(Doudna 和 Charpentier,2014 年)并在图 1a 中以示意图形式显示。许多细菌物种都有 CRISPR 和 Cas 基因座的变体,其中作为基因组编辑工具研究最广泛的变体是 CRISPR-Cas9 系统(Makarova 等人,2011 年)。CRISPR-Cas9 介导的基因组编辑需要一个 Cas9 引导 RNA(gRNA)复合物,其中包含 Cas9、CRISPR RNA(crRNA)和反式激活 CRISPR RNA(tracrRNA)(见框 1:CRISPR 术语)。如前所述,可以通过多种方法将该复合物引入靶细胞(Lino 等人,2018 年;Shi 等人,2021 年)。在 crRNA 的引导下,该复合物与补体 DNA 结合,并伴有侧翼的原始间隔区相邻基序 5 0 -NGG-3 0(对于化脓性链球菌 Cas9)( Chylinski 等人,2013)。Cas9-gRNA 复合物在靶位点诱导双链断裂( Deltcheva 等人,2011;Shah 等人,2013),靶细胞可以通过非同源末端连接 (NHEJ)( Hefferin 和 Tomkinson,2005)或同源定向修复 (HDR)( Liang 等人,1998)进行修复。在 NHEJ 中,断裂的 DNA 链被重新连接,可以直接重新连接,也可以在随机核苷酸插入或缺失后重新连接( Takata 等人,1998)。这通常会导致移码突变和过早的终止密码子,因此,这种机制很容易用于敲除目的蛋白的表达。在 HDR 中,双链断裂是使用姐妹染色单体作为同源模板链来修复的。通过多次交换、DNA 合成和连接,受损链可以得到精确修复(Takata 等,1998)。不用姐妹染色单体作为模板链,而是将含有所需突变或基因盒的外源 DNA 模板以单链或双链 DNA 的形式引入,同源臂在外侧(Chen 等,2011;Radecke 等,2010;Rouet 等,1994)。多年来,越来越多的实验皮肤病学领域的研究利用了 CRISPR-Cas9 工具箱,尽管目前的数量有限,但在过去 5 年中有所增加(图 1 b 和 c 以及表 1)。本综述旨在认识到在人类表皮角质形成细胞 (KC) 中进行的所有 CRISPR-Cas9 工作,以确定在不同人类 KC 细胞来源中可用的最佳实践和成功策略的关键决定因素,同时为未来使用 CRISPR-Cas9 进行研究提供关键考虑,无论是基础应用还是临床应用。
近年来,生物技术和分子生物学领域的惊人进步导致了大量的新分子,具有彻底改变疾病治疗或预防疾病的潜力。“新生物疗法”包括新型肽,蛋白质药物和疫苗,基因和寡核苷酸疗法等部分。然而,由于体内占主导地位的巨大递送和靶向障碍,它们的潜力严重损害了。这些障碍通常是如此之大,以至于有效的药物输送和靶向现在被认为是许多治疗剂有效发展的关键。在响应中,高级药物输送和靶向的领域发生了活动的爆炸,因为研究人员应对这些障碍,并试图促进或增强新的生物治疗药的作用以及常规药物的作用。该领域的活性包括开发新的药物输送系统,以规避各种药代动力学障碍,这些障碍物可能导致零或最少的药物吸收,不需要的分布以及过早的失活和消除。技术还解决了最大程度地减少药物毒性或免疫原性或增强疫苗免疫原性的方法。靶向靶向行动部位的重要性是强烈的研究意义的主题,并且考虑到药物时机优化治疗方案的重要性,并且正在进行的受控,脉动和生物响应性释放系统的持续发展。新型药物输送途径也正在研究中。尽管这是对治疗学至关重要的重要领域,但目前尚无单一文本涵盖高级药物输送和靶向的各个方面,适合本科和继续教育课程的适当水平。一般药房教科书(与司法人员有关,都必须仅限于常规药品配方,例如片剂,胶囊和局部乳霜。在另一个极端,与该领域有关的现有文本倾向于集中于药物输送和靶向的单个方面,或者构成专业会议的程序,因此总是复杂而深奥的。本书旨在通过提供一个单一的,全面的文本来弥合这一差距,该文本描述了先进的药物输送和靶向的基本技术和科学原理,其当前的应用以及潜在的未来发展。本书主要用于本科生和研究生在相关方面的生物科学方面的课程。特别是,它应该证明对制定药学,药学科学,医学,牙科,生物化学,生物工程,生物技术或其他相关生物医学主题的学生有用。希望它也将作为(生物)制药部门使用的人,与医学和药剂师实践的职业的介绍性文本和参考来源。
摘要在增强的地热系统(例如)中,液压刺激用于提高生产率。egs通常在一个阶段的几乎垂直井中执行,而没有前提。在过去的几年中,石油和天然气行业通过使用多个阶段,支撑剂和水平(或偏离)井来实现刺激性能的根本改善。在大多数情况下,这些技术尚未在EG中采用。EGS社区的重点是“剪切刺激”的概念,将水注入引起自然裂缝的诱导滑移。结果,主管被认为是不必要的或无效的。使用包装工以实现多个阶段在技术上是不可行的,因为EGS井已完成孔洞(以最大程度地与天然断裂的连通性),并且在高温下没有可靠的敞开式包装工。在本文中,我们讨论了一种依赖于创建新裂缝而不是刺激自然断裂的EGS设计。在此设计中,钻孔(或偏离)井是用水泥壳进行钻孔并完成的。套管孔包装工或桥塞用于隔离区域,从而使多种阶段的断裂处理可以通过套管中的穿孔泵送。proppant被注入,可能与粘粘剂一起注入。我们进行了简单的计算,以估计多个阶段和支撑剂对通过EGS Doublet可以维持的流量的潜在影响。这些计算旨在进行粗略的估计并提供灵敏度分析,而不是提供详细的分析。我们发现,具有多个阶段和支撑剂的EGS设计相对于当前的设计,应具有显着改善的经济表现。具有足够的阶段,井孔中的压力损失将比储层中的压力损失更多。我们没有对热突破进行计算,但是我们希望使用多个阶段将有助于改善储层接触并防止过早的热突破。我们回顾了文献,以评估我们提出的设计的技术可行性。发现,当前技术可以使用额定为地热温度的壳体孔包装工。对EGS现场经验的综述表明,在极少数情况下,当使用支撑剂时,即使在花岗岩中,它们也始终提高了生产力。有一些实验室证据表明,在高温下可能会随着时间的推移化学降解,但也有证据表明某些涂层的支撑剂对降解具有抵抗力。拟议的设计将增加成本,但每口井的流量(和收入)的根本改善。
肠道轴的理论自数十年以来就成为研究热点,肠道微生物群在精神疾病中的作用引起了特别关注。2018年肠道心理学的主张清楚地表明了肠道,微生物群,大脑和心理健康之间的联系(Liang等,2018)。图1显示了PubMed中文章数量的显着增加。肠道微生物群和大脑发育的变化几乎同步发生。对协调的破坏可能导致各种脑部疾病,包括神经发育和神经退行性疾病(Borre等,2014; Liang等,2018)。早期发展可能会影响个人一生。在这个系列中,涉及早产是严重的问题。过早的婴儿异常暴露于意外的环境因素时,他们可能必须面对围产期白质损伤(WMI)或其他神经发育障碍的重大风险。研究表明,它们的肠道菌群和脑发育明显受损,脑损伤与像克雷伯氏菌这样的不友好细菌的过度生长相关(Seki等,2021)。Wang等。 总结了WMI下菌群甲状腺轴的作用,指出肠道菌群可以通过包括SCFAS的产生,细胞因子调节和氧化应激减轻在内的途径来使大脑充满脑部,并提出益生菌和益生菌治疗可以是改善WMI的有益途径。 肠道菌群在预防新生儿脑膜炎中也很重要。Wang等。总结了WMI下菌群甲状腺轴的作用,指出肠道菌群可以通过包括SCFAS的产生,细胞因子调节和氧化应激减轻在内的途径来使大脑充满脑部,并提出益生菌和益生菌治疗可以是改善WMI的有益途径。肠道菌群在预防新生儿脑膜炎中也很重要。肠道微生物群的不成熟和上皮屏障的允许性促进了细菌,例如B组链球菌从肠道传播到大脑,并集体解释了对细菌性脑膜炎的新生儿敏感性(Travier等,2021)。肠道教育的免疫细胞,包括IgA浆细胞,B细胞,NK细胞和T细胞等。可以迁移到脑膜上,以保护脑实质免受病原体感染。无菌啮齿动物的脑膜缺乏这些免疫细胞,正常肠道菌群可能是迁移的关键因素(Fitzpatrick等,2020; Di Marco Barros等,2022)。给药益生菌和/或益生元可以通过促进肠道粘膜防御的成熟来帮助预防新生儿细菌性脑膜炎(Fitzpatrick等,2020; Travier等,2021; Di Marco Barros et al。,2022年)。
6.3抗高血压高血压另请参见心脏基金会的高血压临床信息以及澳大利亚评估和管理心血管疾病风险风险观察性研究的指南表明,随着BP的增加,心脏血管(CV)的死亡率随着115/75 mm Hg的增加而增加。年龄,性别(男性)和其他简历风险因素导致这种风险。正常张力和高血压之间的区别是任意的:通常将正常源性视为120 mm Hg收缩期(SBP)/80 mM Hg舒张压(DBP)及以下的临床BP,高血压为> 140/90 mm Hg。开始治疗的决定应纳入BP,总体CV风险和最终器官损害的彻底评估。药物使用的基本原理减少了过早的CV发病率和死亡率以及影响大脑,肾脏和视网膜的微血管疾病。降低了妊娠高血压疾病的母体和胎儿发病率和死亡率,请参见怀孕的高血压P251。BP测量确认BP的水平,并在不同的情况下具有多个读数;确保正确的袖带尺寸;考虑对BP的白色外套影响的可能性。测量方法会影响结果:Ambula-Torgory和Home BP通常低于诊所BP,并且预测结果的预测指标更强。自动化办公室BP测量值可能不会由员工观察到,其提供的SBP比诊所读数要低得多的SBP(约10-20毫米Hg)。这种方法用于Sprint研究,但目前在澳大利亚不经常实践。识别和治疗其他可修改的简历危险因素,例如肥胖和血脂异常;鼓励戒烟。开始药物治疗之前,请寻找高血压的继发原因(包括药物,例如NSAID,皮质类固醇)和最终器官损伤的证据。鼓励所有患者的健康生活方式(例如体重减轻,体育锻炼增加,健康饮食)。这种干预措施可以减少BP(有可能避免或延迟对抗抑制剂的需求)。常规有氧运动可以将白天SBP降低3.2毫米Hg,并且超重人的体重减轻10公斤可以将SBP降低6-10毫米Hg。评估心血管风险CV风险评估对于临床上确定为高风险的人是不必要的:患有现有/已确立的CV疾病的人(例如MI,中风,血管疾病),家族性高chole-静脉 - 静脉 - 静脉 - 静脉 - 静脉血液或中度到中度至较长的年史年不是慢性肾脏疾病。
引言Duchenne肌营养不良症(DMD)是由编码细胞内蛋白质肌营养不良蛋白的基因突变引起的,是一种严重的X染色体染色体连接疾病,其特征是渐进的肌肉无力和变性。除了特征良好的骨骼肌病理学外,DMD还与相关的心脏并发症有关(Shirokova和Niggli,2013; Spurney,2011)。在其中,心律不齐和扩张的心肌病的发展极大地有助于与该疾病伴随的发病率和死亡率。在DMD背景下,导致心脏并发症的机制在很大程度上未知,这增加了对DMD动物模型的基础研究工作的需求。在使用的DMD动物模型中(McGreevy等,2015; Wells,2018),MDX小鼠是最著名的,最广泛使用的。它在鼠DMD基因的外显子23中具有过早的停止突变,因此未能翻译功能性全长肌营养不良蛋白(Sicinski等,1989)。尽管MDX小鼠是DMD的有用的遗传和生化模型,但仅部分模仿了人类疾病。因此,与DMD患者相比,MDX小鼠的寿命略有缩短,并且没有显示出明显的肌肉营养不良症状(Grady等,1997; Gutpell等,2015)。此外,MDX小鼠的心脏异常仅出现晚期(Quinlan等,2004),与DMD患者发生的心肌病相比是温和的(Grady等,1997; Janssen等,2005)。这质疑该动物模型研究心脏病表型的适用性。2014年,Larcher及其同事使用转录激活剂样效应子核酸酶靶向DMD基因的外显子23的发展肌营养不良蛋白缺陷型大鼠的发展(Larcher等,2014)。在这些DMD MDX大鼠中,心肌受坏死和纤维化的影响,并显示出进行性扩张性心肌病的迹象。超声心动图显示出明显的同心重塑和舒张功能的改变。基于这些发现,作者认为,DMD MDX大鼠中心脏病表型在DMD患者中观察到的,并且该动物模型可能适用于临床前DMD研究(Larcher等,2014)。该研究的弱点 - 实际关注骨骼肌肉 - 是DMD MDX大鼠的心脏病表型没有详细表征。例如,超声心动图仅对3个月大但不老的大鼠进行。此外,作者(Larcher等人,2014年)没有研究可能发生的血管并发症,例如增强的动脉僵硬度(Ryan等,2017)和内皮细胞(EC)功能障碍(Miike等,1987),这也可能有助于DMD患者的心脏病概念型的发展。最后,在细胞水平上的功能研究(即dmd MDX心肌细胞)尚未进行。考虑到缺乏证据,本研究的目的是提供处理编辑器的详细表征:Monica J.正义获得了2020年10月8日; 2020年12月23日接受
Menzies的研究人员为结构种族主义对不平等糖尿病病例和护理的影响全球研究做出了贡献。2323年6月23日,在柳叶刀和柳叶刀糖尿病和内分泌学期刊上发表的有关糖尿病研究的新系列均具有糖尿病的糖尿病,尽管糖尿病的糖尿病是普遍存在的,但在大多数疾病中都在不断增长,并且在全球范围内增强了全球性疾病的发展。研究人员发现,少数族裔群体经历的结构性种族主义以及低收入国家经历的地理不平等正在加速世界各地糖尿病疾病,疾病和死亡的飞涨。发表在《柳叶刀》上的《糖尿病全球不平等:结构性种族主义和地理不平等的作用》中,在糖尿病结果中回顾了结构不平等影响社会对健康和糖尿病的社会决定因素在全球范围内影响社会决定因素的复杂和重叠的方式。作者分析了先前关于糖尿病的研究,以研究结构不平等(结构性种族主义和地理不平等)如何加速了世界各地的糖尿病率。糖尿病仍然是全国和北部地区所有原住民的原住民和/或托雷斯海峡岛民女性的主要死亡原因。原住民和托雷斯海峡岛民的种群的可能性是普通人群患有2型糖尿病(T2D)的可能性的3倍。在澳大利亚中部有40%的成年人患有糖尿病。他们也是全球青年t2D的最高速度之一。最年轻的青年诊断是在北部北部和中部的2022年报告中的4岁。Menzies Health Research的副主任研究教授Louise Maple-Brown和高级研究官Sian Graham被邀请成为该系列的合着者。作为他们工作的一部分,他们讨论了增加的糖尿病风险与人们所生活的家庭环境有关,代际创伤以及心理健康和福祉,偏远社区的饮食不安全以及人满为患的住房也被强调为糖尿病自我管理和护理的障碍。研究人员强调/总结了与原住民和托雷斯海峡岛民中与糖尿病有关的孟席斯群岛最新研究的关键发现,包括越来越多的年轻人在澳大利亚患糖尿病。在澳大利亚中部,在25岁以下的原住民和托雷斯海峡岛民青年中,糖尿病患病率最高(3.1%),年龄在25岁以下,年龄在15至24岁之间,原住民和托雷斯海峡岛民女性更有可能被诊断为T2D。那些较高的青年T2D发生率也有助于妊娠前糖尿病率更高,在澳大利亚中部怀孕的原住民妇女中,高达8.4%。这项研究强调,由于糖尿病不平等,澳大利亚原住民和托雷斯海峡岛民社区的扩大,T2D及其并发症经历了显着和过早的发病率和死亡率。在2021年,原住民和托雷斯海峡岛民人民的糖尿病相关死亡率和住院率是非土著澳大利亚人的4倍以上。死亡的中位年龄为62.5岁,而澳大利亚总人口为82.2岁,患有心血管疾病和糖尿病。
SARS-COV-2疫苗接种。由英国血液和骨髓移植和细胞治疗疫苗接种小组委员会(BSBMT-CT-VSC)制备;最新更新于2023年8月1日,此更新反映了截至01/08/2023截至20023年英国的SARS-COV-2疫苗以及HSCT或CAR-T治疗后使用的摘要建议,该建议是基于UKHSA和NHSE国家的成人国家协议(2023年3月27日)和儿童(3月2023日),UK绿色书籍的consess and Consens and Consens consens and Consens consens and Consens consens consens consens consess consess,小组(CCLG)和英国感染协会。请参阅本文档的先前版本,以进行有关SARS-COV-2-2疫苗的更广泛讨论,包括英国其他有执照的疫苗,这些疫苗可能不再容易获得。HSCT后,HSCT受体的重新疫苗接种时间表,可预防疫苗的抗体滴度的下降在数周之内显然是明显的,并且在HSCT后可能会持续数年。 1-10国际团体因此建议HSCT接受者被认为是从未接种疫苗的,并提供了完整的重新接种时间表。 11-13缺乏HSCT受体中的疫苗功效研究,时间表主要基于免疫原性数据。 尽管对其他疫苗的反应通常低于免疫能力的个体,但肺炎球菌结合物疫苗可能早在HSCT 12后3个月就可以免疫原性,而6个月以前的其他一些疫苗。 14,15国际准则建议重新接种时间表从HSCT后3-6个月开始。HSCT后,HSCT受体的重新疫苗接种时间表,可预防疫苗的抗体滴度的下降在数周之内显然是明显的,并且在HSCT后可能会持续数年。1-10国际团体因此建议HSCT接受者被认为是从未接种疫苗的,并提供了完整的重新接种时间表。11-13缺乏HSCT受体中的疫苗功效研究,时间表主要基于免疫原性数据。尽管对其他疫苗的反应通常低于免疫能力的个体,但肺炎球菌结合物疫苗可能早在HSCT 12后3个月就可以免疫原性,而6个月以前的其他一些疫苗。14,15国际准则建议重新接种时间表从HSCT后3-6个月开始。12,13个数据描述了移植物与宿主疾病(GVHD)对疫苗免疫原性的影响是矛盾的,并且大多数国际群体都主张疫苗接种,而不论GVHD如何,以及这种疾病所需的任何治疗方法。英国HSCT后疫苗接种实践在自体和同种异体环境中的儿科和成人HSCT接受者差异很大。HSCT受体HSCT和CAR-T受体中的16,17 SARS-COV-2疫苗接种位于19号高危组中,并以最早的有效时间点的疫苗接种来赋予免疫力。两剂辉瑞疫苗后的血清转化已显示出在50 - 84.7%的同种异体HSCT受体中发生,而自体HSCT受体的60 - 84%发生在18-22中,其中包括在包括健康对照参与者中的18-22。已注意到自体和同种异体HSCT受体之间的20种类似的抗体滴度。23还观察到在HSCT后的头12个月内,个体的抗体诱导也较低。来自接种疫苗的CAR-T治疗接受者的19,20,23个数据有限,但有迹象表明免疫原性可能低于HSCT受体。 18,20,21一项研究报告了HSCT受体中3次原发性辉瑞疫苗剂量的免疫原性表明,有42%的先前非反应器在预定的抗体阈值阈值中获得了预测性中和活性的抗体滴定剂。 在没有最佳数据以指导HSCT接受者中的疫苗接种策略的情况下,需要对HSCT和CAR-T接收者进行疫苗接种的建议24 BSBMTCT建议,需要务实的建议。来自接种疫苗的CAR-T治疗接受者的19,20,23个数据有限,但有迹象表明免疫原性可能低于HSCT受体。18,20,21一项研究报告了HSCT受体中3次原发性辉瑞疫苗剂量的免疫原性表明,有42%的先前非反应器在预定的抗体阈值阈值中获得了预测性中和活性的抗体滴定剂。 在没有最佳数据以指导HSCT接受者中的疫苗接种策略的情况下,需要对HSCT和CAR-T接收者进行疫苗接种的建议24 BSBMTCT建议,需要务实的建议。18,20,21一项研究报告了HSCT受体中3次原发性辉瑞疫苗剂量的免疫原性表明,有42%的先前非反应器在预定的抗体阈值阈值中获得了预测性中和活性的抗体滴定剂。在没有最佳数据以指导HSCT接受者中的疫苗接种策略的情况下,需要对HSCT和CAR-T接收者进行疫苗接种的建议24 BSBMTCT建议,需要务实的建议。疫苗接种过早的时间点可能是免疫原性的,而晚期疫苗接种可能会使HSCT和CAR-T接收者长期存在不必要的风险。代表BSBMTCT的国家专家小组已经准备了以下声明。该小组借鉴了成人和小儿骨髓移植,CAR-T治疗,传染病,疫苗学和免疫学方面的专业知识。承认这些陈述的局限性,但面对现有的临床证据,它们在该患者人群中提供了务实的位置。这些陈述的重点是在持续的SARS-COV-2传播的背景下,潜在地向非常高风险的人群提供一定程度的保护。考虑到该小组已既定的疫苗和专家意见的证据,提出了以下建议:HSCT和CAR-T
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