有一种新的过程,在这个过程 中,细胞从细胞核中清除有害的 DNA蛋白质病变,确保遗传物质 的稳定性,并促进细胞的存活。 研究小组将这一新的过程称为噬 核(nucleophagy)。 噬核是自噬的一种特殊形 式,是自然的细胞清洁机制,对 于修复DNA和确保细胞存活来说 至关重要。 噬核的过程涉及了一种称为 TEX264的蛋白。在接受结直肠癌 化疗的患者中,药物会导致DNA 的损伤,机体表达为TEX264,它 激活了噬核过程,将病变引导到 细胞的废物处理系统中,从而将 他们分解和破坏。 研究小组利用生物化学、 细胞生物学和生物信息学工具
国家研究开发机构——新能源产业技术综合开发机构(NEDO)的研究评估委员会针对每个评估项目设立由外部专家和相关技术领域的专业人士组成的研究评估小组,对评估项目的研究进行评估,并起草评估报告,最终由研究评估委员会完成。
(发行日期)2021-03-31(资源类型)书籍部分(版本)接受手稿(权利)©2021 Springer Nature Singapore Pte Ltd.
DNA的复制始于在称为复制起源的位点放松双螺旋。在这些位点,碱基之间的氢键被损坏,并且成对底座分开。一对复制片段聚集在一起并连接非复制DNA的位置称为复制叉。在细菌染色体中,DNA复制总是从称为原点的特定位点开始。每个来源控制一个称为复制子的DNA单元的复制。细菌具有复制的单个特定起源
将打靶特定人源基因的 Cas9 和 sgRNA 转染到 HEK293 细胞。转染所用的质粒 DNA 上含有 表达带双端核定位序列 ( NLS )的 Cas9 及 sgRNA 的表达框,通过 TransIT-X2 (Mirus) 转染 试剂进行转染。转染所用的 Cas9 mRNA 进行了假尿苷和 5- 甲基胞嘧啶修饰且带有双端 核定位序列,使用 transIT-mRNA 转染试剂将 sgRNA 和 mRNA 共转染。 Cas9 RNPs 使用脂质 体 RNAiMAX ( Life Technologies ) 进行反向转染, RNP 的终浓度为 10 nmol 。 Cas9 蛋白上不含 核定位序列。 EnGen Cas9 含有双端核定位序列。编辑效率通过 T7E1 实验进行分析,结果 以修饰百分比进行统计。
将打靶特定人源基因的 Cas9 和 sgRNA 转染到 HEK293 细胞。转染所用的质粒 DNA 上含有 表达带双端核定位序列 ( NLS )的 Cas9 及 sgRNA 的表达框,通过 TransIT-X2 (Mirus) 转染 试剂进行转染。转染所用的 Cas9 mRNA 进行了假尿苷和 5- 甲基胞嘧啶修饰且带有双端 核定位序列,使用 transIT-mRNA 转染试剂将 sgRNA 和 mRNA 共转染。 Cas9 RNPs 使用脂质 体 RNAiMAX ( Life Technologies ) 进行反向转染, RNP 的终浓度为 10 nmol 。 Cas9 蛋白上不含 核定位序列。 EnGen Cas9 含有双端核定位序列。编辑效率通过 T7E1 实验进行分析,结果 以修饰百分比进行统计。
dia-diamond中的负电荷氮态(NV)中心是光学发射器,其水平结构对外部扰动高度敏感,这使它们成为高度局部的电场和磁场,温度和应变的出色传感器[1-5]。NV中心对于量子计算和通信[6-10]以及量子现象(例如量子纠缠和叠加)的研究非常重要[11,12]。但是,由于钻石中的高折射率(〜2.4),有效地提取NV荧光通常会引起人们的注意,这会导致钻石 - 空气接口 - 空气界面和总内部反射的高反射,对于更大的发射角度而言。以前的尝试从散装钻石中提取更多光的尝试主要涉及钻石本身的蚀刻(一个复杂的制造过程,可能会对NV的特性产生不利影响,例如旋转相干性)[13-19]或仍需要高繁殖的机油免疫性易变到iS i iS i iS iS formimentimperife conformentimplients ISS的相互作用(添加了相应的系统)(添加了相应的系统)(添加了相应的系统)[ - 23]。此外,NV中心周围钻石的精确蚀刻可能是一个重大的挑战,可能会损坏钻石的表面,从而导致化学终止的粗糙度和修改[24],从而可以降低NV中心的量子性能[25,26]。在这里,我们设计了一个基于硅的纳米级轻萃取器(NLE),它位于平坦的,未完美的钻石表面的顶部,可以增强近地表NV发射器的光输出超过35倍,与未图案相比,将光线引导到狭窄的圆锥
神经丝轻链是神经司长损伤的已建立标志物,在各种神经系统疾病中,CSF和血液中升高。它越来越多地用于临床实践中,以帮助诊断和监测进展,并作为评估整个临床翻译神经科学领域的疾病改良疗法的安全性和功效的结果措施。人类生物流体中神经丝轻链的定量方法依赖于免疫测定,这些免疫测定能力有限地描述CSF中蛋白质的结构的能力,以及在不同的神经退行性疾病中可能会有所不同。在这项研究中,我们使用靶向质谱质谱eTry表征了CSF中CSF中的神经丝轻链物种以及神经炎症性疾病以及健康对照。我们表明,在本研究中开发的定量免疫沉淀 - 量表质谱法强烈地与CSF中的单分子阵列测量值强,跨质谱法跨质谱法和中心可重复。总而言之,我们创建了一种准确且具有成本效益的测定法,用于测量转化神经科学研究和临床实践中的关键生物标志物,可以轻松地将其多重多重并转化为临床实验室,以筛查和监测神经退行性疾病或急性脑受伤。
细菌“ candidatus nardonella dyophthoridicola”是一种革兰氏阴性的gam- maproteotototototabterial tocyobterial tocytobiont(图。1)。特别是,它是与象鼻虫相关的细胞内义务共同主义者(1)。通过向其宿主供应酪氨酸,细菌在表皮中起着至关重要的作用(2)。与第二个象鼻虫相关的符号不同,“ candidatus sodalis pierantonius”,它在宿主的整个生命周期中保持在功能性细菌中(3-5)。我们使用长阅读测序来研究“ Ca.nardonella dryophthoridicola”菌株nardrf,与意大利人种群相关的Rhynchophorus ferrugineus。2017年,昆虫宿主是从卡塔尼亚地区的一棵棕榈树中取样的。p在25°C,黑暗的24小时内,直到分成人。剖析了十个新出现的成年人以提取其细菌。然后按照制造商的动物组织提取说明,使用Dneasy血液和组织试剂盒(意大利Qiagen,意大利)合并细菌以进行DNA提取。在90V时通过0.8%琼脂糖凝胶电泳对DNA完整性进行了1H的验证。用纳米体100分光光度计(意大利的Thermo Fisher Scienti)和Qubit双链DNA(DSDNA)高敏化测定试剂盒测量了DNA纯度和浓度。使用R9.5流单元在奴才MK1B设备上进行了长阅读测序。使用Minknow V18.03.1进行测序48小时。读取量超过500 bp进行后续分析。重点识别为“ Ca.用于图书馆制备,使用1D连接测序试剂盒(SQK-LSK 108)原始Col使用了2.5 m g的非大量和非大小选择的总基因组DNA。然后,将最终DNA的0.5 m g加载到流动细胞上。基本调用,具有高准确性算法,质量截止值为7。所有工具均使用默认参数运行,除非另有说明。使用min-iasm(7)组装了元基因组fastq读取(主机和共生体)。nardonella dyophthoridicola”,以ncbi非冗余(NR)数据库进行鉴定。提取这些概念并用于重新填充组件。重叠群用于映射和提取“ Ca.nardonella dryophthoridicola”使用minimap2 v2.17(8)。然后使用Flye v2.8.1(9)重新组装836,116读。使用Circlator v1.5.5(10)与选项进行了循环 - Merge_Min_ID 85和 - Merge_breaklen 1000,如牛津Nanopore读取。使用公开的Illumina简短读数(SRA登录
(未通过同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。该版本的版权所有此版本发布于2024年7月3日。 https://doi.org/10.1101/2024.07.03.601885 doi:Biorxiv Preprint
