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World File Search System适体
支持信息是适体...
化学和解决方案。氯化镁（MGCL 2），碳酸氢铵（NH 4 HCO 3），L-甘氨酸，Trizma®碱基，Tween-20，乙醇胺（EA），N-（3-二甲基氨基氨基丙基）-N'-乙基甲基二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二二酰基（EDC） bovine serum albumin (BSA), sodium hydroxide, sodium chloride, 4-morpholineethanesulfonic acid monohydrate (MES), hydrochloric acid, formic acid (FA), streptavidin-alkaline phosphatase from Streptomyces avidinii conjugate (Strep-ALP) and lysozyme from chicken egg white were purchased from Merck （意大利米兰）。磷酸钾（KH 2 PO 4），二氯磷酸二硫酸氢钾（K 2 HPO 4），磷酸钠二迪巴斯二硫酸二硫代十二碳水化酸盐（Na 2 HPO 4·12H 2 O），氯化钾和无rnase含水量和无RNase水的含量是从Carlo Erba（Cornaredo Erba（Cornaredo）（Cornaredo）（Cornaredo）（Cornaredo）（Cornaredo），Milan，Milan，Milan，Milan，Milan，Italan，Italan，Italy。氢喹酮双磷酸（HQDP）由Metrohm Italiana（Origgio，意大利Varese）提供。通过Milli-Q Element A10系统（Millipore，旧金山，加利福尼亚州，美国）获得了去离子水，并用于缓冲溶液制备。缓冲溶液的组成如下。无RNase缓冲液用于所有RNA适体的实验中。单链DNA序列购自Biomers.net（德国ULM），而C80RNA序列是从代替（Carlo Erba，Carlo Erba，Milan，意大利）。所有的寡核酸均处于干燥状态，适当地等分以避免反复的冻结/解冻周期。在Milli-Q水中以DNA寡核素进行了冻干等分试样的重悬，而C80RNA的无RNase水中的水则达到了供应商建议的100μM终浓度。库存溶液存储在-20°C。MES缓冲液：25毫米ME（pH 5.0）; Tris缓冲液：0.1 MTrizma®基础，5 mm MGCL 2（pH 7.4）; TRIS-T缓冲液：0.1 MTrizma®基础，5 mm MGCL 2，0.05％w/vtween®20（pH 7.4）; TRIS盐水缓冲液：20 mMTrizma®基础，5 mM MGCL 2，0.1 M NaCl（pH 7.4）;含镁离子（PBS-MG 2+）的磷酸盐缓冲盐盐水：1.5 mm kH 2 PO 4，8 mm Na 2 HPO 4，137 mm NaCl，2.7 mm KCl，1 mm MGCL 2（pH 7.4）；从Thermo Fisher Scientific（美国马萨诸塞州沃尔瑟姆）购买磷酸盐缓冲盐水（PBS）作为干燥粉末，其溶解后具有以下成分：0.1 m Na 2 HPO 4，0.15 m NaCl（pH 7.2）； Tris甘氨酸钾（TGK）缓冲液：25 mMTrizma®基础，192 mm L-甘氨酸，5 mm K 2 HPO 4（pH 8.3）。
基于技术的智慧养老模式下的适老空间设计研究
1.1智慧捐赠智能养老金的概念首先是由英国人生信任提出的，这意味着使用现代的先进科学和技术在跨时空提供老年护理服务，打破了原始的传统养老金模式。英国生命信托基金会提出的智能退休金的概念相对宏观。智能技术包括互联网技术，生命科学技术，信息技术和其他涵盖各种学科的技术类别。在中国，国家老化办公室在2012年首次提出了“智能养老金”的概念。它的核心基本上与英国生命信托基金会提出的“聪明的养老金”基本相同，该信托基金会使用聪明的手段来改善老年人的生活。
两种具有抗病毒活性的 RNA 适体。适体是理想的抗病毒药物吗？
摘要：当前的 Covid-19 大流行指出了即使是最先进的社会在对抗病毒 RNA 感染方面也存在一些重大缺陷。再一次，事实表明缺乏有效的药物来控制 RNA 病毒。适体是多种分子（包括蛋白质和核酸）的有效配体。它们的特异性和作用机制使它们成为干扰病毒 RNA 基因组中编码功能的非常有前途的分子。RNA 病毒将基本信息存储在保守的结构基因组 RNA 元素中，这些元素促进了感染周期的重要步骤。这项工作描述了我们实验室进行的两个有据可查的 RNA 适体实例，它们分别对 HIV-1 和 HCV RNA 基因组的高度保守的结构域具有抗病毒活性。这两个很好的例子说明了适体在对抗 RNA 病毒的治疗空白方面的潜力。
DNA适体的特点及应用
(a)：本土医疗技术的主要特点和潜在应用：(i) 用于前列腺癌检测的脱氧核糖核酸 (DNA) 适体：适体是可以与特定靶标（例如蛋白质、碳水化合物甚至活细胞）以高亲和力结合的小分子。适体在癌症中的作用：在癌细胞中，某些特定于癌症类型的蛋白质的含量与正常细胞相比异常高。这些蛋白质可用于识别癌细胞的存在、它们在体内的定位以及癌症治疗。由于适体可以与特定靶标（例如蛋白质、碳水化合物甚至活细胞）以高亲和力结合，因此它们可用于靶向癌细胞表面的这种特定蛋白质。IITD 的贡献：印度理工学院德里分校的研究人员已经制造出 DNA 适体来靶向前列腺癌细胞表面的蛋白质。由于其尺寸小（2 纳米）、对特定配体/结合剂的高亲和力和稳定性，它可以作为生物传感器的出色传感元件。潜在应用：除了检测之外，印度理工学院德里分校制造的 DNA 适体还可以用于治疗前列腺癌细胞。为此，制造的适体已与用于治疗前列腺癌的药物结合。由于尺寸小（约为抗体的五分之一），适体作为光子生物传感器设备的传感层具有额外的优势；并且可以作为药物输送剂。
荧光 DNA 适体的细胞内表达
图 4 . (A) 对表达逆转录子 Eco2 (67 nt) 或 4LE-v1 至 v4 (126 nt) 的细胞中提取的 RT-DNA 进行变性 PAGE 分析。基因组编码的逆转录子 Eco1 (90 nt) 作为内部控制。标记物 M1 是 4LE- v4 的化学合成 DNA 版本。(B) 通过长度标准化荧光带强度分析确定逆转录子 Eco2 (67 nt) 和 4LE 变体相对应的 RT-DNA 相对于内源性 Eco1 的富集倍数。所示数据来自 n = 3 个技术重复。(C) 用 DFHBI-1T 进行大量体内荧光测量。配对 t 检验，诱导与未诱导：Eco2，p = 0.86；4LE-v1，p = 0.27；4LE-v2，p = 0.003；4LE-v3，p = 0.007； 4LE-v4，p = 0.005；n = 3 个生物学重复。（D）表达 4Lettuce 位置变体的 DFHBI-1T 染色细胞的流式细胞术分析。153
基于适体的智能靶向和空间触发——...
摘要：近年来，在寻求更有效、更精确的治疗干预措施的推动下，药物输送领域取得了显著进展。在所采用的众多策略中，将适体作为靶向部分和刺激响应系统进行整合已成为一种有前途的途径，尤其是在抗癌治疗方面。本综述探讨了靶向药物输送系统的前沿进展，重点介绍了适体和刺激响应平台的整合，以增强空间抗癌治疗。在基于适体的药物输送系统中，我们深入研究了适体的多种应用，研究了它们与金、二氧化硅和碳材料的结合。讨论了适体与这些材料之间的协同作用，强调了它们在实现精确和靶向药物输送方面的潜力。此外，我们还探索了刺激响应药物输送系统，重点是空间抗癌治疗。本文阐述了肿瘤微环境响应性纳米粒子，并详细介绍了它们利用癌组织内的动态条件进行受控药物释放的能力。本文研究了外部刺激响应策略，包括超声介导、光响应和磁引导药物输送系统，以了解它们在实现协同抗癌作用方面的作用。本综述整合了精准医疗的各种方法，展示了适体和刺激响应系统在革命性药物输送策略以增强抗癌治疗方面的潜力。
基于 CRISPR-Cas 和适体的病原体诊断系统：综述
病原体感染会导致人类和动物出现严重的临床疾病。人与动物接触的增多和环境的不断变化加剧了人畜共患传染病的传播。最近，世界卫生组织已将一些人畜共患流行病宣布为国际关注的突发公共卫生事件。因此，快速准确地检测致病病原体对于对抗新发和再发传染病尤为重要。传统的病原体检测工具耗时、成本高，并且需要熟练的人员，这极大地阻碍了快速诊断测试的发展，特别是在资源受限的地区。基于成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR-)-Cas 和适体的平台已经取代了传统的病原体检测方法。本文我们回顾了两种用于临床和食源性病原微生物的新型下一代核心病原体检测平台：基于 CRISPR-Cas 的系统，包括 dCas9、Cas12a/b、Cas13 和 Cas14；以及基于适体的生物传感器检测工具。我们重点介绍了基于 CRISPR-Cas 和适体的技术，并比较了它们的优缺点。基于 CRISPR-Cas 的工具需要繁琐的程序，例如核酸扩增和提取，而基于适体的工具则需要提高灵敏度。我们回顾了 CRISPR-Cas 和适体技术的结合，作为克服这些缺陷的一种有前途的方法。最后，我们讨论了基于 Cas14 的工具作为功能更强大的平台，用于检测非核酸靶标。关键词：成簇的规律间隔的短回文重复序列-Cas、适体、病原体检测、诊断工具
开发适合适体生物传感器的CD10重组人Neprilysin蛋白的高亲和力适体
许多炎症关节疾病与CD10蛋白的表达相关，CD10蛋白在炎症和疼痛传播信号中起很大作用。这种促炎性机制是人类肌肉骨骼组织中各种关节的关节软骨降解的主要指标。CD10在间充质干细胞（MSC）中的表达与其免疫调节和软骨保护作用直接相关。因此，该项目着重于开发基于适应性的生物传感器，该生物传感器将检测CD10表达而不会扰动样品。适体是一个小的单链核酸分子，可以折叠成独特的结构，从而使它们能够高特异性与各种分子蛋白靶标结合。这使他们能够检测出大量的高和低丰度分子。该项目的第一步是使用称为SELEX（指数富集对配体的系统演变）的过程为CD10开发高亲和力适体。我们从一个初始的单链RNA库开始，该库包含大约10 14个不同的序列。将RNA文库与溶液中的CD10蛋白一起孵育。然后使用硝酸纤维素滤光片将蛋白-RNA复合物与未经膜的RNA分离。然后，在对RNA进行逆转录和PCR之前，我们将蛋白质与RNA分开。第一轮之后的最终产物包含与CD10蛋白结合的ssRNA分子。我已经完成了2轮SELEX，并有令人鼓舞的结果。此过程将重复大约10次，使我们能够识别与CD10高亲和力结合的RNA适体。这是开发适体CRISPR传感器的关键步骤，因为某些样品的CD10表达较低。
基于适体的 CRISPR/Cas 抑制剂的开发...
使用 CRISPR / Cas9 系统进行基因组编辑时发生的意外突变或缺失仍然是该技术的一个关键未解问题。阻断细胞中过量或长时间的 Cas9 活性被认为是解决此问题的一种方法。在这里，我们报告了一种针对 Cas9 的抑制性 DNA 适体，通过体外选择（通过指数富集系统地进化配体）并随后用体外裂解试验进行筛选而开发。抑制适体可以以低纳摩尔亲和力与 Cas9 结合，并与 CRISPR RNA 部分形成双链，从而有助于其抑制活性。我们还证明，用锁核酸改进抑制适体可有效抑制细胞中 Cas9 指导的基因组编辑并减少脱靶基因组编辑。这里介绍的研究结果可能有助于开发更安全、可控的基因组编辑以用于生物医学研究和基因治疗。
适体：有希望的疾病诊断和治疗工具
摘要：适体是短的，单链的DNA或RNA（ssDNA或SSRNA）生物分子，可以选择性地与特定受体相连，包括蛋白质，肽，碳水化合物，小分子，危险化学物质和活细胞。在过去的十年中，适体开始从基本研究转向各种工业应用。诊断的创建比临床应用的开发更为普遍，因为改善适体的体内稳定性和药代动力学进行诊断测试不需要重大修改。基于越来越多的注意力，由于体外选择技术的进步，通过指数富集（SELEX）的系统进化，生成适体的助学剂的功效已改善。许多疾病，包括分枝杆菌结核病，treponema pallidum，新颖的冠状病毒，艾滋病毒，粘液等，对人们的福祉揭示了很大的威胁，并在社会上赋予了重要的社会经济能力。因此，对病原体的初始和精确诊断对于及时和成功的治疗至关重要。由于缺乏可靠的探针来识别感染的生物学标志物，在分子和纳米级处检测到人类感染性疾病一直非常困惑。通过指数富集对配体的选择性生长，一组具有高特异性和敏感性称为适体的塑性寡核苷酸，在体外测试（SELEX）。越来越多的药物适体目前是临床前研究或临床试验的主题。随着基于SELEX的Aptamer筛选技术的持续发展，适体应用程序的范围已大大扩展。本文回顾了生物医学中核酸适体的演变，特别强调了它们如何用于诊断传染病。本文讨论了用于治疗包括冠状病毒在内的各种疾病的治疗适体的创建和评估。但是，适体技术的重大状态受到了几种技术限制，这些技术限制阻碍了创新的适体通过诊所的通行，并使适体业务变得更加困难。本综述主要集中在克服障碍的方法上，阻碍了适体在诊断和治疗方面的广泛部署，以及可能会大大扩展适体使用范围并为几位研究人员提供未来方向的策略。