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World File Search System酵母
使用 CRISPR/Cas9- 改组酵母基因组...
尽管转座因子之间的同源重组可通过促进染色体重排来驱动酵母基因组进化，但其潜在机制的细节尚未完全阐明。在酿酒酵母基因组中，最常见的转座子类别是逆转录转座子 Ty1。在本文中，我们探讨了 Cas9 诱导的针对 Ty1 因子的双链断裂 (DSB) 如何在该酵母物种中产生基因组改变。在 Cas9 诱导后，我们观察到染色体重排（例如缺失、重复和易位）显著增多。此外，我们发现有丝分裂重组率升高，导致杂合性丧失。通过 Southern 分析结合短读和长读 DNA 测序，我们揭示了逆转录转座子中诱导的重组的重要特征。几乎所有的染色体重排都反映了 Ty1 元件处 DSB 的修复，这是通过非等位基因同源重组实现的；成簇的 Ty 元件是染色体重排的热点。相反，大部分（约四分之三）等位基因有丝分裂重组事件在独特序列中存在断点。我们的分析表明，后一些事件反映了 Ty 元件中产生的断端的广泛处理，这些断端延伸到独特序列中，从而导致断裂诱导的复制。最后，我们发现单倍体和二倍体菌株对用于修复双链 DNA 断裂的途径有不同的偏好。我们的研究结果表明，逆转录转座子中的 DNA 损伤在推动基因组进化方面的重要性。
酵母提取物钙碳酸盐葡萄糖琼脂
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酿酒酵母中编码的絮凝蛋白
摘要 真菌粘附素 (Als) 或絮凝素是一类细胞表面蛋白，可介导对各种生物和非生物表面的粘附。最初在致病性白色念珠菌中发现的 Als 蛋白的一个显著特征是形成功能性淀粉样蛋白，介导顺式相互作用，从而形成粘附素纳米结构域，以及对立细胞的淀粉样蛋白序列之间的反式相互作用。在本报告中，我们表明，酿酒酵母中 FLO11 编码的絮凝素的行为类似于白色念珠菌中的粘附素。为此，我们表明，在外部物理力作用下形成纳米结构域需要 Flo11 蛋白中一定数量的淀粉样蛋白形成序列。然后，我们利用基因组编辑方法，构建了在内源性 FLO11 启动子下表达 Flo11 蛋白变体的菌株，结果证明，淀粉样蛋白形成序列的缺失会大大降低细胞间相互作用，但对塑料粘附或琼脂中的侵袭性生长没有影响，这两种表型都依赖于 Flo11p 的 N 端和 C 端。最后，我们表明 Flo11 的位置不会因淀粉样蛋白形成序列的缺失或蛋白质 N 端或 C 端的去除而改变。
使用的酵母衍生成分的安全评估...
酵母β-葡萄糖提取物酵母多糖葡萄糖酿酒酵母提取物作为国际化妆品成分词典和手册中给出的酵母的定义，非常广泛，该面板发布了该成分组的数据公告（IDA）不足，要求对这些成分进行澄清，并在这些产品中使用了这些成分的配置。在发行IDA时，直到2022年2月，酿酒酵母被认为是制备这些酵母菌成分的主要物种。然而，在2022年2月7日，有关酵母提取物的摘要信息，这些酵母提取物是从理事会收到了属于Saccharomycetes类（例如Pichia anomala）的其他几种酵母菌。由于这些新信息，在2022年3月的会议上，发出了一份策略备忘录，要求小组征求报告是否应仅审查酿酒酵母的苏氏糖疗法，或者，如果源自其他Yeast的成分，则在其他酵母中，saccharomycetes class class（例如，Pichia Anomala exterfice of Saccharomycetes class class Saccharomycetes class）。小组建议准备了另一个策略备忘录，包括词典中当前列出的所有酵母成分，以及有关这些成分（或它们的相应物种）是否用于食品中以及它们在化妆品中的使用频率的说明。该小组还要求专家提供有关酵母菌分类和一般生物学知识的指导，并再次要求对酵母菌物种的工业进行验证，这些行业用于制造一般酵母成分（例如酵母提取物）。在2022年9月的会议上，专家介绍了酵母衍生的化妆品成分的制造，一般特征和分类。（此演示文稿可以在数据包中找到为presentation_yeast_062023。）小组审查了Winci词典中存在的所有酵母衍生成分的清单，并确定应根据所有成分（无论使用频率）准备修订的报告草案。因此，提交了56种酵母衍生成分的修订报告草案（report_yeast_062023）以进行审查。不幸的是，行业尚未对所有可用于生产通用酵母成分的酵母种类进行验证。但是，在酵母提取物上收到了三个数据提交（如下所述），并且酵母菌的属和种类（有几种）被用来得出每个提交中称为测试文章的酵母提取物。基于与理事会的个人沟通，即使酵母提取物被确定为INCI名称，也确定这些数据应与这些提交中提到的属和物种得出的特定成分相关联。（例如，在报告中总结了从斑岩异菌衍生出的酵母提取物上的敏化数据作为pichia anomala提取物的研究。）以下是收到的数据：
使用的酵母衍生成分的安全评估...
封闭是关于化妆品中使用的酵母衍生成分安全性评估的暂定报告草案（report_yeast_122023）。在2023年6月的会议上，该小组审查了有关这56种酵母衍生成分的修订报告草案，并为该成分组发布了第二份数据公告（IDA）。（第一个IDA是在2021年9月的会议上发布的。）为了确定这些成分的安全性，在此IDA中，该面板要求确认性皮肤化的敏化数据和有关食品使用/通常被认为是安全的（GRAS）状态的数据，用于在所有不存在的成分中得出这些成分。代替食品使用/GRAS状态数据，可以考虑28天的皮肤毒性数据。此外，在6月的会议上，该小组还要求有关合格的安全性推定（QPS）状态（欧盟指定），以确定是否可以使用此参数来清除系统的毒性/食品食品使用数据数据，这些数据需求来自具有QPS状态的酵母菌物种的成分需求。有关QPS状态和具有QPS状态名称的酵母菌列表的信息，可以在数据包中找到为data1_yeast_122023。
营救酵母人工染色体的末端碎片
酵母人工染色体（YAC）为隔离和映射哺乳动物染色体的区域提供了强大的工具。，我们通过通过同源重组将救援质粒插入YAC载体中的DNA片段开发了一种快速有效的方法来分离代表YAC克隆极端的DNA片段。构建了两个救援载体，其中包含一个酵母Lys2可选基因，一个细菌的复制起源，一个抗生素耐药基因，一个包含多个限制位点的聚链链接和与PYAC4载体同源的片段。“终端克隆”程序涉及将救援载体转化为带有YAC克隆的酵母细胞，然后制备酵母DNA并转化为细菌细胞。所得质粒的长度最高20 kb，可用作杂交探针，作为直接DNA测序的模板，以及作为荧光原位杂交绘制的探针。这些向量适合从使用PYAC衍生载体构建的任何YAC中拯救端键。我们通过从人类YAC图书馆中拯救Yac-end片段来证明这些质粒的实用性。
回顾文章的DNA复制和损坏检查点和减数分裂细胞周期控制，并在酵母中进行酵母
细胞周期检查点机制确保细胞周期事件的顺序保留基因组完整性。在其中，当DNA复制被抑制或DNA损坏时，DNA恢复和DNA破坏检查点可防止染色体分离。最近的研究已经确定了这两个对照的调节网络的概述，这些对照显然在所有真核生物中起作用。此外，看来这些检查点有两个逮捕点，一个是在进入有丝分裂之前，另一个是在染色体分离之前。前一点需要中央细胞周期调节剂CDC2激酶，而后者涉及称为促进复合物的泛素连接酶的几个关键调节剂和底物。这些细胞周期调节器与几个键
鉴定酿酒酵母PIF1 DNA解旋酶
新型的冠状病毒19（Covid-19）在全球造成了毁灭性影响，医护人员是受大流行影响最大的人之一。尽管医护人员在全球和加纳的COVID-19疫苗接种中优先考虑，但犹豫接受疫苗的犹豫导致对大流行的控制延迟。在加纳，医疗保健工作者在疫苗推广前接受了39.3％的疫苗接种。因此，这项研究评估了加纳后疫苗发生期间，加纳的卫生保健工人中共同疫苗接种和相关因素的吸收。这是一项分析性横断面研究，该研究使用半结构化问卷收集有关COVID-19的数据疫苗接种摄取和影响因素的数据。256名医护人员使用分层的随机抽样方法在加纳的Ayawaso West市选择。描述性统计数据用于检查社会人口统计学因素和李克特量表响应。双变量和多变量的逻辑回归，以识别疫苗摄取的预分量，并在p <0.05时宣布统计显着性。超过四分之三的参与者220（85.9％）至少接受了COVID-19疫苗接种的至少一剂，而36（14.9％）犹豫不决。超过一半139（54.3％）对Covid-19疫苗接种有足够的知识，而大多数（73.4％）对其有效性具有积极的看法。218（85.2％）的HCW对COVID-19疫苗接种具有积极的态度。加纳HCW之间的共同销量是有希望的。对Covid-19-19疫苗接种的积极态度（AOR = 4.3; 95％CI：1.4，13.0）和高线索（AOR = 5.7; 95％CI：2.2，14.8）是预测医务人员中COVID-19的疫苗接种的因素。但是，在很大一部分HCWS中接受疫苗接种的犹豫引起了人们的关注。为了确保所有卫生保健工作者的疫苗接种，促进疫苗接种的干预措施应针对疫苗接种的关键决定因素，例如对疫苗接种的态度和行动提示。
CRISPR 系统简介及其在酵母中的应用
摘要 细菌和古菌中的适应性免疫系统负责识别入侵的 DNA 序列，其特点是具有多组短回文序列，这些序列通过间隔区（CRISPR）定期重复和穿插。 CRISPR 相关蛋白 (Cas) 和与特定靶 DNA 序列互补的引导 RNA 是用于改造生物的最广泛使用的基因编辑工具之一。近年来，CRISPR/Cas系统种类不断增多，适应酵母等具有生物技术潜力的微生物。本综述的目的是促进对 CRISPR/Cas9 系统基本概念的理解，并识别已在不同酵母中成功实施的某些此类分子工具的变体。此外，还描述了几种正在彻底改变研究的基于 CRISPR 的新技术。关键词：CRISPR、Cas9、基因编辑、酵母、基因工程、分子工具。