结果,获得的葡萄酒的酒精含量较高,酸性较低,有时较重,有时不那么强烈 - 与市场期望完全不一致。如果我们要了解危及的问题并提出适当的解决方案,将这些感官属性转化为Oenologologicy术语至关重要。可饮用性是用来描述一种易于消费者享用的红酒的术语。对于酿酒师来说,这意味着要仔细考虑浸渍行程(热镀锌与传统浸渍),并在单宁蛋白上工作以控制口感参数,例如结构和涩味。这也是构成香气并控制什么可以掩盖它们的问题。
摘要:Cyprinid疱疹病毒2(CYHV-2)是疱疹病毒造血坏死(HVHN)疾病的病因,在克鲁克斯鲤鱼培养工业中造成严重的经济损失。在这项研究中,通过在酿酒酵母细胞的表面显示ORF132(称为EBY100/PYD1-ORF132),我们评估了针对CYHV-2感染的口服给药的保护性效率。用EBY100/PYD1-ORF132口服疫苗接种后,在粘膜和全身组织中引起了强烈的先天和适应性免疫反应。重要的是,口服疫苗接种为CRUCIAS CARP CYHV-2感染提供了显着的保护,导致相对生存率(RPS)为64%。此外,口服抑制了选定组织中的病毒负荷并减轻了组织学损害。我们的结果表明,在酿酒酵母上的表面播种的ORF132可以用作针对CYHV-2感染的潜在口服疫苗。
摘要:腐生担子菌分泌的漆酶是一种多功能生物催化剂,仅需氧气即可氧化多种芳香族化合物。酿酒酵母是真菌漆酶工程的首选宿主。为了帮助酵母分泌活性酶,天然信号肽通常被酿酒酵母α交配因子(MF α 1)的前原前导序列取代。然而,在大多数情况下,只能获得基础酶水平。在酿酒酵母中与α因子前原前导序列融合的漆酶的定向进化过程中,我们证明了信号肽中积累的突变显著提高了酶的分泌。在这里,我们描述了为增强在酿酒酵母培养物液体提取物中检测到的漆酶活性而实施的不同蛋白质工程方法。我们通过使用实验室中连续进行的漆酶进化活动获得的适应性最强的突变 α 因子前导序列,证明了天然和工程漆酶的分泌得到改善。我们还特别关注了蛋白质 N-糖基化在漆酶生产和特性中的作用,以及通过共识设计引入保守氨基酸,从而能够表达酵母原本不会产生的某些漆酶。最后,我们修改了在之前的定向进化活动中积累的漆酶编码序列 (CDS) 突变的贡献,这些突变促进了酶的生产。
4-羟基苯甲酸(PHBA)是粘酸和液晶聚合物的重要工业前体,其生产基于石化工业。为了减少我们对化石燃料的依赖并提高可持续性,微生物工程是一种更具吸引力的方法,用于替代传统的化学技术。但是,微生物菌株的优化仍然受筛选阶段的高度限制。生物传感器通过减少筛选时间并实现更高的吞吐量来帮助减轻这一问题。在本文中,我们构建了一个名为SBAD的合成生物传感器,由R. palustris的HBAR的PHBA结合结构域组成,N-terminus的Lexa DNA结合结构域和C-Terminus的反式激活域B112。在存在不同的苯甲酸衍生物的情况下测试了SBAD的响应,并通过流量细胞仪测量细胞荧光输出。除了其他羧酸(包括P-氨基苯甲酸),水杨酸,蒽,阿司匹林和苯甲酸在内的其他羧酸之外,还发现了生物传感器通过培养基中外部添加PHBA激活。此外,我们能够证明该生物传感器可以检测到遗传修饰的酵母菌菌株中PHBA的体内产生。在生物传感器荧光和PHBA浓度之间观察到了良好的线性。因此,该生物传感器将非常适合作为高吞吐量筛选工具,可通过代谢工程生产苯甲酸衍生物。
我们已经确定了从MATA到MATA的酵母交配型基因的同义转换的两个新型中间体。在HO核酸内切酶裂解后,观察到5'至3'的外核解消化,直到ho切割远端,产生了3'端的单链尾巴。在无法切换的RAD52应变中,此镜头更为广泛。令人惊讶的是,HO切割的近端受到保护,免受降解。这种稳定取决于无声复制供体序列的存在。通过定量应用聚合酶链反应(PCR)来鉴定第二个中间体。在MAT近端YA交界处出现之前,开关产物的YVA-MAT远端共价片段出现。未检测到MAT远端与HML远端序列的共价连接。我们建议,HO CUT远端的MAT DNA侵入完整的供体,并通过DNA合成扩展。在RAD52应变中阻止了此步骤。这些中间体与MAT开关的模型一致,在该模型中,HO切割的远端最初在链入侵和从供体中传递信息。关键词:重组机制/交配型/酵母/双链休息时间!rads2
酿酒酵母是广泛使用的生物合成系统之一,用于生产各种生物产品,尤其是生物治疗药物和重组蛋白。由于外来基因的表达和插入总是受到酿酒酵母内源性因素和非生产性程序的阻碍,因此已经开发出各种技术来增强转录的强度和效率并促进基因编辑程序。因此,阻碍异源蛋白质分泌的限制已经得到克服。已经开发出负责转录起始和精确调控表达的高效启动子,这些启动子可以通过合成启动子和双启动子表达系统进行精确调控。适当的密码子优化和协调以适应酿酒酵母的基因组密码子丰度有望进一步提高转录和翻译效率。通过将专门设计的信号肽与上游外源基因融合,可以实现高效、准确的转运,从而促进新合成的蛋白质的分泌。除了广泛应用的启动子工程技术和明确的内质网分泌途径机制外,创新的基因组编辑技术 CRISPR/Cas(成簇的规律间隔的短回文重复序列/CRISPR 相关系统)及其衍生工具可以更精确、更有效地进行基因破坏、定点突变和外源基因插入。本综述重点介绍为精确调控酿酒酵母表达系统的代谢而开发的复杂工程技术和新兴遗传技术。
摘要 芽殖酵母的有丝分裂退出取决于有丝分裂纺锤体沿细胞极性轴的正确定位。当纺锤体无法准确定位时,一种名为纺锤体位置检查点 (SPOC) 的监视机制会阻止细胞退出有丝分裂。具有缺陷 SPOC 的突变体会变成多核并失去其基因组完整性。然而,对 SPOC 机制的全面了解尚不足。在本研究中,我们确定了 1 型蛋白磷酸酶 Glc7 与其调节蛋白 Bud14 相关联,这是一种新的检查点成分。我们进一步表明,Glc7-Bud14 促进了 SPOC 效应蛋白 Bfa1 的去磷酸化。我们的结果表明,两种机制并行作用以产生强大的检查点反应:首先,SPOC 激酶 Kin4 将 Bfa1 与抑制激酶 Cdc5 隔离开来,其次,Glc7-Bud14 使 Bfa1 去磷酸化以完全激活检查点效应物。
合成酵母细胞工厂为一系列产品的可持续供应提供了一个显着的解决方案,从大型工业化学品到高价值药品化合物。合成生物学是一个领域,在其中对代谢途径进行了深入研究和设计。群集,定期间隔,短,全文重复相关(CRISPR)/CRISPR相关蛋白9(CAS9)技术已成为合成生物学的最新基因编辑技术。最近,使用不同的CRISPR/CAS9系统的使用已扩展到酵母工程领域,用于单核苷酸分辨率编辑,多基因编辑,转录调控和基因组规模的修改。这种进步系统导致了涉及减少劳动和时间的加速微生物工程,并增强了对细胞遗传学和生理学的理解。本评论简要概述了最新的研究进度以及CRISPR/CAS9系统在遗传操作中的使用,重点是酿酒酵母酿酒酵母细胞工厂工程的应用。
尽管对识别和管理运动相关脑震荡的研究显著增加,但它仍然是运动医学专业人员面临的最复杂的伤害之一。脑震荡是由于直接或间接作用于颅骨的力量导致大脑快速加速和减速而引起的。大脑运动速度的突然变化会引起神经元剪切,从而导致离子平衡 1 和新陈代谢的变化。2 当伴有临床体征和症状时,细胞水平的变化通常被称为轻度创伤性脑损伤 或脑震荡。脑震荡发生在所有年龄段和所有运动中的男性和女性中,但最常见于接触和碰撞活动。从急诊室就诊收集的数据显示,2001 年至 2009 年间非致命性创伤性脑损伤增加了 62%(153 375 至 248 418),3 美国每年报告和未报告的运动和娱乐相关脑震荡多达 380 万起。 4 作为持证医疗专业人员,运动训练师 (AT) 接受全面的教学和临床培训,
作为既定战斗节奏的一部分,Truscott 团队每周执行两次标准同步事件(见图 5)。每周一,TM Truscott 的核心成员聚集在师总部,并按照标准化议程开展工作。本次会议包括以现代化为重点的短期和长期日历更新(G3 现代化);设备到达和部署(G3 现代化);旧设备剥离(G4);试点、测试和评估计划(创新);部队管理(G5 部队管理 (FM) 和 DPTMS FM);人员(G1);财务(G8);设施(师工程师 (DIVENG));平台和系统特定更新(由 WFF 提供);现代化差距和解决方案(由 WFF 提供);以及对 TM Truscott 决策支持矩阵的审查(见图 4)。下属和租户单位代表受邀(但不强制)参加周一同步活动(也可在 Army 365 上访问)。