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棕色蜘蛛毒液磷脂酶 D 作为调节黑色素瘤细胞生物学的工具
棕色蜘蛛毒液磷脂酶 D 作为调节黑色素瘤细胞生物学的工具摘要来自 Loxosceles 毒液的磷脂酶 D (PLD) 是一种裂解磷脂的酶，可引发生物效应，即不受控制的炎症反应。我们用来自蜘蛛 Loxosceles intermedia 毒液的重组 PLD 处理黑色素瘤细胞系 B16-F1 和 B16-F10。通过特异性抗体或嵌合 PLD-GFP 以及共聚焦荧光显微镜、流式细胞术、倒置显微镜和扫描电子显微镜来评估毒素与细胞表面的结合和调节事件。使用 MTT、台盼蓝和 CellTiterGlo 进行细胞毒性试验；使用 Fluo-4、荧光分光光度法、荧光共聚焦显微镜和流式细胞术测量细胞内钙。使用膜联蛋白 V 和流式细胞术评估磷脂酰丝氨酸外化。通过系统生物学和实时PCR研究细胞生长和增殖（MTT和Cyquant）、集落形成（克隆形成测定和软琼脂测定）、迁移（划痕测定）以及相关迁移和增殖基因转录本的表达等细胞行为。 PLD 与细胞表面的结合以及胞外体的产生以及随后的纳米簇的产生具有浓度和时间依赖性。这些治疗不会引起细胞毒性，但会增加细胞内钙、磷脂酰丝氨酸的外化、细胞生长、增殖、集落形成和迁移。毒素触发细胞a
来源:Arácnido图片来源：Luis A. Roque，Arácnido 分类学 人类淋巴细胞清道夫受体 CD5 和 CD6 与眼镜蛇、澳大利亚Androctonus australis 和蜜蜂毒液毒素的相互作用 摘要 动物毒液通过与先天免疫系统的模式识别受体 (PRR) 等相互作用，诱发全身炎症反应综合征。 CD5 和 CD6 是富含半胱氨酸的清道夫受体超家族的淋巴成员，具有针对源自细菌、真菌、病毒和/或寄生虫的微生物相关分子模式 (MAMP) 的 PRR 活性。在本研究中，我们旨在研究 CD5 和 CD6 与眼镜蛇 (Naja haje)、蝎子 (Androctonus australis) 和蜜蜂 (Apis mellifera) 毒液的相互作用。结合测定揭示了可溶性人类 CD5 和 CD6 受体与三种毒液的蛋白质天然成分之间存在直接、剂量依赖性和特异性的相互作用。蛋白质组学分析鉴定出毒液神经生长因子、碱性磷酸...