** Q <0.01,*** q <0.001。
。cc-by 4.0国际许可证(未经同行评审证明)获得的是作者/资助者,他已授予Biorxiv授予Biorxiv的许可,以永久显示预印本。这是该版本发布的版权所有,于2023年5月9日发布。 https://doi.org/10.1101/2023.05.09.539950 doi:Biorxiv Preprint
注意:可以通过将RNTP浓度提高到4 mm,可以获得更高的RNA产量。MGCL浓度也应提高到20mm(高于16毫米的总RNTP浓度4 mm)。
细胞谱系历史及其分子状态编码组织发育和稳态的基本原理。当前的谱系录制小鼠模型的条形码多样性有限,单细胞谱系覆盖范围较差,从而排除了它们在由数百万个细胞组成的组织中的使用。在这里,我们开发了Darlin,这是一种改进的CAS9条形码小鼠系,它利用末端脱氧核苷酸转移酶(TDT)来增强30个CRISPR目标位点的插入事件,稳定地整合到3个不同的基因组基因座中。darlin是可诱导的,估计有〜10 18个层次条形码,并可以检测约60%的剖面单细胞中可用的条形码。使用Darlin,我们检查了发育中的造血干细胞(HSC)中的命运启动,并揭示了HSC迁移的独特特征。此外,我们为单个细胞中的共同介绍了一种方法来共同介绍DNA甲基化,染色质可及性,基因表达和谱系信息。darlin将在各种组织和生理环境中对谱系关系及其分子特征进行广泛的高分辨率研究。
动机:由于高通量和昂贵的测序方法,转录组学数据变得越来越易于访问。但是,数据稀缺性阻止了利用深度学习模型对表型预测的完整预测能力。人工增强训练集,即数据增强,建议作为正规化策略。数据增强对应于训练集的标签不变转换(例如,在文本数据上进行图像和语法解析的几何变换)。不幸的是,这种转换在跨文字组范围内未知。因此,已经提出了深层生成模型,例如生成对抗网络(GAN)来生成其他样本。在本文中,我们分析了基于GAN的数据增强策略,就性能指标和CAR表型的分类分析。
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具有CRISPR-CAS9的基因组工程中的长期障碍一直无法衡量Cas9编辑结果及其在单细胞分辨率下的功能效应。在这里,我们提出了Superb-Seq,这是一种利用T7原位转录和单细胞RNA测序的新技术,以共同测量靶向靶标Cas9编辑及其对基因表达的影响。我们在10,000 k562细胞上进行了高级seq,靶向了四个用七个引导RNA的染色质重塑基因。Superb-Seq在所有七个目标站点和其他36个非目标位点上确定了11,891个编辑事件。尽管选择了七个指南的高特异性,但其中有六个导致靶向脱靶编辑,频率从0.03%到18.6%的细胞范围不等。在USP9X的第一个内含子中,明显的脱靶编辑破坏了该基因的表达和超过150个下游基因。总而言之,由于罕见和常见的编辑事件的结合,CAS9非目标是普遍存在的,主要发生在靶向基因的内含子内,并且可以对基因表达产生广泛的影响。Superb-Seq使用现成的套件,标准设备,并且不需要病毒,这将使全基因组CRISPR屏幕能够在不同的细胞类型中以及与临床相关的指南的功能表征。