1 University of Reims Champagne Ardenne, Cognition laboratory, Health, Société, EA 6291, 51100 Reims, France 2 Center Rémois de Psychotherapie and Neuromodulation, 51100 Reims, France 3 University Pole of Psychiatry, EPSM and CHU de Reims, 51100 Reims, France 4 McGill University, Douglas Mental Health University Institute, 11290加拿大蒙特利尔5冠军国立大学研究所,认知科学,技术与人体工程学实验室,图卢兹大学,图卢兹大学,法国81000,阿尔比6 Inserm 6 Inserm U1247 grap,酒精和药物研究小组,Picardy Jules University of Picardy Jules Jules Verne,Verne,Verne Universe verne,80000 Amiens,80000 Amiens,France 7射线科学界,REIMS 5 REIMS 5 REIMS,51100 REIMS,51100,香槟 - 艾登(Champagne-Ardenne),克雷斯特实验室,法国51100雷姆斯9雷米斯大学香槟大学 - 阿尔登大学医学院,法国51100雷姆斯,应将其添加到ksenija vucurovic,ksenija vucurovic,实验室认知,société,société,société,c2s-ea 6291) Cedex 51096,法国。电子邮件:kvucurovic@chu-reims.fr。电子邮件:kvucurovic@chu-reims.fr。
1 University of Reims Champagne Ardenne, Cognition, Health, Society Laboratory, EA 6291, 51100 Reims, France 2 Reims Center for Psychotherapy and Neuromodulation, 51100 Reims, France 3 University Center of Psychiatry, EPSM and CHU of Reims, 51100 Reims, France 4 McGill University, Douglas Mental Health University Institute, 11290 Montreal, Canada 5 Champollion National University Institute, Cognition Sciences, Technology & Ergonomics Laboratory, University of Toulouse, 81000 Albi, France 6 INSERM U1247 GRAP, Research Group on Alcohol and Drugs, University of Picardie Jules Verne, 80000 Amiens, France 7 Radiology Department, Reims University Hospital, 51100 Reims, France 8 University of Reims Champagne-Ardenne, CReSTIC Laboratory, 51100法国兰斯 9 兰斯大学香槟 - 阿登医学院,51100 兰斯,法国 通讯地址:Ksenija Vucurovic,Laboratoire Cognition, Santé, Société(C2S - EA 6291),UFR Lettres et Sciences Humaines,57 rue Pierre Taittinger,Reims Cedex 51096,法国。电子邮件:kvucurovic@chu-reims.fr。
用高分辨率原位检测脑制剂中的蛋白质,评估蛋白质-蛋白质相互作用。邻近连接试验 (PLA) 是一种与 DNA 滚动环状扩增 (RCA) 相结合的免疫测定法,是一种易于使用的方法,越来越多地用于原位检测抗原邻近性。PLA 可以高灵敏度地检测和量化分子之间的相互作用。与传统的免疫组织化学 (IHC) 测定相比,PLA 在靶分子可能的相互作用方面提供了更高的分辨率。此外,PLA 不需要常规免疫组织学研究中使用的专用设备。自 2002 年 Fredriksson 及其同事报告该技术以来(Fredriksson 等人,2002),PLA 已广泛用于研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-核酸相互作用、蛋白质修饰和蛋白质表达(Gomez、Shankman、Nguyen 和 Owens,2013;Gu 等人,2013;Gullberg 等人,2004;Lonskaya、Desforges、Hebron 和 Moussa,2013;Roussis、Guille、Myers 和 Scarlett,2016;Soderberg 等人,2006;Trifilieff 等人,2011)。该技术已成功商业化,最初由 Olink(瑞典)生产的 Duolink PLA 试剂盒目前由 Sigma-Aldrich 提供。 Duolink PLA 荧光检测试剂盒可用于绿色 (490/520nm)、橙色 (542/562nm)、红色 (593/622nm) 和 FarRed 646/664nm 的荧光标记,而 DuoLink PLA 明场检测试剂盒使用辣根过氧化物酶 (HRP) 及其底物 NovaRed 进行明场显微镜检查。
问题:本文是“全球海上流动和当地影响:港口城市区域的全球分类和词汇表”问题的一部分,由 Mina Akhavan(代尔夫特理工大学)、Yvonne van Mil(代尔夫特理工大学)和 Carola Hein(代尔夫特理工大学)编辑,完全开放获取,网址为 https://doi.org/10.17645/oas.i442
邻近依赖性生物素化与质谱联用可以表征亚细胞蛋白质组。该技术通过揭示亚突触蛋白质网络(例如突触间隙和突触后密度)显著推动了神经科学的发展。在这种详细水平上分析蛋白质对于理解神经元连接和传递的分子机制至关重要。尽管邻近标记最近成功应用于各种神经元类型,但它尚未用于研究血清素系统。在这项研究中,我们发现了血清素对基于辣根过氧化物酶 (HRP) 的生物素化的未报道的抑制机制。我们的结果表明,血清素显着降低 HEK293T 细胞和原代神经元中不同生物素-XX-酪胺 (BxxP) 浓度的生物素化水平,而多巴胺的干扰最小,突出了这种抑制的特异性。为了抵消这种抑制,我们证明了 Dz-PEG(一种通过偶氮偶联反应消耗血清素的芳基重氮化合物)可恢复生物素化效率。无标记定量蛋白质组学证实血清素会抑制生物素化,而 Dz-PEG 可有效逆转这种抑制。这些发现强调了在邻近依赖性生物素化研究中考虑神经递质干扰的重要性,尤其是对于神经科学中细胞类型特异性分析而言。此外,我们还提供了一种缓解这些挑战的潜在策略,从而提高此类研究的准确性和可靠性。
如果处理对招标邀请的回复涉及记录和处理个人数据(例如姓名、地址和简历),则这些数据将根据 2018 年 10 月 23 日关于保护自然人、欧盟机构、机构、办公室和机构处理个人数据以及此类数据自由流动以及废除第 45/2001 号 (EC) 条例和第 1247/2002/EC 号决定的 (EU) 条例 2018/1725 12 进行处理。除非另有说明,否则任何个人数据将仅用于欧盟委员会作为数据控制者在招标下的评估目的。有关个人数据处理的详细信息,请参阅隐私声明:https://ec.europa.eu/info/funding-tenders/procedures-guidelines-tenders/data-protection-public-proc urement-procedures_en
TurboID 和 APEX2 等邻近标记技术已成为研究蛋白质相互作用的空间组学研究的关键工具。然而,这些反应性物种介导的标记背后的生化机制,尤其是亚微米范围内标记方法的空间模式,仍然知之甚少。在这里,我们利用 DNA 纳米结构平台通过体外测定精确测量 TurboID 和 APEX2 的标记半径。我们的 DNA 纳米标尺设计能够在酶附近以纳米精度部署寡核苷酸条形码标记靶标。通过使用定量 PCR 量化标记产量并将其与目标距离进行映射,我们发现了标记机制的惊人见解。与流行的扩散标记模型相反,我们的结果表明 TurboID 主要通过接触依赖性标记进行操作。同样,APEX2 在其直接接触范围内显示出高标记效率。同时,它对更远的酚表现出低水平的扩散标记。这些发现重新定义了我们对邻近标记酶机制的理解,同时突出了 DNA 纳米技术在空间分析反应物种方面的潜力。
在广告和举行公开听证会后,规划委员会必须在每年偶数年度的7月1日之前通过在前两个日历年内出版的建筑成本指数的累积增加或减少来调整此付款率。规划委员会必须将双年展的公民改善基金利率调整不超过20%。如果每两年一次的税率调整超过20%,则在计算下一次调整之前,必须将多余的美元金额延长并添加到公民改善基金率中。如果此总调整(包括携带的值超过值)再次超过20%,则必须将多余的金额延长并添加到该费率中,然后才能计算下一次双年期调整。
氧化芳香族底物的酶已在一系列基于细胞的技术中显示出效用,包括活细胞邻近标记 (PL) 和电子显微镜 (EM),但也存在一些缺点,例如需要有毒的 H 2 O 2 。在这里,我们探索了漆酶作为哺乳动物细胞中 PL 和 EM 的一种新型酶类。LaccID 是通过 11 轮定向进化从祖先真菌漆酶产生的,它使用 O 2 而不是有毒的 H 2 O 2 催化多种芳香族底物的单电子氧化,并且对活细胞和固定细胞的表面质膜均表现出活性选择性。我们表明,LaccID 可与基于质谱的蛋白质组学一起使用,以绘制通过抗原特异性 T 细胞受体与肿瘤细胞结合的 T 细胞不断变化的表面组成。此外,我们使用 LaccID 作为可遗传编码的标签,用于在哺乳动物细胞培养物和苍蝇大脑中通过 EM 可视化细胞表面特征。我们的研究为未来基于细胞的 LaccID 应用铺平了道路。
理论上研究了接近性诱导的自旋轨道和交换耦合对菱形三层石墨烯(RTG)相关相图的影响。通过使用Ab Initif拟合的RTG的有效模型,该模型由过渡金属二分法(自旋 - 轨道接近效应)和铁磁CR 2 GE 2 TE 6(交换接近效应),我们将库仑相互作用纳入了随机相互作用,以探索在不同的位置和不同位置的潜在相关阶段。我们发现,由旋转轨道接近效应引起的丰富的自旋瓦利分辨石头和Intervalley相干性不稳定性,例如由于存在谷化量的耦合而出现了旋转 - 瓦利 - 固定相。同样,接近交换通过偏置旋转方向来消除相位变性,从而实现了磁相关效应 - 相关相位对封装铁磁性层的相对磁化方向(平行或反平行)的强灵敏度。